| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-22页 |
| ·出芽短梗霉 | 第11-12页 |
| ·出芽短梗霉的菌落特征 | 第11页 |
| ·出芽短梗霉的菌种选育 | 第11-12页 |
| ·普鲁兰糖 | 第12-15页 |
| ·普鲁兰糖的结构 | 第12-13页 |
| ·普鲁兰糖的性质及用途 | 第13-14页 |
| ·普鲁兰糖产生的合成机制的探究 | 第14-15页 |
| ·出芽短梗霉的发酵 | 第15-16页 |
| ·发酵产量与PH的关系 | 第15页 |
| ·发酵产量与温度的关系 | 第15-16页 |
| ·发酵产量与溶氧量的关系 | 第16页 |
| ·分子水平的研究 | 第16-20页 |
| ·基因重组技术 | 第17页 |
| ·基因敲除技术 | 第17-19页 |
| ·3-磷酸甘油醛脱氢酶 | 第19页 |
| ·质粒pPICZα与Zeocin抗生素 | 第19-20页 |
| ·本实验研究方法与目的 | 第20-22页 |
| 2 材料和方法 | 第22-34页 |
| ·材料 | 第22-26页 |
| ·菌株质粒引物 | 第22-23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·主要缓冲液 | 第24-26页 |
| ·方法 | 第26-34页 |
| ·出芽短梗霉的培养和保藏 | 第26页 |
| ·SDS-PAGE检测菌体蛋白 | 第26-28页 |
| ·电泳结果分析及质谱分析 | 第28页 |
| ·简并引物的设计 | 第28页 |
| ·出芽短梗霉基因组DNA的提取 | 第28-29页 |
| ·3-磷酸甘油醛脱氢酶基因片段的克隆 | 第29-31页 |
| ·3-磷酸甘油醛脱氢酶基因片段的敲除 | 第31-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-42页 |
| ·出芽短梗霉的镜检结果 | 第34页 |
| ·SDS-PAGE电泳结果 | 第34-35页 |
| ·出芽短梗霉基因组DNA的提取 | 第35页 |
| ·PCR扩增3-磷酸甘油醛脱氢酶基因 | 第35-36页 |
| ·蓝斑菌落和白斑菌落质粒大小对比 | 第36页 |
| ·PCR验证疑似重组子 | 第36-37页 |
| ·疑似重组子测序结果 | 第37-38页 |
| ·SFH-PCR法扩增Zeocin抗生素基因 | 第38页 |
| ·Zeocin抗生素对出芽短梗霉最低杀伤浓度的确定 | 第38-39页 |
| ·片段电击转化入出芽短梗霉 | 第39页 |
| ·转化菌PCR验证 | 第39-40页 |
| ·3-磷酸甘油醛脱氢酶基因片段敲除前后菌株细胞形态特征 | 第40页 |
| ·3-磷酸甘油醛脱氢酶基因片段敲除前后菌株产普鲁兰糖变化 | 第40-42页 |
| 4 讨论与展望 | 第42-44页 |
| ·差异蛋白的筛选 | 第42页 |
| ·简并引物的设计 | 第42页 |
| ·PCR反应聚合酶的选择 | 第42-43页 |
| ·出芽短梗霉感受态细胞的制备 | 第43页 |
| ·展望 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |
| 致谢 | 第47页 |
