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N-连接蛋白质糖基化分析用微流控芯片平台和方法研究

摘要第1-4页
Abstract第4-11页
导论(文献综述)第11-52页
 第一章 N-连接蛋白质糖基化分析进展第11-52页
   ·引言第11页
   ·N-连接糖基化介绍第11-14页
     ·N-连接糖基化特点第11-13页
     ·N-连接糖链的分类第13-14页
   ·N-连接糖基化的分析策略第14-19页
     ·以二维凝胶电泳为基础的分析策略第15-16页
     ·以凝集素亲和色谱为基础的分析策略第16-18页
     ·其他的分析策略第18-19页
   ·N-连接糖基化的现代分析技术第19-32页
     ·高效液相色谱第19-22页
       ·糖链的高效液相色谱分析第19-21页
         ·反相液相色谱第19-20页
         ·正相液相色谱第20页
         ·石墨液相色谱第20-21页
       ·糖肽的高效液相色谱分析第21-22页
         ·富集技术第21页
         ·液相色谱分离第21-22页
     ·凝集素亲和色谱第22-23页
     ·毛细管电泳第23-24页
       ·毛细管电泳对糖形以及寡糖的分离第23页
       ·毛细管电泳/质谱第23-24页
       ·亲和毛细管电泳第24页
     ·微流控芯片第24-26页
       ·芯片电泳第24-25页
       ·微流控芯片/质谱第25-26页
       ·集成化微流控芯片第26页
     ·质谱第26-31页
       ·快原子轰击质谱第26-27页
       ·基体辅助激光解吸/离子化质谱第27-29页
       ·电喷雾质谱第29-31页
     ·核磁共振第31页
     ·荧光辅助糖电泳第31-32页
     ·其他分析技术第32页
   ·N-连接蛋白质糖基化分析展望第32-33页
   ·本论文涉及的N-连接蛋白质糖基化分析用微流控芯片平台和方法研究的概述第33-34页
  参考文献第34-52页
第一篇 蛋白质糖基化分析微流控芯片平台和方法的研究第52-94页
 第二章 芯片电泳对简单糖的分离与检测第52-62页
   ·引言第52-53页
   ·实验部分第53-55页
     ·仪器与试剂第53-54页
       ·试剂第53页
       ·仪器第53-54页
     ·糖的AMAC 标记反应第54页
     ·糖的芯片电泳分离与检测第54-55页
       ·糖的芯片电泳/直接荧光检测第54页
       ·糖的芯片电泳/间接荧光检测第54-55页
   ·结果与讨论第55-60页
     ·单糖的芯片电泳/直接检测第55-56页
     ·单糖的芯片电泳/间接荧光检测第56-60页
       ·缓冲液的选择第57-58页
       ·葡萄糖定量分析第58-59页
       ·简单糖的分离第59-60页
   ·小结第60页
  参考文献第60-62页
 第三章 芯片电泳/外切糖苷酶酶解对糖肽的分析第62-75页
   ·引言第62-63页
   ·实验部分第63-65页
     ·仪器与试剂第63-64页
       ·试剂第63页
       ·仪器第63-64页
     ·卵白蛋白的胰蛋白酶水解第64页
     ·卵白蛋白的链霉蛋白酶水解第64页
     ·外切糖苷酶水解第64-65页
     ·蛋白酶水解产物的荧光标记第65页
     ·芯片电泳第65页
   ·结果与讨论第65-72页
     ·卵白蛋白胰蛋白酶水解产物的芯片电泳分离第65-67页
     ·鸡卵白蛋白的糖肽的分离第67-68页
     ·鸡卵白蛋白和火鸡卵白蛋白糖肽的分析第68-72页
       ·鸡卵白蛋白糖肽的分析第68-69页
       ·火鸡卵白蛋白的糖肽分析第69-72页
   ·结论第72页
  参考文献第72-75页
 第四章 集成化凝集素亲和芯片的构建及其对糖形的分析第75-94页
   ·引言第75-76页
   ·实验部分第76-81页
     ·仪器与试剂第76-78页
       ·试剂第77页
       ·仪器第77-78页
     ·豌豆凝集素亲和柱的制备第78-79页
     ·糖蛋白的荧光标记与纯化第79页
     ·凝集素亲和芯片第79-81页
   ·结果与讨论第81-89页
     ·整体柱材料的制备第81页
     ·缓冲液体系第81-82页
     ·芯片特性的测定第82-83页
     ·豌豆凝集素亲和柱的非特异性吸附第83-85页
     ·豌豆凝集素亲和芯片的重现性及其对糖形的分离第85-89页
   ·结论第89-90页
  参考文献第90-94页
第二篇 蛋白质糖基化分析微流控芯片/质谱平台和方法的研究第94-127页
 第五章 微流控芯片/质谱接口的构建及其在糖基化分析中的应用第94-111页
   ·引言第95-96页
   ·实验部分第96-99页
     ·仪器与试剂第96-97页
       ·试剂第97页
       ·仪器第97页
     ·芯片通道和毛细管的修饰第97页
     ·芯片与质谱的连接第97-98页
     ·芯片电泳/质谱第98页
     ·RNase B 的胰蛋白酶酶解第98-99页
   ·结果与讨论第99-108页
     ·鞘流液流速的优化第99-100页
     ·检测限第100-101页
     ·芯片电泳/质谱对肽的分析第101-103页
     ·芯片电泳/质谱对糖蛋白与糖肽的分析第103-108页
   ·结论第108页
  参考文献第108-111页
 第六章 基体辅助激光解吸离子化质谱对糖链结构的分析第111-127页
   ·引言第111-113页
   ·实验部分第113-114页
     ·仪器与试剂第113页
       ·试剂第113页
       ·仪器第113页
     ·糖链的释放第113页
     ·糖链的外切糖苷酶酶解第113页
     ·糖链的MALDI-TOF-MS 和MALDI-Q-TOF-MS 检测第113-114页
   ·结果与讨论第114-124页
     ·MALDI-TOF-MS 和外切糖苷酶对糖链组成的分析第114-120页
     ·MALDI-Q-TOF-MS 对糖链结构的分析第120-124页
   ·结论第124-125页
  参考文献第125-127页
总结论第127-128页
作者简介第128页
论文发表情况第128-130页
博士期间申请专利情况第130-131页
致谢第131页

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