| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一部分：肿瘤细胞自噬与肿瘤细胞抗药性机理的初步研究 | 第14-52页 |
| 一.前言 | 第14-16页 |
| 二.材料与方法 | 第16-32页 |
| 1. 实验材料 | 第16-24页 |
| ·癌组织标本 | 第16页 |
| ·细胞 | 第16页 |
| ·实验试剂及耗材 | 第16-17页 |
| ·主要仪器设备 | 第17-18页 |
| ·主要溶液及试剂配方 | 第18-24页 |
| ·Western blotting所用试剂的配制及储存 | 第18-23页 |
| ·细胞培养所用试剂的配制及储存 | 第23-24页 |
| ·细胞存活率检测试剂配方 | 第24页 |
| ·吖啶橙染色所用试剂配制 | 第24页 |
| 2. 实验方法 | 第24-32页 |
| ·几种人类癌组织和非癌组织中HSP70,HSP90和LC3的表达情况及其比较 | 第24-26页 |
| ·组织中蛋白质的提取 | 第24-25页 |
| ·SDS-PAGE | 第25页 |
| ·电转移 | 第25-26页 |
| ·抗体反应 | 第26页 |
| ·显色反应 | 第26页 |
| ·结果分析 | 第26页 |
| ·喉癌和下咽癌组织原代细胞的分离和培养 | 第26-27页 |
| ·A549肺癌细胞的复苏以及培养 | 第27-28页 |
| ·缺氧和缺营养对A549肺癌细胞自噬的影响 | 第28页 |
| ·5-氟尿嘧啶对A549细胞自噬、存活率的影响 | 第28-30页 |
| ·5-氟尿嘧啶最适作用浓度的选择 | 第28页 |
| ·5-氟尿嘧啶最适作用时间的确定 | 第28-29页 |
| ·MTT法测细胞存活率 | 第29页 |
| ·AO染色观察细胞形态以及细胞质内酸性膜泡的变化 | 第29页 |
| ·Western blotting检测HSP90、HSP70、LC3的表达水平 | 第29-30页 |
| ·5-氟尿嘧啶处理A549细胞前后,自噬泡形成的电镜观察 | 第30页 |
| ·3-MA对5-氟尿嘧啶抗肿瘤的协同作用 | 第30-31页 |
| ·统计学分析 | 第31-32页 |
| 三.实验结果 | 第32-48页 |
| ·Western blotting检测喉癌组织中HSP70,HSP90和LC3的表达情况 | 第32-33页 |
| ·Western blotting检测下咽癌组织中HSP70,HSP90和LC3的表达情况 | 第33-35页 |
| ·Western blotting检测乳腺癌组织中HSP70,HSP90和LC3的表达情况 | 第35-37页 |
| ·喉癌组织和下咽癌组织原代细胞培养 | 第37-38页 |
| ·缺氧和缺营养对A549肺癌细胞自噬的影响 | 第38-40页 |
| ·5-氟尿嘧啶对A549细胞自噬的影响 | 第40-48页 |
| ·不同浓度的5-氟尿嘧啶处理A549细胞,对A549细胞形态的影响 | 第40页 |
| ·低浓度的5-氟尿嘧啶处理A549细胞不同时间后,对细胞形态的影响 | 第40-41页 |
| ·低浓度的5-氟尿嘧啶处理A549细胞不同时间后,对细胞自噬的影响 | 第41-42页 |
| ·低浓度5-氟尿嘧啶和3-MA处理A549细胞,对A549细胞存活率的影响 | 第42-43页 |
| ·低浓度5-氟尿嘧啶和3-MA处理A549细胞对细胞自噬的影响 | 第43-44页 |
| ·低浓度5-氟尿嘧啶与3-MA协同作用对A549细胞存活率影响的时间效应 | 第44-45页 |
| ·低浓度5-氟尿嘧啶对A549细胞内自噬相关蛋白表达的影响 | 第45-46页 |
| ·低浓度5-氟尿嘧啶诱导A549细胞内自噬泡产生的电镜观察 | 第46-48页 |
| 四.讨论 | 第48-52页 |
| 第二部分 综述 | 第52-71页 |
| 一.细胞死亡 | 第52-53页 |
| ·凋亡细胞的特点 | 第52页 |
| ·坏死细胞的特点 | 第52-53页 |
| 二.细胞自噬的研究进展 | 第53-59页 |
| ·细胞自噬的类型 | 第54页 |
| ·细胞简单自噬的过程 | 第54-57页 |
| ·自噬是一种自救生存途径 | 第57-58页 |
| ·自噬作为细胞死亡的一种途径 | 第58-59页 |
| 三.自噬与肿瘤发生的关系 | 第59-61页 |
| ·自噬位于肿瘤代谢压力区域 | 第59页 |
| ·自噬促进肿瘤细胞度过代谢压力生存 | 第59-60页 |
| ·在很多肿瘤中自噬是被抑制的 | 第60-61页 |
| 四.自噬与细胞死亡之间的关系 | 第61-62页 |
| ·自噬限制细胞死亡和炎症发生 | 第61页 |
| ·自噬限制基因组损害 | 第61-62页 |
| ·自噬性细胞死亡的作用 | 第62页 |
| 五.自噬的检测与评价 | 第62-63页 |
| 六.自噬与疾病治疗 | 第63-66页 |
| ·癌症是一种蛋白质病 | 第63页 |
| ·自噬与肿瘤治疗 | 第63-64页 |
| ·自噬的双刃剑和癌症：减轻损伤与促进生存 | 第64-65页 |
| ·以自噬途径为靶向治疗癌症的策略 | 第65-66页 |
| ·自噬抑制剂阻止代谢应激与存活率 | 第65页 |
| ·自噬抑制剂结合代谢压力诱导剂 | 第65页 |
| ·凋亡,休眠和再生的抑制 | 第65-66页 |
| 七.热休克蛋白 | 第66-70页 |
| ·HSP90的结构 | 第66-67页 |
| ·HSP90与肿瘤的关系 | 第67页 |
| ·HSP70的分子伴侣功能 | 第67-68页 |
| ·HSP70与癌症 | 第68页 |
| ·分子伴侣介导的自噬(CMA) | 第68-70页 |
| ·CMA选择性下的标签和分子伴侣 | 第68-69页 |
| ·分子伴侣介导的自噬与老龄化的关系 | 第69-70页 |
| ·分子伴侣介导的自噬与疾病 | 第70页 |
| 八.总结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第83页 |
