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无芒隐子草(Cleistogenes songorica)种质抗旱评价、cDNA文库构建及相关基因克隆与鉴定

摘要第1-9页
Abstract第9-12页
前言第12-14页
第一章 文献综述第14-37页
   ·植物抗旱机制第14-15页
     ·躲旱型第14-15页
     ·避旱型第15页
     ·耐旱型第15页
   ·植物抗旱功能基因组研究第15-20页
     ·植物功能基因组学主要研究内容第16页
     ·植物及牧草抗旱功能基因组研究第16-20页
   ·cDNA文库的构建第20-26页
     ·cDNA文库的构建方法第20-24页
     ·cDNA文库的应用第24-25页
     ·草类作物全长cDNA克隆与测序研究进展第25-26页
   ·EST技术及应用第26-31页
     ·EST技术概述第26页
     ·EST技术的应用第26-27页
     ·生物信息学在EST研究中的应用第27-29页
     ·重要农作物及草类作物EST研究进展第29-31页
   ·基因工程改良草类种质资源第31-33页
   ·无芒隐子草研究进展第33-36页
   ·本研究技术路线第36-37页
第二章 无芒隐子草野生种群遗传多样性RAPD分析第37-51页
   ·前言第37-38页
   ·材料与方法第38-40页
     ·无芒隐子草种质资源的收集第38页
     ·DNA的提取与检测第38页
     ·PCR扩增与引物筛选第38页
     ·数据分析第38-40页
   ·结果与分析第40-49页
     ·无芒隐子草种群的DNA多态性分析第40-42页
     ·Shannon信息指数估计遗传多样性第42-43页
     ·Nei指数估计的基因多样性第43页
     ·分子变异分析(AMOVA)第43页
     ·聚类分析第43-49页
   ·讨论第49-51页
第三章 无芒隐子草幼苗干旱胁迫特性研究第51-61页
   ·前言第51页
   ·材料与方法第51-53页
     ·材料第51页
     ·干旱胁迫处理第51-52页
     ·土壤含水量、叶水势、叶片相对含水量测定第52页
     ·叶片气体交换测定第52页
     ·叶绿素荧光测定第52-53页
     ·色素含量测定第53页
   ·结果与分析第53-58页
     ·土壤含水量、叶水势、叶片相对含水量变化特征第53-55页
     ·不同水分条件下叶片气体交换变化特征第55-56页
     ·叶绿素荧光变化特征第56-57页
     ·色素含量变化第57-58页
   ·讨论第58-61页
第四章 无芒隐子草cDNA文库构建及ESTs分析第61-83页
   ·前言第61-62页
   ·材料与方法第62-71页
     ·无芒隐子草干旱胁迫试验第62-63页
     ·无芒隐子草cDNA文库的构建第63-68页
     ·表达序列标签(ESTs)分析第68-71页
   ·结果与分析第71-80页
     ·无芒隐子草干旱胁迫试验第71-72页
     ·无芒隐子草cDNA文库的构建第72-76页
     ·表达序列标签(ESTs)分析第76-80页
   ·讨论第80-83页
第五章 无芒隐子草抗旱相关基因全长cDNA克隆及表达分析第83-113页
   ·前言第83-84页
   ·材料与方法第84-92页
     ·抗旱相关基因全长cDNA克隆第84-86页
     ·无芒隐子草抗旱相关基因的鉴定第86-92页
   ·结果与分析第92-109页
     ·抗旱相关基因全长cDNA克隆第92-97页
     ·无芒隐子草抗旱相关基因的鉴定第97-109页
   ·讨论第109-113页
     ·关于全长cDNA判别第109页
     ·荧光定量PCR的反应体积第109-110页
     ·关于外标准品的制备第110页
     ·关于内参基因的选择第110-111页
     ·常规RT-PCR、相对定量、绝对定量的比较第111-112页
     ·无芒隐子草CsALDH和CsLEA2基因第112-113页
第六章 无芒隐子草CsALDH和CsLEA2基因转化拟南芥研究第113-126页
   ·前言第113页
   ·材料与方法第113-117页
     ·材料第113-114页
     ·应用Gateway克隆技术构建表达载体第114-115页
     ·电转化第115-116页
     ·拟南芥真空转化法第116页
     ·阳性植株的筛选第116-117页
   ·结果与分析第117-124页
     ·应用Gateway克隆技术构建表达载体第117-123页
     ·阳性植株的筛选第123-124页
   ·讨论第124-126页
第七章 结论与展望第126-129页
   ·全文结论第126-127页
   ·创新点第127-128页
   ·进一步研究方向第128-129页
参考文献第129-147页
附录一 缩略词第147-148页
附录二 实验所用的关键酶和试剂第148-149页
附录三 溶液配方第149-151页
附录四 实验中用到的启动子和终止子序列第151-152页
附录五 载体第152-156页
在读期间已发表或拟发表的学术论文:第156-157页
致谢第157页

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