摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
前言 | 第12-13页 |
1 文献综述 | 第13-21页 |
·配种后营养水平对胚胎存活率的影响 | 第13-14页 |
·配种后高营养水平对胚胎存活率的影响 | 第13页 |
·低营养水平对胚胎存活率的影响 | 第13-14页 |
·不同营养水平对孕酮浓度的影响 | 第14-15页 |
·孕酮在繁殖上的作用 | 第14页 |
·不同营养水平对血液孕酮的影响 | 第14-15页 |
·不同营养水平对子宫液中孕酮酮浓度的影响 | 第15页 |
·不同营养水平对胚胎基因表达的影响 | 第15-19页 |
·视黄醇结合蛋白(RBP) | 第15-16页 |
·孕酮受体 | 第16-17页 |
·OCT4 | 第17-18页 |
·成纤维细胞生长因子受体(FGFR) | 第18-19页 |
·MRNA定量的方法研究 | 第19-21页 |
·荧光定量反转录多聚酶链式反应(Real Time RT-PCR) | 第19-21页 |
·Real Time PCR定量的计算 | 第21页 |
2 存在的问题以及研究的目的和意义 | 第21-22页 |
3 材料与方法 | 第22-29页 |
·试验设计 | 第22页 |
·试验动物选择及分组 | 第22页 |
·试验饲粮及组成 | 第22-23页 |
·饲养管理 | 第23页 |
·观测指标及测定方法 | 第23-24页 |
·血样收集及孕酮浓度测定 | 第23-24页 |
·屠宰取样 | 第24页 |
·实验室分析用仪器和试剂 | 第24-26页 |
·主要仪器设备 | 第24-25页 |
·主要试剂 | 第25-26页 |
·试剂的配置方法 | 第26页 |
·RT-PCR测定步骤 | 第26-28页 |
·总RNA的提取 | 第26-27页 |
·cDNA第一链的合成(RT) | 第27页 |
·引物的设计与合成 | 第27-28页 |
·标准品的制备 | 第28页 |
·RT产物Real Time PCR反应 | 第28页 |
·RT-PCR扩增产物的电泳 | 第28页 |
·数据处理和统计分析 | 第28-29页 |
4 结果与分析 | 第29-41页 |
·营养水平对早期总活胚数和胚胎存活率的影响 | 第29页 |
·不同营养水平对血液、子宫液孕酮浓度的影响 | 第29-30页 |
·胚胎总RNA提取的电泳结果 | 第30-31页 |
·反转录产物PCR | 第31-32页 |
·管家基因的Real Time PCR | 第32-33页 |
·不同营养水平对胚胎视黄醇结合蛋白(RBP4)表达量的影响 | 第33-34页 |
·不同营养水平对胚胎成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)表达量的影响 | 第34-36页 |
·不同营养水平对胚胎OCT4基因表达量的影响 | 第36-37页 |
·不同营养是水平对孕酮基因受体表达量的影响 | 第37-38页 |
·相关性分析 | 第38-41页 |
5 讨论 | 第41-47页 |
·营养水平对胚胎存活率的影响 | 第41页 |
·营养水平对孕酮浓度的影响 | 第41-43页 |
·营养水平和孕酮浓度以及胚胎存活的关系 | 第43-44页 |
·不同营养水平对胚胎RBP4、FGFR2、OCT4、PGR基因表达量的影响 | 第44-47页 |
·不同营养水平对视黄醇结合蛋白基因表达的影响 | 第44-45页 |
·不同营养水平对FGFR2基因表达的影响 | 第45页 |
·不同营养水平对OCT4基因表达的影响 | 第45-46页 |
·不同营养水平对PGR基因表达量的影响 | 第46-47页 |
6 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
附录Ⅰ 孕酮浓度的EIA检测方法 | 第58-60页 |
附录Ⅱ RNA的提取、检测和DNASEI处理 | 第60-63页 |
附录Ⅲ RNA的反转录和常规PCR | 第63-64页 |
附录Ⅳ 实时定量PCR(RT-PCR) | 第64-66页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第66页 |