| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 1 绪论 | 第11-18页 |
| ·PEG 化概述 | 第11-14页 |
| ·PEG 分类 | 第11-13页 |
| ·PEG 化技术优点及研究现状 | 第13-14页 |
| ·模型蛋白SOD 概述 | 第14-16页 |
| ·SOD 的物化特性及结构 | 第14-15页 |
| ·选择SOD 作为模型蛋白的原因 | 第15-16页 |
| ·研究目的和意义 | 第16-18页 |
| 2 研究方案设计 | 第18-21页 |
| ·主要研究内容 | 第18页 |
| ·研究方案 | 第18-20页 |
| ·修饰剂的选择 | 第18页 |
| ·活化PEG 与SOD 修饰反应及反应产物分析 | 第18页 |
| ·PEG-SOD 分离纯化 | 第18页 |
| ·PEG-SOD 鉴定和性质分析 | 第18-20页 |
| ·技术路线 | 第20-21页 |
| 3 实验材料与方法 | 第21-30页 |
| ·主要仪器设备 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·实验试剂的配制 | 第21-22页 |
| ·SOD 酶活性试剂盒的配制 | 第21-22页 |
| ·各种缓冲液的配制 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-30页 |
| ·酶活力的测定 | 第22-23页 |
| ·蛋白质的SDS-PAGE 电泳 | 第23-25页 |
| ·SOD、PEG-SOD 的SEC-HPLC 分析 | 第25-26页 |
| ·阴离子交换色谱纯化SOD、PEG-SOD | 第26页 |
| ·蛋白浓度含量测定 | 第26-27页 |
| ·两种活化的聚乙二醇修饰SOD | 第27-28页 |
| ·修饰SOD 的分离纯化 | 第28-29页 |
| ·蛋白质热稳定性的研究 | 第29页 |
| ·蛋白质pH 稳定性的研究 | 第29页 |
| ·蛋白质抗酶解能力的比较 | 第29页 |
| ·蛋白质修饰率的测定(TNBS 法) | 第29-30页 |
| 4 结果与讨论 | 第30-52页 |
| ·原料SOD 性质分析 | 第30-32页 |
| ·SOD 粗品的HPLC 分析和电泳分析 | 第30-31页 |
| ·SOD 测活 | 第31页 |
| ·SOD 粗品性质小结 | 第31-32页 |
| ·纯化SOD 粗品 | 第32-36页 |
| ·Q XL 柱层析结果 | 第32页 |
| ·SEC-HPLC 分析洗脱液 | 第32-33页 |
| ·SOD 分离产物(透过峰、P1、P2)的性质研究 | 第33-35页 |
| ·纯化SOD 小结 | 第35-36页 |
| ·PEG-SOD 修饰产物的制备及剩余活力研究 | 第36-42页 |
| ·缓冲液浓度对SOD 活性的影响 | 第36-37页 |
| ·N 端烷化法制备PEG-SOD 的工艺 | 第37-39页 |
| ·SS-PEG 修饰SOD 研究 | 第39-41页 |
| ·SS-PEG 修饰SOD 反应条件小结 | 第41-42页 |
| ·层析纯化修饰产物及修饰产物的鉴定 | 第42-44页 |
| ·Sephadex G100 纯化SS-PEG 修饰SOD 产物 | 第42-43页 |
| ·SDS-PAGE 电泳鉴定纯化后的修饰蛋白 | 第43-44页 |
| ·蛋白质氨基修饰率的测定 | 第44页 |
| ·测定游离氨基修饰率实验的合适pH 值 | 第44页 |
| ·测定游离氨基修饰率 | 第44页 |
| ·蛋白质残基可及性及其对蛋白质修饰位点的预测 | 第44-45页 |
| ·修饰蛋白与天然SOD 热稳定性、pH 稳定性、抗酶解能力的比较 | 第45-52页 |
| ·修饰蛋白质热稳定性的研究 | 第45-47页 |
| ·修饰蛋白质pH 稳定性的研究 | 第47-48页 |
| ·修饰蛋白质抗酶解能力的研究 | 第48-50页 |
| ·酶稳定性研究小结 | 第50-52页 |
| 5 结论与展望 | 第52-54页 |
| ·结论 | 第52页 |
| ·展望 | 第52-53页 |
| ·创新点 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第60-61页 |
| 附件：PEG 化化学及SOD 概述 | 第61-67页 |
| 独创性声明 | 第67页 |
| 学位论文版权使用授权书 | 第67页 |
