摘要 | 第1-4页 |
英文摘要 | 第4-7页 |
主要缩写符号表 | 第7-8页 |
前言 | 第8-18页 |
·片形吸虫病的概述 | 第8-14页 |
·关于片形吸虫病的研究展望 | 第14-15页 |
·cDNA 文库在寄生虫研究中的应用 | 第15-16页 |
·半胱氨酸蛋白酶的研究进展 | 第16页 |
·研究的目的及意义 | 第16-18页 |
第一章 大片吸虫成虫 cDNA 文库的构建 | 第18-29页 |
·材料 | 第18-27页 |
·实验材料 | 第18页 |
·主要仪器 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18-19页 |
·主要工具酶 | 第19页 |
·主要溶液的配制 | 第19-20页 |
·实验方法 | 第20-27页 |
·结果 | 第27-29页 |
·总RNA 的提取 | 第27页 |
·双链cDNA 鉴定结果 | 第27页 |
·酶切后双链cDNA 的过柱 | 第27页 |
·PCR 鉴定文库中所插入片段的 cDNA 长度 | 第27-28页 |
·文库全长性检测 | 第28-29页 |
第二章 大片吸虫组织蛋白酶 L1 基因在大肠杆菌中的表达及重组 蛋白分析 | 第29-52页 |
·材料 | 第29-32页 |
·菌株及质粒 | 第29页 |
·血清来源 | 第29页 |
·主要试剂及酶类 | 第29-30页 |
·引物 | 第30-32页 |
·方法 | 第32-41页 |
·重组质粒的构建 | 第32-36页 |
·重组菌的诱导和纯化 | 第36-39页 |
·用自然感染大片吸虫的阳性血清进行Western-blotting 检测 | 第39-40页 |
·间接酶联免疫吸附实验(ELISA)方法的研究 | 第40-41页 |
·结果 | 第41-52页 |
·FgCL1 基因的扩增 | 第41-42页 |
·重组质粒 pMD18-CL1 和 pGEX-CL1 的双酶切鉴定 | 第42-43页 |
·信号肽预测 | 第43页 |
·序列比对 | 第43-45页 |
·重组菌pGEX-CL1/BL21 的诱导表达和纯化 | 第45-47页 |
·Western-blotting 检测 | 第47页 |
·ELISA 诊断方法的研究 | 第47-52页 |
第三章 讨论 | 第52-55页 |
·关于cDNA 文库构建 | 第52页 |
·关于组织蛋白酶L1 全长基因的克隆和表达 | 第52-54页 |
·间接ELISA 方法的敏感性和特异性 | 第54-55页 |
第四章 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
附录 | 第62-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
作者简历 | 第69页 |