| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| 前言 | 第10页 |
| 1 脂肪组织与肥胖的关系 | 第10页 |
| 2 前脂肪细胞 | 第10-13页 |
| ·脂肪细胞分化相关转录因子 | 第11-12页 |
| ·过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ) | 第11-12页 |
| ·CCAAT增强子结合蛋白(C/EBPs) | 第12页 |
| ·脂肪细胞决定与分化依赖因子1/固醇调节元件结合蛋白1(ADD1/SREBP1) | 第12页 |
| ·各转录因子间的协同作用 | 第12-13页 |
| 3 脂肪代谢相关酶 | 第13-15页 |
| ·脂肪合成相关酶 | 第13-14页 |
| ·脂肪酸合成酶(FAS) | 第13-14页 |
| ·甘油-3-磷酸脱氢酶(GPDH) | 第14页 |
| ·脂肪分解相关酶 | 第14-15页 |
| ·激素敏感性脂肪酶(HSL) | 第14页 |
| ·脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL) | 第14-15页 |
| 4 茶叶概况及其功能性成分 | 第15-17页 |
| ·茶叶概况 | 第15页 |
| ·茶叶功能性成分与降脂减肥 | 第15-16页 |
| ·茶多酚 | 第15页 |
| ·咖啡碱 | 第15-16页 |
| ·茶氨酸 | 第16页 |
| ·茶叶降脂减肥的分子机制 | 第16-17页 |
| 5 课题来源及研究目的与意义 | 第17-18页 |
| ·课题来源 | 第17页 |
| ·研究目的与意义 | 第17-18页 |
| 第二章 咖啡碱和儿茶素组合对3T3-L1细胞增殖的影响 | 第18-25页 |
| 1 材料与试剂 | 第18-19页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·试剂配制 | 第18-19页 |
| 2 实验方法 | 第19-21页 |
| ·细胞培养方法 | 第19-20页 |
| ·3T3-L1细胞的常规培养 | 第19页 |
| ·3T3-L1细胞的传代 | 第19页 |
| ·3T3-L1细胞的冻存 | 第19-20页 |
| ·3T3-L1细胞的复苏 | 第20页 |
| ·3T3-L1细胞的诱导分化 | 第20页 |
| ·咖啡碱和儿茶素对3T3-L1细胞毒性的影响 | 第20页 |
| ·咖啡碱和儿茶素组合对3T3-L1细胞增殖的影响 | 第20-21页 |
| ·统计分析 | 第21页 |
| 3 结果 | 第21-23页 |
| ·3T3-L1细胞分化后形态变化 | 第21-22页 |
| ·咖啡碱和儿茶素对3T3-L1细胞毒性的影响 | 第22页 |
| ·咖啡碱和儿茶素组合对3T3-L1细胞增殖的影响 | 第22-23页 |
| 4 讨论 | 第23-24页 |
| 5 小结 | 第24-25页 |
| 第三章 咖啡碱和儿茶素组合对3T3-L1细胞脂肪合成与分解的影响 | 第25-31页 |
| 1 材料与试剂 | 第25页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·试剂配制 | 第25页 |
| 2 实验方法 | 第25-26页 |
| ·咖啡碱和儿茶素组合对3T3-L1细胞分化后脂肪沉积的影响 | 第25-26页 |
| ·咖啡碱和儿茶素组合对3T3-L1脂肪细胞脂肪分解的影响 | 第26页 |
| ·统计分析 | 第26页 |
| 3 结果 | 第26-29页 |
| ·油红O染色结果 | 第26-28页 |
| ·脂肪细胞内甘油三酯酶法测定结果 | 第28-29页 |
| ·咖啡碱和儿茶素组合对3T3-L1细胞分化12天后脂肪分解的影响 | 第29页 |
| 4 讨论 | 第29-30页 |
| 5 小结 | 第30-31页 |
| 第四章 咖啡碱和儿茶素组合对3T3-L1细胞分化过程中相关转录因子及FAS mRNA表达的影响 | 第31-41页 |
| 1 材料与试剂 | 第31-32页 |
| ·实验材料 | 第31-32页 |
| ·试剂配制 | 第32页 |
| 2 实验方法 | 第32-35页 |
| ·TransZol试剂提取3T3-L1细胞总RNA及其完整性检测 | 第32-33页 |
| ·RT-PCR法检测目的基因表达水平 | 第33-34页 |
| ·RNA的逆转录 | 第33页 |
| ·PCR引物设计 | 第33页 |
| ·退火温度的优化 | 第33-34页 |
| ·循环次数的优化 | 第34页 |
| ·各基因扩增后电泳 | 第34页 |
| ·统计分析 | 第34-35页 |
| 3 结果 | 第35-40页 |
| ·3T3-L1细胞中总RNA提取纯度及完整性 | 第35页 |
| ·退火温度的优化 | 第35页 |
| ·循环次数的优化 | 第35-36页 |
| ·咖啡碱和儿茶素组合对3T3-L1细胞分化相关转录因子mRNA表达的影响 | 第36-40页 |
| 4 讨论 | 第40页 |
| 5 小结 | 第40-41页 |
| 第五章 咖啡碱和儿茶素组合对3T3-L1细胞脂肪代谢相关酶FAS和HSL蛋白表达的影响 | 第41-48页 |
| 1 材料与试剂 | 第41-42页 |
| ·实验材料 | 第41-42页 |
| ·试剂配制 | 第42页 |
| 2 实验方法 | 第42-45页 |
| ·3T3-L1细胞目的蛋白的提取 | 第42-43页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第43页 |
| ·蛋白质的变性 | 第43页 |
| ·蛋白电泳 | 第43-44页 |
| ·转膜 | 第44页 |
| ·丽春红染色 | 第44页 |
| ·免疫检测 | 第44-45页 |
| ·统计分析 | 第45页 |
| 3 结果 | 第45-47页 |
| ·咖啡碱和儿茶素组合对3T3-L1细胞分化过程中FAS蛋白表达的影响 | 第45-46页 |
| ·咖啡碱和儿茶素组合对3T3-L1脂肪细胞HSL蛋白表达的影响 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47页 |
| 5 小结 | 第47-48页 |
| 结论 | 第48-50页 |
| 1 实验研究的初步成果 | 第48页 |
| 2 实验研究中存在的问题及展望 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
