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乙烯利诱导的橡胶树胶乳cDNA消减文库构建及Etle1基因的克隆与表达分析

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
第一部分 前言第9-33页
   ·橡胶树及橡胶生产第9-10页
   ·乙烯利与胶乳增产生理及分子生物学研究第10-18页
     ·乙烯在植物生理中作用及其合成第10-11页
     ·乙烯信号转导研究第11-14页
     ·乙烯利与胶乳增产生理学研究第14-17页
     ·乙烯利与胶乳增产分子生物学研究第17-18页
   ·差异表达基因的分离策略第18-23页
     ·差别杂交第18页
     ·扣除杂交第18-19页
     ·与PCR 技术相关的几种分离策略第19-23页
   ·SMART RACE 扩增技术第23-29页
     ·SMART CDNA 合成的机制第23-24页
     ·SMART RACE 机制的流程第24-26页
     ·SMART RACE 构建全长CDNA 的流程(图9)第26-28页
     ·SMART RACE CDNA AMPLIFICATION KIT 的优点第28-29页
   ·基因表达分析技术第29-31页
     ·RT-PCR 的原理及用于基因表达的研究第29页
     ·基因芯片在基因表达研究中的应用第29-31页
   ·本研究的目的和意义第31-32页
   ·技术路线第32-33页
第二部分 材料和方法第33-57页
   ·材料与试剂第33页
     ·植物材料第33页
     ·质粒及菌种第33页
     ·试剂第33页
   ·方法与步骤第33-57页
     ·橡胶树胶乳总RNA 的提取第33-34页
     ·RNA 电泳检测第34页
     ·MRNA 纯化第34-36页
     ·SSH 差减文库的构建第36-43页
     ·差减文库构建及菌落PCR 产物筛选第43-45页
     ·RACE 获得感兴趣片段CDNA 全长第45-52页
     ·ETIE1 基因的获得第52-53页
     ·对ETIE1 CDNA 半定量分析其表达第53-57页
第三部分 结果与分析第57-69页
   ·胶乳总RNA 提取与质量检测第57页
   ·胶乳CDNA 的2 次差减杂交和抑制性PCR第57-58页
   ·胶乳抑制性差减CDNA 文库的构建及PCR 检测第58页
   ·EST(EXPRESSION SEQUENCE TAG,表达序列标签)片段的测序和同源性分析第58-59页
   ·3’RACE 结果第59-62页
   ·5’RACE 结果第62-64页
   ·全长CDNA 的获得第64-65页
   ·ETIE1 基因结构的获得第65-66页
   ·CDNA 基因结构和序列比较分析第66-68页
     ·ORF 结构分析第67页
     ·BLASTN 结果第67页
     ·BLASTX 结果第67页
     ·结构域分析第67-68页
     ·ETIE1 基因结构分析第68页
   ·ETIE1 CDNA 的差异表达分析第68-69页
第四部分 讨论第69-71页
   ·胶乳CDNA 消减文库的构建及初步分析第69页
   ·ETIE1 基因结构、表达分析及可能的功能第69-71页
第五部分 结论第71-72页
参考文献第72-75页
致谢第75页

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