| 摘要 | 第1-3页 |
| ABSTRACT | 第3-5页 |
| 符号说明 | 第5-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-19页 |
| 1 抗菌肽的特性及在植物基因工程上的应用 | 第8-13页 |
| ·抗菌肽的种类及抑菌机理 | 第8-9页 |
| ·抗菌肽的抗菌活性 | 第9-10页 |
| ·抗菌肽在植物基因工程上的应用 | 第10-13页 |
| ·植物遗传转化中抗菌肽基因的设计与合成 | 第10-11页 |
| ·转抗菌肽基因植株的获得 | 第11-12页 |
| ·分泌型信号肽在抗菌肽植物基因工程上的应用 | 第12-13页 |
| 2 甘蔗遗传转化研究进展 | 第13-16页 |
| ·遗传转化方法 | 第13-15页 |
| ·基因枪法 | 第13-14页 |
| ·电激法 | 第14页 |
| ·农杆菌介导法 | 第14-15页 |
| ·甘蔗遗传转化常用启动子和选择标记 | 第15-16页 |
| 3 PMI/甘露糖筛选体系在植物基因工程中的应用 | 第16-17页 |
| 4 甘蔗宿根矮化病的发生及防治 | 第17-18页 |
| 5 本研究的依据及意义 | 第18-19页 |
| 第二章 材料和方法 | 第19-34页 |
| 1. 主要试剂与仪器 | 第19-21页 |
| ·基本试剂及生产厂家 | 第19页 |
| ·酶和其他试剂 | 第19页 |
| ·本研究所用的菌株及质粒 | 第19页 |
| ·主要仪器和厂家 | 第19-20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·抗生素 | 第20-21页 |
| 2. 实验方法 | 第21-34页 |
| ·抗菌肽基因分段合成的设计 | 第21-25页 |
| ·oecropin AD基因的设计 | 第22-23页 |
| ·shiva-1基因的设计 | 第23-24页 |
| ·cecropin AD和shiva-1 PCR反应程序设计 | 第24-25页 |
| ·全基因合成的抗菌肽基因的设计 | 第25-27页 |
| ·质粒 DNA的提取 | 第27-29页 |
| ·质粒 DNA的小量提取 | 第27-28页 |
| ·质粒 DNA的大量提取(SDS法)与纯化 | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·质粒载体和目的 DNA的酶切反应 | 第29-30页 |
| ·载体与基因片段的连接 | 第30页 |
| ·质粒 DNA的转化、筛选和鉴定 | 第30-31页 |
| ·质粒的转化 | 第30页 |
| ·重组质粒的筛选、鉴定 | 第30-31页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第31-34页 |
| ·Ubi启动子的鉴定 | 第31-32页 |
| ·质粒pCAMBIA2301的获得 | 第32页 |
| ·植物表达载体pCAM-Ubi-MSI的构建 | 第32-34页 |
| ·甘蔗愈伤组织的甘露糖抗性筛选 | 第34页 |
| 第三章 结果与分析 | 第34-46页 |
| 1 抗菌肽基因分段合成 | 第34-40页 |
| 2 抗菌肽基因的全基因合成 | 第40-41页 |
| 3 植物表达载体的构建 | 第41-44页 |
| ·Ubi启动子的鉴定 | 第41-42页 |
| ·载体pZMLR-MSI-NOS的构建 | 第42-43页 |
| ·pCAM-UBI-MSI-NOS植物表达载体的构建 | 第43-44页 |
| 4 ROC16愈伤组织的甘露糖抗性筛选 | 第44-46页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第46-49页 |
| 1 结论 | 第46页 |
| 2 讨论 | 第46-49页 |
| ·基因 PCR分段合成的几个问题 | 第46-47页 |
| ·甘露糖对甘蔗愈伤组织生长的影响 | 第47-48页 |
| ·下一步要做的工作 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 攻读学位期间发表或录用的论文 | 第56页 |