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观赏向日葵花色形成的机理研究

摘要第1-13页
Abstract第13-16页
第一章 文献综述第16-37页
 1 类黄酮化合物的研究进展第16-35页
   ·概况第16-20页
   ·类黄酮化合物的生物功能第20-21页
   ·类黄酮化合物的提取分离与结构分析第21-24页
     ·类黄酮化合物的理化性质第21-22页
     ·类黄酮化合物的检识第22-23页
     ·类黄酮化合物的提取与分离第23页
     ·类黄酮化合物的结构分析第23-24页
   ·类黄酮的生物合成途径第24-26页
   ·花色素苷生物合成相关酶及其基因第26-34页
     ·结构基因第26-32页
     ·调节基因第32-34页
   ·花色素苷合成相关基因的表达调控第34-35页
 2 观赏向日葵的研究现状第35-36页
 3 本研究的目的和意义第36-37页
第二章 观赏向日葵适应性研究第37-49页
 1 材料与方法第37-38页
   ·材料第37页
   ·试验设计与性状调查第37-38页
   ·株高生长动态考察及生长函数设定第38页
   ·数据整理与统计分析第38页
 2 结果与分析第38-46页
   ·不同生长季节下观赏向日葵主要性状差异性分析第38-39页
   ·生育期间和生物学性状间的简单相关分析第39-41页
   ·不同播期生育期和生物学性状间的典范相关分析第41-44页
   ·不同播期对观赏向日葵株高生长的影响第44-46页
   ·不同播期对观赏向日葵株形的影响第46页
 3 小结与讨论第46-49页
   ·不同播期对观赏向日葵生育期与生物学性状差异性的影响第46-47页
   ·不同播期对观赏向日葵生育期与生物学性状相关性的影响第47-48页
   ·不同播期对观赏向日葵株高生长动态的影响第48页
   ·不同播期对观赏向日葵株型的影响第48-49页
第三章 观赏向日葵花瓣色素成分分析第49-64页
 1 材料与方法第49-52页
   ·花朵采集与处理第49页
   ·试剂第49页
   ·观赏向日葵花瓣色素的定性鉴定第49-51页
     ·色素提取与浓缩第49-50页
     ·特征颜色反应第50页
     ·薄层层析(TLC)分离纯化第50-51页
     ·紫外—可见光分光光度法检测花色素第51页
     ·花色素的HPLC-MS分析第51页
     ·花色素的MS分析第51页
   ·观赏向日葵花瓣花色素苷的稳定性第51-52页
 2 结果与分析第52-61页
   ·观赏向日葵花瓣色素的特征颜色反应第52-53页
     ·石油醚和氨水测试第52页
     ·浓盐酸—镁粉反应第52页
     ·硼氢化钠反应第52页
     ·三氯化铝的显色反应第52-53页
     ·三氯化铁的显色反应第53页
     ·醋酸铅显色反应第53页
     ·氯化锶显色反应第53页
     ·硼酸显色反应第53页
     ·碱性试剂的显色反应第53页
   ·紫外—可见光分光光度法检测花色素第53-55页
   ·花色素的HPLC分析第55-56页
   ·花色素MS分析第56-59页
   ·观赏向日葵花瓣花色素苷的稳定性研究第59-61页
     ·光对花色素苷含量的影响第59-60页
     ·温度对花色素苷含量的影响第60-61页
 3 小结与讨论第61-64页
   ·观赏向日葵花瓣色素的成分分析第61-62页
   ·观赏向日葵花瓣花色素苷的稳定性第62-64页
第四章 观赏向日葵花色素苷合成相关基因的克隆与表达第64-97页
 1 材料与方法第64-70页
   ·材料第64-65页
     ·植物材料第64页
     ·供试菌种及载体第64页
     ·引物设计第64页
     ·主要分子生物学及生化试剂第64-65页
   ·方法第65-69页
     ·RNA提取第65-66页
     ·cDNA第一链合成第66页
     ·观赏向日葵花色素苷合成相关基因PCR扩增第66页
     ·PCR产物目的片段回收第66-67页
     ·PCR产物目的片段克隆第67-68页
     ·PCR产物目的片段的序列测定第68-69页
     ·观赏向日葵花色素苷合成相关基因目的片段的序列分析第69页
   ·观赏向日葵花色素苷合成相关基因半定量RT-PCR第69-70页
     ·不同器官观赏向日葵花色素苷合成相关基因的表达第69-70页
     ·花发育过程中观赏向日葵花色素苷合成相关基因的表达第70页
     ·不同颜色花瓣观赏向日葵花色素苷合成相关基因的表达第70页
 2 结果与分析第70-94页
   ·观赏向日葵花瓣总RNA的提取第70-71页
   ·观赏向日葵花色素苷合成相关酶基因的克隆与序列分析第71-91页
     ·观赏向日葵PAL基因的克隆与序列分析第71-74页
     ·观赏向日葵CHS基因的克隆与序列分析第74-77页
     ·观赏向日葵CHI基因的克隆与序列分析第77-81页
     ·观赏向日葵F3'H基因的克隆与序列分析第81-84页
     ·观赏向日葵DFR基因的克隆与序列分析第84-87页
     ·观赏向日葵ANS基因的克隆与序列分析第87-90页
     ·观赏向日葵花色素苷生物合成相关基因的进化分析第90-91页
   ·不同器官观赏向日葵花色素苷的积累与合成相关基因的表达第91-94页
     ·总RNA的提取与电泳检测第91页
     ·不同器官观赏向日葵花色素苷生物合成相关基因的表达第91-92页
     ·花发育过程中观赏向日花色素苷生物合成相关基因的表达第92-93页
     ·观赏向日葵不同颜色花瓣中花色素苷生物合成相关基因的表达第93-94页
 3 小结与讨论第94-97页
   ·观赏向日葵花色素苷生物合成相关基因的克隆第94-95页
   ·观赏向曰葵花色素苷生物合成相关基因的表达第95-97页
第五章 基于EST的观赏向日葵osDFR基因编码区克隆及分析第97-118页
 1 材料与方法第97-104页
   ·材料第97页
     ·植物材料第97页
     ·供试菌种及载体第97页
     ·主要分子生物学及生化试剂第97页
   ·方法第97-104页
     ·DNA提取第97-98页
     ·RNA提取与cDNA第一链合成第98页
     ·观赏向日葵osDFR基因编码区的电子延伸与克隆第98-99页
     ·osDFR基因在大肠杆菌中的表达第99-100页
     ·Southern杂交第100-102页
     ·反义真核表达载体pCAM1300-antiDFR构建第102-103页
     ·PCR介导的底物结合位点敲除与突变第103-104页
 2 结果与分析第104-115页
   ·观赏向日葵花瓣总RNA的提取第104页
   ·基于EST的osDFR基因编码区克隆与序列分析第104-109页
     ·观赏向日葵osDFR基因编码区的获得第104-106页
     ·观赏向日葵osDFR基因编码蛋白质产物的结构分析及功能预测第106-109页
   ·观赏向日葵osDFR基因的Southern杂交分析第109页
   ·观赏向日葵osDFR基因在大肠杆菌中的表达第109-111页
     ·原核表达载体ptT-28-DFR的构建第109-110页
     ·目的蛋白的诱导表达第110-111页
   ·反义真核表达载体pCAM1300-antiDFR构建第111-113页
   ·PCR介导的底物结合位点定点突变第113-115页
     ·目的片段KODFR的获得第113-114页
     ·目的片段N1340和N134L的获得第114页
     ·真核表达载体pCAM-KODFR、pCAM-N134D和pCAM-N134L构建第114-115页
     ·目的片段KODFR、5134D和N134L的测序第115页
 3 小结与讨论第115-118页
第六章 本研究的主要结论、创新点及今后研究方向第118-121页
 1 主要结论第118-119页
 2 创新点第119页
 3 今后研究方向第119-121页
参考文献第121-133页
附录1 观赏向日葵不同花色品种第133-134页
附录2 缩略词第134-136页
附录3 在学期间发表的文章第136-137页
致谢第137页

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