| 论文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-29页 |
| 1 淡水生态系统中,水华暴发的原因及其危害 | 第11-13页 |
| 2 淡水生态系统中微囊藻毒素的代谢途径 | 第13-20页 |
| ·微囊藻毒素的生物聚集 | 第13-16页 |
| ·微囊藻毒素的生物净化 | 第16-19页 |
| ·食物链在微囊藻毒素代谢中的作用 | 第19-20页 |
| 3 淡水鱼类GST与GPx基因在微囊藻毒素去毒方面的重要作用 | 第20-22页 |
| 4 GST的研究进展 | 第22-25页 |
| ·GST及其基因分类 | 第23页 |
| ·GST分子结构及其主要功能域 | 第23-24页 |
| ·鱼类GST的研究进展 | 第24-25页 |
| 5 GPx的研究进展 | 第25-26页 |
| ·GPx及其基因分类 | 第25页 |
| ·GPx-1的功能及结构 | 第25-26页 |
| 6 本文的研究目的与意义 | 第26-28页 |
| 7 研究思路 | 第28-29页 |
| 第2章 斑鳢微囊藻毒素去毒相关基因sGST与GPx的克隆与序列分析 | 第29-58页 |
| 1 材料与方法 | 第29-43页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·实验鱼 | 第29页 |
| ·菌株与质粒 | 第29页 |
| ·试剂盒与试剂 | 第29页 |
| ·引物合成与序列测定 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-43页 |
| ·斑鳢微囊藻毒素去毒酶基因sGST与GPx核心片段的克隆 | 第29-37页 |
| ·斑鳢肝脏总RNA的提取 | 第30-31页 |
| ·引物的设计 | 第31页 |
| ·RT-PCR扩增斑鳢sGST和GPx基因cDNA核心片段 | 第31-32页 |
| ·PCR产物的T载体克隆 | 第32-37页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳回收PCR产物 | 第33页 |
| ·重组T质粒的构建 | 第33-34页 |
| ·重组质粒的转化 | 第34-35页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第34页 |
| ·重组质粒的转化 | 第34-35页 |
| ·阳性克隆的筛选(蓝白斑筛选) | 第35-36页 |
| ·阳性克隆的鉴定(菌落PCR鉴定) | 第36-37页 |
| ·序列测定与分析 | 第37页 |
| ·5’-RACE法扩增斑鳢sGST基因cDNA5’末端 | 第37-40页 |
| ·引物设计 | 第37页 |
| ·5’RACE法扩增斑鳢sGST基因cDNA5’末端 | 第37-40页 |
| ·5’-RACE PCR产物的T载体克隆 | 第40页 |
| ·3’-RACE法扩增斑鳢sGST基因cDNA5’末端 | 第40-43页 |
| ·引物设计 | 第40-41页 |
| ·3’RACE法扩增斑鳢sGST基因cDNA3’末端 | 第41-42页 |
| ·3’-RACE PCR产物的T载体克隆 | 第42-43页 |
| ·同源性分析及系统进化树重建 | 第43页 |
| 2 实验结果与分析 | 第43-58页 |
| ·斑鳢肝脏总RNA的提取 | 第43页 |
| ·斑鳢sGST和GPx基因cDNA核心片段的克隆 | 第43-45页 |
| ·RT-PCR扩增斑鳢sGST和GPx基因cDNA核心片段 | 第43-44页 |
| ·PCR产物的T载体克隆和序列测定 | 第44-45页 |
| ·斑鳢sGST基因全长cDNA序列的克隆 | 第45-47页 |
| ·5’-RACE法扩增斑鳢sGST基因cDNA5’末端和序列测定 | 第45-46页 |
| ·3’-RACE法扩增斑鳢sGST基因cDNA3’末端和序列测定 | 第46-47页 |
| ·斑鳢sGST与其它生物sGST氨基酸序列比较与系统进化分析 | 第47-54页 |
| ·斑鳢sGST基因全长cDNA序列 | 第47-48页 |
| ·斑鳢sGST与大口黑鲈、鲽、川鲽、真鲷、金头鲷、黑青斑河鲀等鱼类sGST氨基酸序列同源性比较 | 第48-51页 |
| ·斑鳢sGST与其它生物sGST的系统进化分析 | 第51-54页 |
| ·斑鳢GPx与其它生物GPx基因推测得到的氨基酸序列比较与系统进化分析 | 第54-58页 |
| ·斑鳢GPx基因cDNA核心序列 | 第54页 |
| ·斑鳢GPx与其它生物GPx同源性比较 | 第54-57页 |
| ·斑鳢GPx与其它生物GPx的系统进化分析 | 第57-58页 |
| 第3章 讨论 | 第58-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 附录一 常用试剂与缓冲液的配置 | 第68-72页 |
| 附录二 斑鳢sGST基因RACE扩增示意图 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
