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羧胺三唑对角质形成细胞增殖与分化的影响及其作用机制的初步研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-16页
英文缩略词表第16-19页
前言第19-23页
实验材料第23-31页
 1 细胞系第23页
 2 实验动物第23页
 3 药品与试剂第23-26页
   ·主要药品第23页
   ·细胞培养相关第23-24页
   ·细胞增殖相关第24页
   ·细胞周期与凋亡检测相关第24页
   ·RT-PCR相关第24页
   ·Western Blot相关第24-25页
   ·动物实验相关第25-26页
 4 主要仪器第26-27页
 5 常用溶液的配制第27-31页
   ·细胞培养用液第27页
   ·细胞实验用液第27-28页
   ·RT-PCR实验用液第28-29页
   ·Western Blot实验用液第29-30页
   ·动物实验用液第30-31页
实验方法第31-51页
 1 细胞的复苏、培养、传代及冻存第31-33页
   ·细胞的复苏第31页
   ·细胞的培养与传代第31-32页
   ·细胞的冻存第32-33页
 2 细胞增殖实验第33-36页
   ·CAI对HaCaT细胞的增殖影响第33-34页
     ·台盼蓝染色细胞计数法第33页
     ·细胞计数试剂盒(CCK-8法)第33-34页
   ·CAI对HaCaT、ESF两种细胞增殖影响的比较(CCK-8法)第34-35页
   ·巨噬细胞对CAI的抗HaCaT细胞增殖效应的影响(CCK-8法)第35-36页
     ·RAW264.7细胞经CAI/LPS诱导过后再与HaCaT细胞共培养时,对后者增殖的影响第35-36页
     ·CAI/LPS直接作用于RAW264.7细胞与HaCaT细胞的共培养体系时对HaCaT细胞增殖的影响第36页
 3 细胞凋亡检测实验第36-38页
   ·碘化丙啶染色流式细胞术第36-37页
   ·磷脂酰丝氨酸外翻分析法(早期凋亡检测)第37-38页
 4 细胞周期分布测定实验(碘化丙啶染色流式细胞术)第38-39页
 5 细胞分化检测实验:CAI对HaCaT细胞分化相关的分子标志表达的影响第39-46页
   ·RT-PCR法第39-43页
   ·Western Blot法第43-46页
 6 动物模型实验第46-50页
   ·鼠尾鳞片表皮模型的药效学评价第46-47页
   ·其他第47-50页
     ·鼠尾鳞片表皮模型中小鼠一般状况的观察第47页
     ·自制CAI软膏的皮肤刺激试验第47-50页
       ·制备CAI及PEG基质对照组软膏第47-48页
       ·皮肤刺激试验第48-50页
 7 统计学分析第50-51页
实验结果第51-81页
 1 细胞增殖实验第51-58页
   ·CAI对HaCaT细胞的增殖影响第51-54页
     ·台盼蓝染色细胞计数法第51-52页
     ·CCK-8法第52-54页
   ·CAI对HaCaT、ESF两种细胞的增殖影响的比较(CCK-8法)第54-55页
   ·巨噬细胞对CAI抗HaCaT细胞增殖效应的影响(CCK-8法)第55-58页
     ·RAW264.7细胞经CAI/LPS诱导过后再与HaCaT细胞共培养时,对后者增殖的影响第55-57页
     ·CAI/LPS直接作用于RAW264.7细胞与HaCaT细胞的共培养体系时对HaCaT细胞增殖的影响第57-58页
 2 CAI对HaCaT细胞的凋亡诱导作用第58-64页
   ·碘化丙啶染色流式细胞术第58-61页
   ·磷脂酰丝氨酸外翻分析法(早期凋亡检测)第61-64页
 3 CAI对HaCaT细胞周期分布的影响(碘化丙啶染色流式细胞术)第64-69页
 4 CAI对HaCaT细胞分化相关的分子标志表达的影响第69-73页
   ·RT-PCR法第69-70页
   ·Western Blot法第70-73页
 5 动物模型实验第73-81页
   ·鼠尾鳞片表皮模型的药效学评价第73-76页
   ·其他第76-81页
     ·CAI对C_(57)BL/6J小鼠体重的影响第76-78页
     ·自制CAI软膏的皮肤刺激试验第78-81页
实验讨论第81-93页
 1 细胞增殖实验第81-85页
   ·CAI对HaCaT细胞的抗增殖效应第81-82页
   ·CAI对HaCaT、ESF细胞的增殖活力影响比较——细胞选择性第82-83页
   ·巨噬细胞对CAI抗HaCaT细胞增殖效应的影响第83-85页
 2 CAI对HaCaT细胞的凋亡诱导作用第85-86页
 3 CAI对HaCaT细胞的细胞周期阻滞作用第86页
 4 CAI对HaCaT细胞分化相关的分子标志基因及蛋白表达的影响第86-90页
 5 CAI在鼠尾鳞片表皮模型中的药效学评价第90-91页
 6 CAI对小鼠体重的影响及自制CAI软膏对皮肤的刺激试验第91页
 7 有待进一步研究的问题第91-93页
实验结论第93-94页
参考文献第94-105页
综述第105-116页
 综述参考文献第111-116页
致谢第116-118页

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