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EST技术分析西伯利亚蓼耐盐机制及耐盐相关基因克隆

摘要第1-5页
Abstract第5-13页
1 绪论第13-23页
   ·盐胁迫对植物的伤害第13页
   ·植物耐盐的信号传导第13-16页
     ·植物离子平衡与信号传导第14-15页
     ·植物的渗透调节以及渗透信号传导第15-16页
     ·氧化胁迫的信号传导与氧自由基的清除第16页
   ·耐盐相关的转录因子研究第16-19页
     ·DREB转录因子(dehydration responsive element binding protein,DREB)第16-17页
     ·NAC转录因子第17页
     ·bzip(basic leucine zipper)转录因子第17页
     ·MYB、MYC类转录因子第17-18页
     ·WYKY类转录因子第18-19页
   ·模式植物与耐盐研究第19-20页
   ·功能基因组学在植物耐盐研究上的应用第20-21页
     ·表达序列标签技术第20页
     ·cDNA微阵列或DNA芯片技术第20页
     ·正向遗传学(Forwardgenetics)和反向遗传学(Reverse genetics)第20-21页
     ·抑制差减杂交技术(SSH)第21页
   ·西伯利亚蓼第21-23页
     ·西伯利亚蓼的自然状况第21页
     ·西伯利亚蓼的相关研究第21-23页
2 西伯利亚蓼叶混合cDNA文库EST的分析第23-39页
   ·材料与方法第23-24页
     ·试验分析材料第23页
     ·生物信息学分析第23-24页
   ·结果与分析第24-34页
     ·基因表达频率以及高丰度表达基因分析第24-25页
     ·TUT功能注释第25页
     ·MIP功能分类第25-33页
     ·高丰度表达基因第33-34页
   ·讨论第34-38页
     ·文库的冗余度第34-35页
     ·ESTs功能分类在不同丰度分析中的科学性第35页
     ·不同功能EST在不同丰度中的组成第35-37页
     ·高丰度表达基因的进一步分析第37-38页
   ·本章小结第38-39页
3 NaHCO_3胁迫西伯利亚蓼茎、叶正反消减文库构建及EST分析第39-55页
   ·试验材料、试剂和设备第39-41页
     ·试验材料第39页
     ·酶及化学试剂第39-40页
     ·主要仪器设备第40-41页
   ·方法第41-47页
     ·SDS法提取西伯利亚蓼茎和叶的总RNA第41页
     ·反转录第41-42页
     ·cDNA扩增第42页
     ·Rsa Ⅰ酶切第42页
     ·tester cDNA加接头第42-43页
     ·消减杂交第43-44页
     ·消减文库的建立第44-45页
     ·测序PCR模板制备第45-46页
     ·测序PCR反应第46-47页
     ·EST处理及冗余度计算第47页
   ·试验结果和分析第47-51页
     ·西伯利亚蓼总RNA的提取第47页
     ·西伯利亚蓼cDNA的扩增第47-48页
     ·cDNA的酶切第48-49页
     ·消减杂交产物的PCR检测第49页
     ·消减文库的EST统计及基本数据比较分析第49-50页
     ·正向、反向文库EST功能组成比较分析第50-51页
   ·讨论第51-54页
     ·消减文库的质量第51-52页
     ·西伯利亚蓼茎、叶的NaHCO_3胁迫应答方式第52-54页
   ·本章小结第54-55页
4 利用RACE技术克隆西伯利亚蓼耐盐相关基因第55-88页
   ·试验材料西伯利亚蓼第55-57页
     ·研究材料第55-56页
     ·试验试剂及引物第56-57页
   ·试验方法第57-59页
     ·RNA的提取第57页
     ·cDNA合成第57-58页
     ·PCR的扩增第58-59页
     ·序列分析第59页
   ·试验结果与分析第59-81页
     ·特异条带的确定与克隆第59-60页
     ·序列分析结果第60-81页
   ·讨论第81-87页
     ·水通道蛋白基因第81-82页
     ·胚胎晚期富集蛋白基因第82页
     ·乙二醛酶II基因第82-83页
     ·臭氧反应胁迫相关蛋白基因第83页
     ·谷氧还蛋白基因第83页
     ·超氧化物歧化酶第83-84页
     ·广泛应激蛋白第84页
     ·半胱氨酸蛋白酶抑制剂第84页
     ·铜伴侣第84-85页
     ·钙调蛋白第85页
     ·谷胱甘肽转硫酶第85页
     ·半胱氨酸合成酶第85-86页
     ·谷氨酰胺合成酶第86页
     ·金属硫蛋白第86页
     ·Aci-还原酮双加氧酶第86-87页
     ·泛素蛋白连接酶/锌结合蛋白第87页
   ·本章小结第87-88页
结论第88-90页
参考文献第90-105页
攻读学位期间发表的学术论文第105-106页
致谢第106-107页

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