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农杆菌介导龙胆花色素苷5-O-葡糖基转移酶基因的番茄遗传转化体系的建立及优化

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
引言第11-12页
第一章 文献综述第12-21页
   ·番茄基因工程研究进展第12-15页
     ·抗虫转基因方面第12-13页
     ·抗病转基因方面第13-14页
     ·抗逆转基因方面第14页
     ·改良品质方面第14-15页
     ·作为生物反应器方面第15页
   ·番茄遗传转化技术第15-18页
     ·番茄遗传转化方法第15-16页
     ·农杆菌介导的遗传转化机理第16-17页
     ·影响农杆菌介导番茄遗传转化的因素第17-18页
   ·UDP-葡萄糖:花色素苷 5-O-葡糖基转移酶(5GT)第18-21页
     ·植物糖基转移酶(GTs)第18-19页
     ·龙胆 UDP-葡萄糖:花色素苷 5-O-葡糖基转移酶(Gt5GT7)第19-21页
第二章 材料与方法第21-38页
   ·材料第21-27页
     ·菌种和质粒第21-22页
     ·植物材料第22-23页
     ·PCR 扩增引物序列第23-24页
     ·工具酶和生化试剂第24页
     ·DNA Marker第24页
     ·主要仪器设备第24-25页
     ·培养基配方第25-27页
   ·方法第27-38页
     ·表达载体 pCAMBIA1304- Gt5GT7 的构建及重组农杆菌第27-34页
     ·番茄遗传转化体系的建立及优化第34-38页
第三章 结果与分析第38-49页
   ·表达载体 pCAMBIA1304-Gt5GT7 的构建及重组农杆菌第38-40页
     ·质粒 pcr4topo-Gt5GT7 的 PCR 扩增第38页
     ·质粒 pCAMBIA1304 与目的基因 Gt5GT7 的双酶切第38页
     ·表达载体 pCAMBIA1304-Gt5GT7 的鉴定第38-39页
     ·表达载体 pCAMBIA1304- Gt5GT7 重组农杆菌菌株 A4第39-40页
   ·番茄遗传转化体系的建立及优化第40-47页
     ·Cl2灭菌时间对番茄种子发芽的影响第40页
     ·不同预培养时间对番茄转化效率的影响第40-41页
     ·农杆菌菌液浸泡外植体的时间对转化效率的影响第41-42页
     ·农杆菌菌液浓度对外植体转化效率的影响第42页
     ·共培养条件对番茄外植体转化效率的影响第42-43页
     ·激素配比对不同基因型番茄愈伤组织诱导的影响第43页
     ·激素配比对不同基因型番茄不定芽诱导的影响第43-45页
     ·激素配比对不同基因型番茄生根的影响第45-46页
     ·农杆菌介导的遗传转化体系的优化第46-47页
   ·转基因植株的检测第47-49页
     ·再生转化植株的 PCR 检测第47页
     ·转基因番茄(贼不偷)果实的性状分析第47-49页
第四章 讨论第49-53页
   ·植物表达载体的构建第49页
   ·农杆菌的鉴定第49页
   ·无菌苗的获得第49-50页
   ·番茄遗传转化体系的优化第50-51页
     ·基因型对番茄遗传转化的影响第50页
     ·不同侵染条件对番茄遗传转化的影响第50页
     ·激素对番茄遗传转化的影响第50-51页
   ·GUS 组织化学分析法的改进第51-52页
   ·PCR 分子检测第52页
   ·转基因番茄果实的性状分析第52-53页
结论第53-54页
参考文献第54-59页
附录第59-63页
攻读硕士学位期间发表的主要科研成果第63-64页
后记第64页

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