| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略语中英文对照 | 第12-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-23页 |
| 第一章 真核生物基因转录水平调控研究进展 | 第13-19页 |
| 1 真核生物基因转录调控区研究概况 | 第13-15页 |
| ·真核生物的启动子 | 第13-15页 |
| ·真核生物的调控元件 | 第15页 |
| 2 真核生物基因的转录调控因子研究概况 | 第15-19页 |
| ·真核生物基因的转录调控因子 | 第15-16页 |
| ·真核生物基因转录调控因子的研究方法 | 第16-19页 |
| 第二章 猪Siglec-1基因研究进展 | 第19-23页 |
| 1 Siglec-1基因概况 | 第19-20页 |
| 2 Siglec-1基因与猪繁殖与呼吸综合征 | 第20-23页 |
| 第二部分 实验研究 | 第23-67页 |
| 第三章 猪Siglec-1基因5'端调控序列生物信息学分析及5'-RACE分析 | 第23-41页 |
| 1 实验材料与主要仪器 | 第23-25页 |
| ·实验样品 | 第23页 |
| ·实验试剂 | 第23-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·网络资源及生物信息学软件 | 第24-25页 |
| 2 实验方法 | 第25-33页 |
| ·猪肺泡巨噬细胞CRL-2844体外培养 | 第25-26页 |
| ·CRL-2844细胞总RNA提取及反转录 | 第26-27页 |
| ·猪Siglec-1基因5'-RACE分析 | 第27-30页 |
| ·T-A克隆测序 | 第30-32页 |
| ·猪Siglec-1基因5'端调控区生物信息学分析 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-38页 |
| ·Siglec-1基因5'-RACE分析 | 第33-34页 |
| ·测序确定转录起始位点(TSS) | 第34-35页 |
| ·Siglec-1基因5端调控序列生物信息学分析 | 第35-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 5 小结 | 第40-41页 |
| 第四章 猪Siglec-1基因启动子缺失表达载体构建及细胞特异性验证 | 第41-57页 |
| 1 实验材料与主要仪器 | 第41-42页 |
| ·实验样品 | 第41页 |
| ·实验试剂 | 第41-42页 |
| ·主要仪器及相关生物信息学网站 | 第42页 |
| 2 实验方法 | 第42-49页 |
| ·猪Siglec-1基因启动子缺失表达载体构建 | 第42-47页 |
| ·猪Siglec-1基因启动子活性分析及肺泡巨噬细胞细胞特异性验证 | 第47-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-53页 |
| ·XhoⅠ、HindⅢ双酶切鉴定重组表达载体 | 第49-50页 |
| ·CRL-2844细胞转染条件的优化 | 第50-51页 |
| ·猪Siglec-1基因启动子缺失片段在CRL-2844细胞中的活性分析 | 第51-52页 |
| ·猪Siglec-1基因启动子缺失片段肺泡巨噬细胞特异性分析 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| ·关于启动子缺失表达载体构建 | 第53页 |
| ·关于细胞培养、转染与双报告基因检测系统 | 第53-54页 |
| ·关于启动子活性调控 | 第54-55页 |
| 5 小结 | 第55-57页 |
| 第五章 猪Siglec-1基因启动子突变分析 | 第57-67页 |
| 1 实验材料 | 第57-58页 |
| ·实验样品 | 第57页 |
| ·实验试剂 | 第57-58页 |
| 2 实验方法 | 第58-61页 |
| ·-869～+81bp启动子片段连接到pMD19-T Vector | 第58页 |
| ·-869～+81bp启动子片段突变引物设计 | 第58-59页 |
| ·-869～+81bp启动子片段突变分析 | 第59-61页 |
| ·-869～+81bp突变体重组质粒构建 | 第61页 |
| ·-869～+81bp突变体重组质粒在CRL-2844细胞中的活性分析 | 第61页 |
| 3 结果与分析 | 第61-64页 |
| ·-869～+81bp片段的T-A克隆双酶切鉴定 | 第61-62页 |
| ·定点突变测序结果 | 第62-63页 |
| ·突变启动子的活性分析 | 第63-64页 |
| 4 讨论 | 第64-65页 |
| 5 小结 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 全文结论 | 第73-75页 |
| 全文创新点 | 第75-77页 |
| 附录 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
