| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 总体研究路线图 | 第12-17页 |
| 前言 | 第17-21页 |
| 第一章 重组腺病毒突变体基因Ad-HIF-1α的扩增、纯化与滴度测定 | 第21-47页 |
| ·实验材料 | 第22-29页 |
| ·重组腺病毒基因 | 第22-23页 |
| ·细胞株 | 第23页 |
| ·药品试剂 | 第23-24页 |
| ·仪器设备 | 第24页 |
| ·常用试剂的配制 | 第24-28页 |
| ·引物 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-35页 |
| ·HEK-293A细胞的传代培养、冻存、复苏 | 第29页 |
| ·腺病毒介导的人突变型HIF-1α基因的扩增和保存 | 第29-30页 |
| ·重组腺病毒滴度测定 | 第30-31页 |
| ·重组腺病毒的纯化、病毒滴度测定 | 第31-33页 |
| ·重组腺病毒的病毒DNA提取 | 第33页 |
| ·重组腺病毒的病毒PCR鉴定 | 第33-34页 |
| ·重组腺病毒转染效率测定 | 第34-35页 |
| ·重组腺病毒体外安全性研究 | 第35页 |
| ·统计学处理 | 第35页 |
| ·结果 | 第35-42页 |
| ·各组重组腺病毒滴度 | 第36页 |
| ·各组重组腺病毒经扩增、纯化后的鉴定与病毒滴度 | 第36-42页 |
| ·讨论 | 第42-46页 |
| ·本部分结论 | 第46-47页 |
| 第二章 重组腺病毒突变体基因Ad-HIF-1α的动物在体表达 | 第47-72页 |
| ·研究对象 | 第51-54页 |
| ·实验动物 | 第51页 |
| ·重组腺病毒 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51-52页 |
| ·引物 | 第52页 |
| ·主要仪器设备 | 第52-53页 |
| ·主要试剂配制 | 第53-54页 |
| ·实验方法 | 第54-59页 |
| ·实验动物的饲养 | 第54页 |
| ·大鼠后肢缺血模型的制备 | 第54页 |
| ·实验分组与基因转染方法 | 第54-55页 |
| ·RT-PCR法测定HIF-1α在骨骼肌组织中的mRNA表达 | 第55-58页 |
| ·免疫组化法检测下肢缺血骨骼肌组织中HIF-1α蛋白的表达 | 第58-59页 |
| ·统计学分析 | 第59页 |
| ·结果 | 第59-69页 |
| ·HIF-1α在骨骼肌组织中的核酸水平变化 | 第59-65页 |
| ·免疫组化法检测下肢缺血骨骼肌组织中HIF-1α蛋白表达结果 | 第65-69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| ·本部分结论 | 第71-72页 |
| 第三章 重组腺病毒突变体基因Ad-HIF-1α对大鼠急性后肢缺血模型的促血管新生作用 | 第72-86页 |
| ·研究对象 | 第73-75页 |
| ·实验动物 | 第73页 |
| ·重组腺病毒 | 第73页 |
| ·主要试剂 | 第73-74页 |
| ·主要仪器设备 | 第74页 |
| ·主要试剂配制 | 第74-75页 |
| ·实验方法 | 第75-78页 |
| ·实验动物的饲养 | 第75页 |
| ·大鼠后肢缺血模型的制备 | 第75页 |
| ·实验分组与基因转染方法 | 第75页 |
| ·免疫组化法检测下肢缺血骨骼肌组织CD31蛋白的表达 | 第75-76页 |
| ·DSA血管造影 | 第76-77页 |
| ·大鼠下肢动脉血管铸型 | 第77-78页 |
| ·结果 | 第78-81页 |
| ·免疫组化法检测下肢缺血骨骼肌组织CD31蛋白表达的结果 | 第78页 |
| ·DSA血管造影结果 | 第78页 |
| ·各组大鼠下肢动脉血管铸型结果 | 第78-81页 |
| ·讨论 | 第81-85页 |
| ·本部分结论 | 第85-86页 |
| 全文小结 | 第86-87页 |
| 本研究的不足之处 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-94页 |
| 英文缩写词表 | 第94-95页 |
| 学习期间发表的论文 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96-98页 |
