| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 英文缩略词/中文对照表 | 第12-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-23页 |
| ·木质素的微生物降解 | 第13-17页 |
| ·木质素的概述 | 第13-14页 |
| ·木质素降解菌 | 第14-16页 |
| ·参与木质素降解的酶 | 第16-17页 |
| ·锰过氧化物酶的研究现状 | 第17-20页 |
| ·锰过氧化物酶的结构 | 第17-18页 |
| ·锰过氧化物酶的作用机制 | 第18-19页 |
| ·锰过氧化物酶的调节转录及表达 | 第19-20页 |
| ·应用前景 | 第20-21页 |
| ·造纸工业 | 第20页 |
| ·环境保护 | 第20-21页 |
| ·饲料工业 | 第21页 |
| ·研究的背景、思路及意义 | 第21-23页 |
| 第二章 实验设备及材料 | 第23-29页 |
| ·主要仪器设备 | 第23页 |
| ·实验材料 | 第23-29页 |
| ·菌种 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23-25页 |
| ·试剂 | 第25-26页 |
| ·溶液配制 | 第26-28页 |
| ·酶类 | 第28页 |
| ·试剂盒 | 第28-29页 |
| 第三章 实验方法 | 第29-40页 |
| ·培养方法 | 第29-30页 |
| ·平板菌种扩大培养 | 第29页 |
| ·分解木质素过氧化物酶的定性检测(苯胺兰平板脱色法) | 第29页 |
| ·不同的碳氮比例及锰离子浓度对培养的影响 | 第29页 |
| ·选用不同的碳源和氮源进行培养 | 第29-30页 |
| ·不同的培养起始PH对酶活的影响 | 第30页 |
| ·分析方法 | 第30-31页 |
| ·分解木质素过氧化物酶的活力测定方法 | 第30页 |
| ·培养基PH值的跟踪测定 | 第30-31页 |
| ·产酶曲线的测定 | 第31页 |
| ·培养上清中蛋白含量的测定 | 第31页 |
| ·菌体生物量测定 | 第31页 |
| ·锰过氧化物酶的纯化 | 第31-33页 |
| ·不同的沉淀法粗提发酵液中的MnP的效果的对比 | 第31-32页 |
| ·硫酸铵沉淀的透析 | 第32页 |
| ·DEAE阴离子交换柱层析分析目的蛋白 | 第32页 |
| ·SDS-PAGE电泳及蛋白的原位复性 | 第32-33页 |
| ·锰过氧化物酶性质的研究 | 第33-34页 |
| ·锰过氧化物酶分子量分析 | 第33页 |
| ·木质素过氧化物酶的最适反应温度和PH值 | 第33页 |
| ·酶的热稳定性和pH稳定性 | 第33-34页 |
| ·锰离子浓度对酶活性的影响 | 第34页 |
| ·金属离子对酶活性的影响 | 第34页 |
| ·木质素过氧化物酶基因的克隆 | 第34-40页 |
| ·总RNA的提取 | 第34-35页 |
| ·简并引物设计 | 第35页 |
| ·RT-PCR步骤 | 第35-37页 |
| ·切胶回收PCR产物 | 第37页 |
| ·TA克隆 | 第37-39页 |
| ·测序 | 第39-40页 |
| 第四章 好食脉孢菌产锰过氧化物酶的优化培养结果与讨论 | 第40-48页 |
| ·好食脉孢菌产锰过氧化物酶的优化培养结果 | 第40-46页 |
| ·木质素过氧化物酶的定性检测 | 第40-41页 |
| ·好食脉孢菌的产酶曲线图 | 第41页 |
| ·好食脉孢菌发酵液的蛋白浓度曲线 | 第41-42页 |
| ·在培养过程中发酵上清的PH值的变化 | 第42-43页 |
| ·培养基的碳氮比优化 | 第43-44页 |
| ·碳源氮源的种类对产酶情况的影响 | 第44-45页 |
| ·不同的起始PH值对产酶情况的影响 | 第45-46页 |
| ·优化培养条件后的培养结果 | 第46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第五章 锰过氧化物酶的纯化及酶学性质分析结果与讨论 | 第48-56页 |
| ·锰过氧化物酶的纯化结果 | 第48-54页 |
| ·锰过氧化物酶粗酶的沉淀 | 第48页 |
| ·DEAE柱层析结果 | 第48-51页 |
| ·锰过氧化物酶的最适反应pH值及pH稳定性 | 第51-52页 |
| ·MnP3的最适反应温度及温度稳定性 | 第52-53页 |
| ·Mn~(2+)对MnP3活力的影响 | 第53-54页 |
| ·金属离子对MnP3活力的影响 | 第54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| 第六章 简并引物扩增MNP基因的保守区域结果与讨论 | 第56-60页 |
| ·总RNA提取的结果 | 第56页 |
| ·简并引物扩增保守序列 | 第56-57页 |
| ·单酶切鉴定 | 第57页 |
| ·RT-PCR产物的测序结果 | 第57-58页 |
| ·序列的BLAST结果 | 第58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| 小结与展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
