| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 1 前言 | 第7-16页 |
| ·糖化酶在微生物中的分布及组分多型性 | 第7-8页 |
| ·糖化酶的分子结构及作用机理 | 第8-10页 |
| ·基本结构 | 第8-9页 |
| ·催化域的结构及催化机制 | 第9页 |
| ·淀粉结合域的结构及结合淀粉的分子机制 | 第9-10页 |
| ·连接域的结构 | 第10页 |
| ·糖化酶的特性 | 第10-11页 |
| ·热稳定性和pH稳定性 | 第10页 |
| ·底物亲和性 | 第10-11页 |
| ·糖化酶的分子生物学 | 第11-13页 |
| ·糖化酶基因 | 第11-12页 |
| ·糖化酶基因在酵母中的表达 | 第12页 |
| ·糖化酶基因表达调控研究 | 第12-13页 |
| ·糖化酶的应用 | 第13-14页 |
| ·提高糖化酶活力的研究 | 第14-15页 |
| ·本文的主要研究内容 | 第15-16页 |
| 2 材料和方法 | 第16-25页 |
| ·菌株和质粒 | 第16页 |
| ·工具酶和试剂 | 第16-17页 |
| ·培养基及培养方法 | 第17页 |
| ·染色体的提取 | 第17-18页 |
| ·糖化酶生产菌株保守序列的分子生物学分析 | 第18页 |
| ·黑曲霉糖化酶glaA基因片段的PCR扩增和序列测定 | 第18-19页 |
| ·快速小量抽提质粒DNA | 第19-20页 |
| ·感受态细胞制备 | 第20页 |
| ·黑曲霉原生质体的制备、再生和转化 | 第20-21页 |
| ·发酵试验 | 第21-22页 |
| ·酶活测定 | 第22-24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| 3 结果和分析 | 第25-47页 |
| ·糖化酶生产菌株保守序列的分子生物学分析 | 第25-27页 |
| ·保守序列的扩增 | 第25-26页 |
| ·保守序列的测定及分析 | 第26页 |
| ·进化树分析 | 第26-27页 |
| ·糖化酶基因的克隆、测序和表达载体的构建 | 第27-35页 |
| ·黑曲霉glaA基因的PCR扩增 | 第27页 |
| ·糖化酶生产菌株glaA序列的测定及分析 | 第27-34页 |
| ·重组质粒pBC-Hygro-glaA的构建 | 第34-35页 |
| ·黑曲霉原生质体的制备、再生和转化研究 | 第35-40页 |
| ·菌龄对原生质体形成的影响 | 第35-36页 |
| ·渗透压稳定剂对原生质体形成的影响 | 第36页 |
| ·不同裂解酶及浓度对原生质体形成的影响 | 第36-37页 |
| ·酶作用时间对原生质形成的影响 | 第37-38页 |
| ·酶作用时间对原生质体再生率的影响 | 第38页 |
| ·不同渗透压稳定剂对原生质体再生率的影响 | 第38-39页 |
| ·原生质体释放的形态学观察 | 第39页 |
| ·原生质体转化 | 第39-40页 |
| ·高产糖化酶菌株的筛选和摇瓶发酵研究 | 第40-47页 |
| ·新菌株的菌落形态 | 第40页 |
| ·摇瓶筛选高糖化酶活力菌株 | 第40-42页 |
| ·转化菌株GB0506 的鉴定 | 第42-43页 |
| ·转化子GB0506 摇瓶发酵条件的优化 | 第43-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| 论文主要结论 | 第49-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 硕士研究生期间发表的论文 | 第56页 |