摘要 | 第1-13页 |
Abstract | 第13-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-37页 |
1 类黄酮化合物的研究进展 | 第16-35页 |
·概况 | 第16-20页 |
·类黄酮化合物的生物功能 | 第20-21页 |
·类黄酮化合物的提取分离与结构分析 | 第21-24页 |
·类黄酮化合物的理化性质 | 第21-22页 |
·类黄酮化合物的检识 | 第22-23页 |
·类黄酮化合物的提取与分离 | 第23页 |
·类黄酮化合物的结构分析 | 第23-24页 |
·类黄酮的生物合成途径 | 第24-26页 |
·花色素苷生物合成相关酶及其基因 | 第26-34页 |
·结构基因 | 第26-32页 |
·调节基因 | 第32-34页 |
·花色素苷合成相关基因的表达调控 | 第34-35页 |
2 观赏向日葵的研究现状 | 第35-36页 |
3 本研究的目的和意义 | 第36-37页 |
第二章 观赏向日葵适应性研究 | 第37-49页 |
1 材料与方法 | 第37-38页 |
·材料 | 第37页 |
·试验设计与性状调查 | 第37-38页 |
·株高生长动态考察及生长函数设定 | 第38页 |
·数据整理与统计分析 | 第38页 |
2 结果与分析 | 第38-46页 |
·不同生长季节下观赏向日葵主要性状差异性分析 | 第38-39页 |
·生育期间和生物学性状间的简单相关分析 | 第39-41页 |
·不同播期生育期和生物学性状间的典范相关分析 | 第41-44页 |
·不同播期对观赏向日葵株高生长的影响 | 第44-46页 |
·不同播期对观赏向日葵株形的影响 | 第46页 |
3 小结与讨论 | 第46-49页 |
·不同播期对观赏向日葵生育期与生物学性状差异性的影响 | 第46-47页 |
·不同播期对观赏向日葵生育期与生物学性状相关性的影响 | 第47-48页 |
·不同播期对观赏向日葵株高生长动态的影响 | 第48页 |
·不同播期对观赏向日葵株型的影响 | 第48-49页 |
第三章 观赏向日葵花瓣色素成分分析 | 第49-64页 |
1 材料与方法 | 第49-52页 |
·花朵采集与处理 | 第49页 |
·试剂 | 第49页 |
·观赏向日葵花瓣色素的定性鉴定 | 第49-51页 |
·色素提取与浓缩 | 第49-50页 |
·特征颜色反应 | 第50页 |
·薄层层析(TLC)分离纯化 | 第50-51页 |
·紫外—可见光分光光度法检测花色素 | 第51页 |
·花色素的HPLC-MS分析 | 第51页 |
·花色素的MS分析 | 第51页 |
·观赏向日葵花瓣花色素苷的稳定性 | 第51-52页 |
2 结果与分析 | 第52-61页 |
·观赏向日葵花瓣色素的特征颜色反应 | 第52-53页 |
·石油醚和氨水测试 | 第52页 |
·浓盐酸—镁粉反应 | 第52页 |
·硼氢化钠反应 | 第52页 |
·三氯化铝的显色反应 | 第52-53页 |
·三氯化铁的显色反应 | 第53页 |
·醋酸铅显色反应 | 第53页 |
·氯化锶显色反应 | 第53页 |
·硼酸显色反应 | 第53页 |
·碱性试剂的显色反应 | 第53页 |
·紫外—可见光分光光度法检测花色素 | 第53-55页 |
·花色素的HPLC分析 | 第55-56页 |
·花色素MS分析 | 第56-59页 |
·观赏向日葵花瓣花色素苷的稳定性研究 | 第59-61页 |
·光对花色素苷含量的影响 | 第59-60页 |
·温度对花色素苷含量的影响 | 第60-61页 |
3 小结与讨论 | 第61-64页 |
·观赏向日葵花瓣色素的成分分析 | 第61-62页 |
·观赏向日葵花瓣花色素苷的稳定性 | 第62-64页 |
第四章 观赏向日葵花色素苷合成相关基因的克隆与表达 | 第64-97页 |
1 材料与方法 | 第64-70页 |
·材料 | 第64-65页 |
·植物材料 | 第64页 |
·供试菌种及载体 | 第64页 |
·引物设计 | 第64页 |
·主要分子生物学及生化试剂 | 第64-65页 |
·方法 | 第65-69页 |
·RNA提取 | 第65-66页 |
·cDNA第一链合成 | 第66页 |
·观赏向日葵花色素苷合成相关基因PCR扩增 | 第66页 |
·PCR产物目的片段回收 | 第66-67页 |
·PCR产物目的片段克隆 | 第67-68页 |
·PCR产物目的片段的序列测定 | 第68-69页 |
·观赏向日葵花色素苷合成相关基因目的片段的序列分析 | 第69页 |
·观赏向日葵花色素苷合成相关基因半定量RT-PCR | 第69-70页 |
·不同器官观赏向日葵花色素苷合成相关基因的表达 | 第69-70页 |
·花发育过程中观赏向日葵花色素苷合成相关基因的表达 | 第70页 |
·不同颜色花瓣观赏向日葵花色素苷合成相关基因的表达 | 第70页 |
2 结果与分析 | 第70-94页 |
·观赏向日葵花瓣总RNA的提取 | 第70-71页 |
·观赏向日葵花色素苷合成相关酶基因的克隆与序列分析 | 第71-91页 |
·观赏向日葵PAL基因的克隆与序列分析 | 第71-74页 |
·观赏向日葵CHS基因的克隆与序列分析 | 第74-77页 |
·观赏向日葵CHI基因的克隆与序列分析 | 第77-81页 |
·观赏向日葵F3'H基因的克隆与序列分析 | 第81-84页 |
·观赏向日葵DFR基因的克隆与序列分析 | 第84-87页 |
·观赏向日葵ANS基因的克隆与序列分析 | 第87-90页 |
·观赏向日葵花色素苷生物合成相关基因的进化分析 | 第90-91页 |
·不同器官观赏向日葵花色素苷的积累与合成相关基因的表达 | 第91-94页 |
·总RNA的提取与电泳检测 | 第91页 |
·不同器官观赏向日葵花色素苷生物合成相关基因的表达 | 第91-92页 |
·花发育过程中观赏向日花色素苷生物合成相关基因的表达 | 第92-93页 |
·观赏向日葵不同颜色花瓣中花色素苷生物合成相关基因的表达 | 第93-94页 |
3 小结与讨论 | 第94-97页 |
·观赏向日葵花色素苷生物合成相关基因的克隆 | 第94-95页 |
·观赏向曰葵花色素苷生物合成相关基因的表达 | 第95-97页 |
第五章 基于EST的观赏向日葵osDFR基因编码区克隆及分析 | 第97-118页 |
1 材料与方法 | 第97-104页 |
·材料 | 第97页 |
·植物材料 | 第97页 |
·供试菌种及载体 | 第97页 |
·主要分子生物学及生化试剂 | 第97页 |
·方法 | 第97-104页 |
·DNA提取 | 第97-98页 |
·RNA提取与cDNA第一链合成 | 第98页 |
·观赏向日葵osDFR基因编码区的电子延伸与克隆 | 第98-99页 |
·osDFR基因在大肠杆菌中的表达 | 第99-100页 |
·Southern杂交 | 第100-102页 |
·反义真核表达载体pCAM1300-antiDFR构建 | 第102-103页 |
·PCR介导的底物结合位点敲除与突变 | 第103-104页 |
2 结果与分析 | 第104-115页 |
·观赏向日葵花瓣总RNA的提取 | 第104页 |
·基于EST的osDFR基因编码区克隆与序列分析 | 第104-109页 |
·观赏向日葵osDFR基因编码区的获得 | 第104-106页 |
·观赏向日葵osDFR基因编码蛋白质产物的结构分析及功能预测 | 第106-109页 |
·观赏向日葵osDFR基因的Southern杂交分析 | 第109页 |
·观赏向日葵osDFR基因在大肠杆菌中的表达 | 第109-111页 |
·原核表达载体ptT-28-DFR的构建 | 第109-110页 |
·目的蛋白的诱导表达 | 第110-111页 |
·反义真核表达载体pCAM1300-antiDFR构建 | 第111-113页 |
·PCR介导的底物结合位点定点突变 | 第113-115页 |
·目的片段KODFR的获得 | 第113-114页 |
·目的片段N1340和N134L的获得 | 第114页 |
·真核表达载体pCAM-KODFR、pCAM-N134D和pCAM-N134L构建 | 第114-115页 |
·目的片段KODFR、5134D和N134L的测序 | 第115页 |
3 小结与讨论 | 第115-118页 |
第六章 本研究的主要结论、创新点及今后研究方向 | 第118-121页 |
1 主要结论 | 第118-119页 |
2 创新点 | 第119页 |
3 今后研究方向 | 第119-121页 |
参考文献 | 第121-133页 |
附录1 观赏向日葵不同花色品种 | 第133-134页 |
附录2 缩略词 | 第134-136页 |
附录3 在学期间发表的文章 | 第136-137页 |
致谢 | 第137页 |