| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-26页 |
| 1 原生殖细胞简介 | 第11-19页 |
| ·原生殖细胞的鉴定 | 第11页 |
| ·原生殖细胞的分化和迁移 | 第11-15页 |
| ·原生殖细胞分化的两种机制:先成论和后成论 | 第11-13页 |
| ·原生殖细胞分化机制的起源 | 第13-15页 |
| ·原生殖细胞的迁移特性 | 第15页 |
| ·原生殖细胞发生相关基因 | 第15-19页 |
| ·Vasa基因研究进展 | 第15-18页 |
| ·Nanos基因的研究进展 | 第18-19页 |
| 2 文昌鱼相关研究 | 第19-25页 |
| ·文昌鱼的进化地位 | 第19-21页 |
| ·文昌鱼基础生物学特性 | 第21-22页 |
| ·文昌鱼的胚胎发育和生活周期 | 第22-23页 |
| ·文昌鱼原生殖细胞相关研究 | 第23-25页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 第二章 Vasa基因的克隆及时空表达图谱研究 | 第26-51页 |
| 1 材料与方法 | 第26-39页 |
| ·文昌鱼材料的获取 | 第26页 |
| ·文昌鱼Vasa基因的克隆及进化分析 | 第26-33页 |
| ·总RNA的提取和纯化 | 第26-27页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第27-28页 |
| ·目的片段的PCR扩增与克隆测序 | 第28-30页 |
| ·RACE-PCR技术扩增文昌鱼Vasa基因的cDNA序列 | 第30-32页 |
| ·目的基因的生物信息分析 | 第32-33页 |
| ·利用Taqman探针检测Vasa基因在文昌鱼发育各个时期表达的研究 | 第33-34页 |
| ·Taqman探针的实验原理 | 第33页 |
| ·主要实验仪器和试剂 | 第33页 |
| ·引物设计 | 第33页 |
| ·实时PCR实验步骤 | 第33-34页 |
| ·Real-time PCR的数据处理 | 第34页 |
| ·采用整体原位杂交技术检测文昌鱼Vasa基因的表达 | 第34-39页 |
| ·DIG标记RNA探针合成 | 第34-35页 |
| ·整体原位杂交及石蜡切片 | 第35-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-48页 |
| ·总RNA的提取 | 第39页 |
| ·白氏文昌鱼Vasa基因的克隆及序列分析 | 第39-41页 |
| ·文昌鱼Vasa蛋白的多序列比对及进化分析 | 第41-44页 |
| ·实时定量PCR检测Vasa基因在文昌鱼发育各个时期的表达 | 第44页 |
| ·文昌鱼Vasa DIG标记RNA探针胚胎原位杂交 | 第44-48页 |
| 3 结论与讨论 | 第48-51页 |
| 第三章 文昌鱼Nanos基因的克隆及时空表达图谱研究 | 第51-56页 |
| 1 材料与方法 | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-55页 |
| ·Nanos基因的克隆及其进化分析 | 第51-53页 |
| ·文昌鱼Nanos基因在胚胎不同发育阶段的时间表达谱研究 | 第53页 |
| ·文昌鱼Nanos基因的时空表达谱研究 | 第53-55页 |
| 3 结果与讨论 | 第55-56页 |
| 第四章 总结和展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 硕士期间论文发表情况 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
