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仔猪断奶腹泻性大肠杆菌的多重耐药性、毒力因子分布及特异性蛋黄抗体药效的研究

目录第1-10页
摘要第10-13页
Abstract第13-17页
前言第17-20页
第一部分 文献综述第20-63页
 第一章 仔猪断奶腹泻及其防治策略研究进展第21-30页
  1、概述第21页
  2、PWD发生原因第21-22页
  3、PWD的防治策略第22-27页
   ·调节蛋白质水平及组成第23页
   ·添加纤维素、酶制剂、酸化剂第23页
   ·添加和应用抗菌药物等第23页
   ·使用微生态制剂等第23-24页
   ·减少应激、补饲并实行阶段饲喂第24-25页
   ·补充电解质和水分第25页
   ·主动免疫第25页
   ·被动免疫第25-26页
   ·噬菌体疗法第26页
   ·竞争抑制和抗性选育第26-27页
   ·其他第27页
  4、展望第27页
  参考文献第27-30页
 第二章 大肠杆菌多重耐药性与整合子研究第30-54页
  1、大肠杆菌耐药性第30-40页
   ·概述第30-32页
   ·耐药现状第32-34页
   ·监测与分析方法第34-35页
   ·耐药机制第35-38页
   ·细菌耐药性的控制措施第38-39页
   ·小结及展望第39-40页
  2、整合子及其与耐药性的关系第40-50页
   ·整合子的概念和功能第41页
   ·整合子的结构与分类第41-43页
   ·整合子与耐药基因水平转移:耐药性的演化第43-44页
   ·整合子是自然克隆和表达的载体第44-45页
   ·整合子的移动性第45-48页
   ·大肠杆菌中的整合子流行病学第48-49页
   ·整合子与耐药性的发展趋势及展望第49-50页
  参考文献第50-54页
 第三章 仔猪断奶腹泻大肠杆菌毒力因子研究进展第54-63页
  1、大肠杆菌是PWD主要病原第54-55页
  2、PWD致病机制第55-57页
  3、PWD大肠杆菌毒力因子及其检测第57-60页
  4、结论和展望第60页
  参考文献第60-63页
第二部分 实验研究第63-150页
 第一章 仔猪断奶腹泻病原性大肠杆菌的分离鉴定第64-72页
  1、材料和方法第64-67页
   ·材料第64-65页
   ·方法第65-67页
  2、结果与分析第67-70页
   ·细菌的分离第67页
   ·吲哚、M.R和V-P试验第67-68页
   ·三糖铁琼脂斜面生长表现第68页
   ·动物致病性试验第68页
   ·PCR检测第68-69页
   ·O抗原型鉴定第69-70页
  3、讨论第70-71页
  参考文献第71-72页
 第二章 规模化猪场PWD病原大肠杆菌的耐药表型分析第72-104页
  1、材料和方法第73-74页
   ·受检菌株第73页
   ·药敏纸片第73-74页
   ·培养基及仪器第74页
   ·试验方法第74页
  2、结果与分析第74-96页
   ·β-内酰胺类抗生素的体外抗菌活性第74-76页
   ·大环内酷类抗生素的的体外抗菌活性第76-77页
   ·喹诺酮类抗菌药的体外抗菌活性第77-79页
   ·多肽类抗生素的体外抗菌活性第79-80页
   ·氨基糖甙类抗生素的体外抗菌活性第80-83页
   ·磺胺类药物的的体外抗菌活性第83-84页
   ·氯霉素类抗生素的体外抗菌活性第84-86页
   ·四环素类抗生素的体外抗菌活性第86页
   ·链霉素与各类药物的交叉耐药分析第86-95页
   ·PWD病原性大肠杆菌对13种抗菌药物的耐药谱分析第95-96页
  3、讨论第96-101页
   ·耐药检测方法及分析软件第96-97页
   ·病原性大肠杆菌药敏试验及耐药谱第97-98页
   ·不同猪场病原性大肠杆菌耐药性的差异第98-99页
   ·抗菌药物联合应用第99页
   ·耐药监测及多重耐药研究第99-101页
  参考文献第101-104页
 第三章 PWD病原性大肠杆菌整合子-耐药基因盒研究第104-115页
  1、材料第105页
   ·菌株及培养基第105页
   ·仪器第105页
   ·试剂第105页
  2、方法第105-107页
   ·细菌总DNA提取第105-106页
   ·引物设计与合成第106页
   ·PCR扩增第106页
   ·PCR产物电泳分析第106-107页
   ·PCR产物纯化回收第107页
   ·基因盒插入区PCR产物的测序及分析第107页
  3、结果与分析第107-110页
   ·整合酶PCR检测第107-108页
   ·Ⅰ型及Ⅱ型整合子耐药基因盒PCR检测第108-110页
  4、讨论第110-113页
  参考文献第113-115页
 第四章 集约化猪场PWD病原性大肠杆菌毒力因子分析第115-126页
  1、材料和方法第116-119页
   ·材料第116页
   ·方法第116-119页
  2、结果和分析第119-121页
   ·溶血素和PWD病原性大肠杆菌的主要粘附素鉴定第119页
   ·PWD病原性大肠杆菌的主要粘附素亚型第119-120页
   ·毒素基因多重PCR检测第120-121页
  3、讨论第121-124页
   ·溶血特性第121页
   ·PWD主要粘附素第121-123页
   ·PWD病原性大肠杆菌肠毒素第123页
   ·PWD病原性大肠杆菌分离株黏附素与毒素之间的关系第123-124页
  参考文献第124-126页
 第五章 仔猪断奶腹泻模型的建立、抗大肠杆菌F4特异性蛋黄抗体的研制和药效评价第126-150页
  1、材料与方法第127-132页
   ·材料第127-128页
   ·方法第128-132页
  2、结果和分析第132-142页
   ·分离株菌毛型的PCR及SDS-PAGE鉴定第132-133页
   ·临床观察第133页
   ·间接ELISA检测免疫后F4菌毛抗体第133-134页
   ·特异性蛋黄抗体制备及其LD_(50)测定第134-135页
   ·F4菌毛特异性IgY对F4+ETEC体外最低抑菌浓度测定第135页
   ·PWD感染模型的建立第135-138页
   ·特异性IgY对实验性大肠杆菌性PWD的药效评价第138-142页
  3、讨论第142-148页
  参考文献第148-150页
结论与展望第150-151页
附录A 常用缓冲液及培养基配方第151-154页
附图B: class 1 integron aadA1 gene第154-156页
附图C: class 1 integron carrying aadA1 and dfrA1 genes第156-159页
附图D: class 1 integron dihydrofolate reductase type第159-162页
附图E: streptomycin 3’’-adenylyltransferase(aadA2)第162-166页
致谢第166-167页
攻读博士期间发表的学术论文第167-168页
投稿和撰稿中的学术论文第168页

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