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猪乳铁蛋白及其肽在巴斯德毕赤酵母中组成型表达及生物学功能的初步研究

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-22页
   ·乳铁蛋白及乳铁蛋白肽的分子结构第12-13页
   ·乳铁蛋白与乳铁蛋白肽的生物学功能第13-16页
     ·抗菌及抗病毒功能和机理第13-14页
     ·免疫调节作用第14-15页
     ·抗氧化作用和抗肿瘤活性第15-16页
   ·乳铁蛋白及乳铁蛋白肽的真核表达系统研究进展第16-17页
     ·真菌表达系统第16页
     ·植物表达系统第16-17页
     ·动物表达系统第17页
   ·巴斯德毕赤酵母表达系统研究进展第17-21页
     ·毕赤酵母表达系统的优点第17-18页
     ·巴斯德毕赤酵母表达系统的组成第18-20页
     ·巴斯德毕赤酵母作为外源基因表达载体的应用第20-21页
   ·研究目的与意义第21-22页
2 材料与方法第22-34页
   ·材料第22-23页
     ·菌种与质粒第22页
     ·实验动物第22页
     ·试剂盒及抗体制剂第22页
     ·引物第22页
     ·实验试剂第22-23页
     ·主要溶液配制第23页
   ·试验方法第23-34页
     ·猪乳铁蛋白肽LFcinP基因的设计合成和pLF-319的扩增第23-25页
     ·pLF-319基因与T载体连接第25-27页
     ·表达载体pGAPHαM-LFcinP和pGAPHαM-pLF-319的构建第27-30页
     ·表达LFcinP和pLF-319重组巴斯德毕赤酵母的构建第30-31页
     ·重组巴斯德毕赤酵母的蛋白表达及鉴定第31-32页
     ·体外抑菌活性检测第32页
     ·口服重组巴斯德毕赤酵母上清后小鼠生理指标的测定第32-34页
3 结果第34-46页
   ·重组质粒pUC57-LFcinP和pMD18-T pLF-319的鉴定结果第34页
   ·重组质粒pGAPHαM-xyn2的鉴定第34-35页
   ·重组质粒pGAPHαM-LFcinP和pGAPHαM-pLF-319的鉴定第35-36页
   ·pGAPHαM-LFcinP/GS115和pGAPHαM-pLF-319/GS115重组菌株的鉴定第36-38页
   ·pGAPHαM-LFcinP/GS115和pGAPHαM-pLF-319/GS115重组菌株表达蛋白的鉴定第38-40页
     ·表达产物SDS-PAGE鉴定第38-39页
     ·表达产物的Western blot鉴定第39-40页
   ·重组猪乳铁蛋白及其肽的体外与体内试验结果第40-46页
     ·时间动态曲线法测量抑菌活性第40-42页
     ·断乳小鼠口服重组菌上清后生长指标的测定结果第42-44页
     ·重组猪乳铁蛋白pLF-319及LFcinP肽对断乳小鼠血清生化指标的影响结果第44-46页
4 讨论第46-49页
   ·本实验的主要研究内容及潜在价值第46页
   ·猪乳铁蛋白及其肽的相关生物学功能第46-47页
   ·基因设计与载体选择第47-49页
5 结论第49-50页
致谢第50-51页
参考文献第51-55页
附录第55-59页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第59页

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