| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-21页 |
| ·嗜碱菌及其分布 | 第10-11页 |
| ·嗜碱菌的研究进展 | 第11-12页 |
| ·嗜碱菌的嗜碱机制 | 第12-14页 |
| ·嗜碱菌的工业应用 | 第14-16页 |
| ·纤维素的降解 | 第14页 |
| ·洗涤剂工业 | 第14-15页 |
| ·造纸工业 | 第15页 |
| ·其他方面 | 第15-16页 |
| ·mrp操纵子的生物信息学分析 | 第16-18页 |
| ·mrp操纵子概述 | 第16-17页 |
| ·mrp操纵子的基因排列组合 | 第17-18页 |
| ·课题研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| ·课题研究方案 | 第19-21页 |
| 第2章 材料和方法 | 第21-31页 |
| ·材料 | 第21-24页 |
| ·试验菌株 | 第21页 |
| ·质粒 | 第21-22页 |
| ·试剂 | 第22-23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·仪器 | 第23-24页 |
| ·试验方法 | 第24-31页 |
| ·枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis基因组DNA的提取 | 第24页 |
| ·目的片段基因的PCR扩增 | 第24-25页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第25-26页 |
| ·PCR产物和表达载体的双酶切 | 第26页 |
| ·PCR酶切反应产物的纯化 | 第26-27页 |
| ·连接反应 | 第27页 |
| ·目的基因的转化 | 第27-28页 |
| ·阳性重组质粒的鉴定及阳性克隆菌种的保存 | 第28-30页 |
| ·重组质粒的测序分析 | 第30页 |
| ·MRP蛋白在大肠杆菌BL21中的诱导表达 | 第30页 |
| ·细胞膜的分离与提取 | 第30页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第30-31页 |
| 第3章 pTTQ18表达载体构建及Mrp融合蛋白的表达 | 第31-56页 |
| ·pTTQ18表达载体的构建 | 第31-44页 |
| ·pTTQ18-mrpABC的构建 | 第31-35页 |
| ·pTTQ18-mrpAB的构建 | 第35-38页 |
| ·pTTQ18-mrpA的构建 | 第38-41页 |
| ·pTTQ18-mrpD的构建 | 第41-44页 |
| ·校正后pTTQ18表达载体的构建 | 第44-51页 |
| ·校正后pTTQ18-mrpA的构建 | 第44-45页 |
| ·校正后pTTQ18-mrpABC的构建 | 第45-48页 |
| ·校正后pTTQ18-mrpAB的构建 | 第48-51页 |
| ·Mrp融合蛋白的表达 | 第51-55页 |
| ·MrpABC、MrpAB、MrpA融合蛋白的表达研究 | 第51-52页 |
| ·MrpD、校正后的MrpABC、MrpAB、MrpA融合蛋白的表达研究 | 第52-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 第4章 大肠杆菌酸性磷酸酶(EcAP)作为膜蛋白表达伴侣的初步研究 | 第56-63页 |
| ·pTTQ18表达载体的构建 | 第56-57页 |
| ·EcAP基因的克隆和测序 | 第57页 |
| ·EcAP融合膜蛋白的构建 | 第57-60页 |
| ·mrpD和nupC基因的扩增 | 第57-58页 |
| ·pTTQ18[ECAP]载体和mrpD和nupC片段的酶切 | 第58页 |
| ·pTTQ18[EcAP-MrpD]和pTTQ18[EcAP-NupC]筛选结果 | 第58-59页 |
| ·pTTQ18[EcAP-MrpD]和pTTQ18[EcAP-NupC]酶切验证 | 第59-60页 |
| ·EcAP融合膜蛋白的诱导表达 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-63页 |
| 第5章 MBP(maltose-binding protein)蛋白作为膜蛋白表达伴侣的初步研究 | 第63-72页 |
| ·pMAL-p4X[MBP-MrpD]和pMAL-p4X[MBP-NupC]的构建 | 第63-68页 |
| ·mrpD和nupC片段的扩增 | 第63-65页 |
| ·pMAL-p4x载体和mrpD和nupC片段的双酶切 | 第65页 |
| ·pMAL-p4X[MBP-MrpD]和pMAL-p4X[MBP-NupC]筛选结果 | 第65-67页 |
| ·pMAL-p4X[MBP-MrpD]和pMAL-p4X[MBP-NupC]酶切验证 | 第67-68页 |
| ·MBP融合膜蛋白的诱导表达 | 第68-70页 |
| ·小结 | 第70-72页 |
| 第6章 结论 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-78页 |
| 攻读学位期间获得与学位论文相关的科研成果目录 | 第78页 |
