摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
缩略语 | 第10-11页 |
前言 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
1. 枣果核发育的研究 | 第12-13页 |
·枣果核发育 | 第12页 |
·枣果核发育与木质素 | 第12-13页 |
·枣果核发育与激素 | 第13页 |
2. 木质素代谢研究进展 | 第13-19页 |
·木质素的结构与种类 | 第13-14页 |
·木质素代谢途径 | 第14-15页 |
·木质素合成的相关酶类 | 第15-19页 |
·苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonialyase,PAL) | 第16-17页 |
·多酚氧化酶(polyphenoloxidase,PPO) | 第17页 |
·过氧化物酶(peroxidase,POD) | 第17-18页 |
·生长素氧化酶(Indoleacetic acid oxidase,IOD) | 第18-19页 |
3 研究目的及意义 | 第19-20页 |
第二章 枣PAL、PPO基因的克隆及生物信息学分析 | 第20-44页 |
摘要 | 第20页 |
1 试验材料 | 第20-21页 |
·试验材料 | 第20页 |
·菌体 | 第20页 |
·引物 | 第20-21页 |
·主要试剂 | 第21页 |
·实验仪器 | 第21页 |
2 试验方法 | 第21-27页 |
·试验材料RNA的提取 | 第21页 |
·cDNA的合成 | 第21-22页 |
·RNA纯化 | 第21-22页 |
·cDNA合成 | 第22页 |
·PCR扩增体系、程序及琼脂糖电泳 | 第22-24页 |
·PCR扩增目的片段产物回收 | 第24页 |
·目的片段与T-载体的连接 | 第24页 |
·连接产物转化(热激法)、涂板及菌液培养 | 第24-25页 |
·RACE(rapid amplification of cDNA ends)末端片段扩增 | 第25-27页 |
3 结果与分析 | 第27-41页 |
·枣果实RNA提取 | 第27-28页 |
·PAL基因的克隆及序列分析 | 第28-34页 |
·PAL基因的克隆 | 第28-29页 |
·PAL基因保守片段的扩增 | 第28页 |
·PAL基因cDNA 3’末端的克隆 | 第28-29页 |
·ZjPAL序列分析 | 第29-33页 |
·ZjPAL聚类分析 | 第33-34页 |
·PPO基因的克隆及序列分析 | 第34-41页 |
·PPO基因的克隆 | 第34-35页 |
·PPO基因保守片段的扩增 | 第34页 |
·PPO基因3’、5’末端的克隆 | 第34-35页 |
·PPO基因cDNA全长序列的获得 | 第35页 |
·ZjPPO序列分析 | 第35-40页 |
·ZjPPO聚类分析 | 第40-41页 |
4 讨论 | 第41-44页 |
第三章 枣PAL、PPO基因的表达分析 | 第44-54页 |
摘要 | 第44页 |
1 材料 | 第44-45页 |
·试验材料 | 第44-45页 |
·主要试剂 | 第45页 |
·主要仪器 | 第45页 |
2 方法 | 第45-46页 |
·引物设计 | 第45页 |
·总RNA提取 | 第45页 |
·cDNA合成 | 第45-46页 |
·Real-time PCR | 第46页 |
·荧光定量PCR反应体系 | 第46页 |
·荧光定量PCR反应程序 | 第46页 |
3 结果与分析 | 第46-52页 |
·管家基因ZjH_3 RT-PCR扩增 | 第46-47页 |
·ZjPAL实时荧光相对定量分析 | 第47-50页 |
·ZjPPO实时荧光相对定量分析 | 第50-52页 |
4 讨论 | 第52-54页 |
全文结论 | 第54-56页 |
创新点 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-64页 |
附录 | 第64-70页 |
附录1:本论文中所用储备液及培养基的配置 | 第65-66页 |
附录2:RACE技术的原理 | 第66-67页 |
附录3:荧光定量2~(-(ΔΔCt))算法 | 第67-70页 |
攻读硕士期间发表的论文或待发表的论文 | 第70-72页 |
致谢 | 第72页 |