| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-15页 |
| 目录 | 第15-18页 |
| 表序 | 第18-19页 |
| 图序 | 第19-21页 |
| 符号说明 | 第21-23页 |
| 第1章 文献综述 | 第23-39页 |
| ·肝脏的天然免疫优势状态 | 第23-26页 |
| ·肝脏的解剖学与免疫学状态 | 第23-24页 |
| ·肝脏的免疫组成 | 第24-26页 |
| ·天然免疫受体NKG2D及其功能综述 | 第26-33页 |
| ·NKG2D的基本生物学功能 | 第26-28页 |
| ·NKG2D配体的多样性及其在疾病中的作用 | 第28-33页 |
| ·RNA干扰载体现状和发展 | 第33-39页 |
| ·RNA干扰技术简介 | 第33-35页 |
| ·RNA干扰体内应用及前景 | 第35-37页 |
| ·基于RNA干扰的治疗策略 | 第37-39页 |
| 第2章 前言 | 第39-41页 |
| 第3章 材料和方法 | 第41-65页 |
| ·实验材料 | 第41-44页 |
| ·实验动物 | 第41页 |
| ·实验试剂 | 第41-44页 |
| ·实验仪器 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-65页 |
| ·单个shRNA表达载体的构建 | 第45-48页 |
| ·多靶点shRNA表达载体的构建 | 第48-53页 |
| ·包含多鞍点ShRNA干扰序列的腺病毒载体质粒构建 | 第53-56页 |
| ·小鼠急性肝损伤模型的建立 | 第56页 |
| ·小鼠细胞分离 | 第56-58页 |
| ·人细胞分离与纯化 | 第58-59页 |
| ·细胞复苏、培养和冻存 | 第59页 |
| ·病理学分析(H-E染色) | 第59-60页 |
| ·流式细胞术分析 | 第60-61页 |
| ·血清转氨酶ALT/AST检测(赖式法) | 第61页 |
| ·RT-PCR及荧光定量PCR分析 | 第61-63页 |
| ·抗体阻断 | 第63页 |
| ·~(51)Cr释放法检测NK细胞的杀伤活性 | 第63-64页 |
| ·NK细胞脱颗粒检测 | 第64页 |
| ·ELISA检测IFN-γ,TNF-α | 第64页 |
| ·数据统计和分析 | 第64-65页 |
| 第4章 结果与讨论 | 第65-94页 |
| ·NKG2D配体RNA干扰载体的构建 | 第65-66页 |
| ·NKG2D配体RNA干扰目的序列的筛选 | 第65页 |
| ·NKG2D配体RNA干扰载体的构建 | 第65-66页 |
| ·NKG2D配体多靶点RNA干扰载体及对照载体的构建 | 第66-70页 |
| ·NKG2D配体多靶点RNA干扰载体功能验证 | 第70-73页 |
| ·polyⅠ：C联合D-GalN注射诱导小鼠肝实质细胞表面NKG2D配体表达上调 | 第70-71页 |
| ·NKG2D配体多靶点RNA干扰载体沉默小鼠肝实质细胞表面NKG2D配体表达 | 第71-73页 |
| ·NKG2D多配体RNA干扰保护NK细胞介导的急性肝脏损伤 | 第73-82页 |
| ·NKG2D多配体RNA干扰载体预先处理保护小鼠免受polyⅠ：C/D-GalN联合注射诱导的急性肝损伤 | 第73-78页 |
| ·NKG2D多配体RNA干扰保护NK细胞介导的急性肝脏损伤依赖于NKG2D介导的NK细胞活化 | 第78-81页 |
| ·NKG2D多配体RNA干扰载体预先处理保护HBsAg-Tg小鼠免受ConA注射诱导的急性肝损伤 | 第81-82页 |
| ·NKG2D多配体RNA干扰重组腺病毒的构建及应用 | 第82-88页 |
| ·NKG2D多配体RNA干扰重组腺病毒的构建及包装 | 第82-85页 |
| ·NKG2D多配体RNA干扰重组腺病毒的扩增、纯化及滴度测定 | 第85-86页 |
| ·NKG2D多配体RNA干扰重组腺病毒保护小鼠免受polyⅠ：C/D-GalN联合注射诱导的急性肝损伤 | 第86-88页 |
| ·人NKG2D多配体RNA干扰保护正常肝细胞系L-02细胞免受人NK细胞杀伤 | 第88-91页 |
| ·讨论与总结 | 第91-94页 |
| 参考文献 | 第94-105页 |
| 致谢 | 第105-107页 |
| 攻读博士学位期间的主要研究成果 | 第107-108页 |
| 一、发表论文情况及专利成果 | 第107页 |
| 二、参加的学术会议 | 第107-108页 |
| 附件 | 第108页 |
