摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-13页 |
第1章 前言 | 第13-17页 |
第2章 仪器和材料 | 第17-23页 |
·仪器及物品 | 第17页 |
·菌株和质粒 | 第17-18页 |
·试剂及溶液 | 第18-23页 |
第3章 方法 | 第23-35页 |
·Trizol提取黑曲霉菌TS1总RNA | 第23页 |
·PcR引物设计 | 第23-24页 |
·RT-PCR | 第24-25页 |
·质粒pYG1.2的提取 | 第25-26页 |
·PCR产物及质粒pYG1.2的双酶切 | 第26页 |
·酶切产物的连接反应 | 第26-27页 |
·Inoue法制备大肠杆菌超级感受态细胞 | 第27页 |
·重组质粒的大肠杆菌转化 | 第27-28页 |
·重组质粒的鉴定 | 第28-29页 |
·重组质粒pYG1.2-xynB转化宿主黑曲霉菌M54 | 第29-30页 |
·重组木聚糖酶在黑曲霉菌M54中的表达 | 第30-31页 |
·SDS-PAGE | 第31-32页 |
·DNS法测定重组木聚糖酶的活性 | 第32-33页 |
·重组木聚糖酶酶学特性研究 | 第33-35页 |
第4章 结果 | 第35-45页 |
·黑曲霉菌TS1总RNA电泳图 | 第35页 |
·RT-PCR扩增木聚糖酶xynB基因 | 第35-36页 |
·融合表达载体的构建 | 第36-37页 |
·酶切鉴定pYG1.2-xynB重组质粒 | 第37页 |
·xynB基因编码序列测序结果 | 第37-38页 |
·pYG1.2-xynB重组质粒转化宿主黑曲霉菌M54实验结果 | 第38-39页 |
·蛋白表达产物的SDS-PAGE | 第39-40页 |
·重组木聚糖酶活性测定 | 第40-42页 |
·重组木聚糖酶酶学性质 | 第42-45页 |
第5章 分析讨论 | 第45-51页 |
·丝状真菌表达系统 | 第45-47页 |
·同源表达策略 | 第47-48页 |
·木聚糖酶的诱导表达 | 第48-49页 |
·黑曲霉M54原生质体的制备 | 第49-50页 |
·重组木聚糖酶酶学性质 | 第50-51页 |
第6章 结论 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-55页 |
附录A 综述 | 第55-61页 |
个人简历 在读期间发表的学术论文与研究成果 | 第61页 |