| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 縮写 | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-19页 |
| 1. 烟碱类杀虫剂的概述 | 第11-13页 |
| ·烟碱类杀虫剂 | 第11页 |
| ·烟碱类杀虫剂主要结构 | 第11-13页 |
| ·烟碱类杀虫剂作用机理 | 第13页 |
| 2. 烟碱类杀虫剂的代谢研究进展 | 第13-17页 |
| ·动植物体内的代谢研究 | 第13-15页 |
| ·土壤中的代谢研究 | 第15-17页 |
| ·微生物的共代谢作用 | 第17页 |
| 3. 本试验的设计思路与方法 | 第17-19页 |
| 第二章 降解噻虫啉微生物的筛选、鉴定研究 | 第19-29页 |
| 1 材料与方法 | 第19-22页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第19页 |
| ·培养基 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-22页 |
| ·微生物的分离 | 第20页 |
| ·生长细胞转化 | 第20页 |
| ·静息细胞的制备和转化 | 第20-21页 |
| ·静息细胞制备 | 第20-21页 |
| ·静息细胞转化 | 第21页 |
| ·HPLC分析 | 第21页 |
| ·菌落PCR--细菌16S rDNA扩增 | 第21-22页 |
| 2 实验结果 | 第22-27页 |
| ·THI的土壤降解 | 第22页 |
| ·可降解THI的微生物筛选 | 第22-25页 |
| ·菌种鉴定 | 第25-26页 |
| ·土壤提取液对两株菌转化THI的影响 | 第26-27页 |
| 3 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 降解TMX微生物的筛选、鉴定及其TMX代谢途径研究 | 第29-55页 |
| 第一节 降解TMX微生物的筛选、鉴定及其降解TMX能力分析 | 第29-41页 |
| 1 材料与方法 | 第29-31页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第29页 |
| ·培养基 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-31页 |
| ·细菌的富集与分离 | 第30页 |
| ·菌种保藏 | 第30页 |
| ·HPLC和LC/MS分析 | 第30页 |
| ·菌落PCR—细菌16S rDNA扩增 | 第30-31页 |
| ·扫描电镜样品制备 | 第31页 |
| ·生长细胞转化 | 第31页 |
| ·静息细胞的制备与转化 | 第31页 |
| 2 实验结果 | 第31-39页 |
| ·降解TMX微生物的富集 | 第31-33页 |
| ·LC/MS分析 | 第33-35页 |
| ·菌种鉴定 | 第35-37页 |
| ·分离菌的降解TMX能力分析 | 第37-39页 |
| ·生长细胞转化 | 第37页 |
| ·静息细胞转化 | 第37-39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 第二节 化学合成TMX的代谢产物及标准曲线的制作 | 第41-45页 |
| 1 材料与方法 | 第41-42页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-42页 |
| ·urea TMX的化学方法合成 | 第41页 |
| ·nitroso TMX的化学方法合成 | 第41-42页 |
| ·HPLC分析 | 第42页 |
| ·标准溶液配制 | 第42页 |
| 2 实验结果 | 第42-43页 |
| ·TMX、urea TMX和nitroso TMX的标准校正曲线的线性回归方程 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 第三节 E.adhaerens TMX-23降解TMX初步优化 | 第45-50页 |
| 1 材料与方法 | 第45-46页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第45页 |
| ·培养基 | 第45-46页 |
| ·实验方法 | 第46页 |
| ·生长细胞转化 | 第46页 |
| ·静息细胞转化 | 第46页 |
| 2 实验结果 | 第46-48页 |
| ·不同TMX浓度对E.adhaerens TMX-23降解活力的影响 | 第46-47页 |
| ·葡萄糖对E.adhaerens TMX-23降解TMX的影响 | 第47-48页 |
| ·葡萄糖对E.adhaerens TMX-23静息细胞降解TMX的影响 | 第48页 |
| ·不同溶氧量对E.adhaerens TMX-23降解TMX的影响 | 第48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 第四节 六种菌株的固氮能力测定及TMX对其生长的影响 | 第50-55页 |
| 1 材料与方法 | 第50-51页 |
| ·培养基 | 第50-51页 |
| ·菌种 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51页 |
| ·固氮能力测定 | 第51页 |
| ·10mg/L TMX对6菌株生物量的影响 | 第51页 |
| 2 实验结果 | 第51-53页 |
| ·固氮能力测定 | 第51-52页 |
| ·TMX对六菌株生物量的影响 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| 第四章 快速降解TMX的富集培养液中细菌多样性研究 | 第55-67页 |
| 1 材料与方法 | 第55-61页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第55页 |
| ·相关试剂配制 | 第55-56页 |
| ·DNA提取缓冲液 | 第55-56页 |
| ·E.coli质粒提取缓冲液 | 第56页 |
| ·不同变性剂浓度胶溶液的配制 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-61页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第56-57页 |
| ·PCR | 第57-59页 |
| ·PCR产物的浓缩 | 第59页 |
| ·变性梯度凝胶电泳 | 第59页 |
| ·染色和凝胶成像 | 第59页 |
| ·DGGE胶中目的条带的切胶回收和PCR产物纯化 | 第59页 |
| ·DNA片段连接pMD18-T载体 | 第59页 |
| ·质粒提取(碱变性法抽提质粒) | 第59-60页 |
| ·CaCl_2感受态细胞的制备(E.coli DH10B) | 第60页 |
| ·TA连接产物化转入E.coli DH10B感受态细胞 | 第60页 |
| ·测序序列比对 | 第60-61页 |
| 2 实验结果 | 第61-65页 |
| ·混合菌基因组DNA | 第61页 |
| ·PCR扩增结果 | 第61-62页 |
| ·变性梯度凝胶电泳图 | 第62-63页 |
| ·目的片段连TA阳性克隆筛选 | 第63页 |
| ·比对结果及聚类分析 | 第63-65页 |
| 3 讨论 | 第65-67页 |
| 本文的创新与不足之处 | 第67-68页 |
| 附：GENBANK登录号 | 第68-69页 |
| 科研成果 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
