摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一篇 文献综述 | 第10-27页 |
第一章 幽门螺杆菌及其保护抗原的简介 | 第10-18页 |
1 幽门螺杆菌的简介 | 第10-12页 |
2 与幽门螺杆菌相关的基因 | 第12-18页 |
·细胞毒素相关蛋白(cytotoxin-associated protein A,CagA) | 第12-14页 |
·尿素酶及其亚单位(Urease) | 第14-16页 |
·黏附素 | 第16页 |
·空泡毒素(Vacuolating cytotoxin A,VacA) | 第16-18页 |
第二章 免疫佐剂 | 第18-22页 |
1 霍乱肠毒素及其 B亚单位 | 第18-20页 |
2 大肠杆菌热不稳定肠毒素(Escherichia coli heat-labile enterotoxin,LT) | 第20-22页 |
第三章 植物疫苗可行性发展前景简介 | 第22-27页 |
1 植物疫苗发展的动力 | 第22页 |
2 植物疫苗的作用机理及可行性 | 第22-23页 |
3 植物疫苗的优点及生产口服疫苗的优势 | 第23-25页 |
4 转基因植物生产疫苗过程中存在的问题 | 第25-27页 |
·增强目的基因的表达水平 | 第25页 |
·受体植物的选择 | 第25-26页 |
·增强口服疫苗的免疫原性 | 第26-27页 |
第二篇 研究报告 | 第27-56页 |
第一章 融合基因 CTB-ureB和CTB-cagA在番茄中的转化 | 第27-44页 |
1 材料与方法 | 第27-36页 |
·实验材料 | 第27-29页 |
·植物材料 | 第27页 |
·菌株和质粒 | 第27-28页 |
·目的基因及引物 | 第28页 |
·实验试剂 | 第28-29页 |
·实验方法 | 第29-36页 |
·番茄无菌苗及外植体的获得和农杆菌的活化 | 第29页 |
·番茄无菌苗及外植体的获得 | 第29页 |
·农杆菌的活化 | 第29页 |
·农杆菌介导的番茄的遗传转化 | 第29-30页 |
·番茄外植体与农杆菌的共培养 | 第29页 |
·选择性诱导培养 | 第29-30页 |
·抗性植株再生 | 第30页 |
·再生植株的移栽 | 第30页 |
·转化再生植株的分子鉴定 | 第30-35页 |
·CTAB改良法小量制备植株基因组 DNA | 第30-31页 |
·LiCl_3法提取植物总 RNA | 第31页 |
·转基因番茄的 PCR检测 | 第31-33页 |
·Southern检测转基因植株 | 第33-35页 |
·植物表达蛋白测定 | 第35-36页 |
·植物可溶性蛋白的提取及测定 | 第35页 |
·Western-blot | 第35-36页 |
2 结果与分析 | 第36-41页 |
·番茄再生植株获得全过程 | 第36-38页 |
抗性不定芽的诱导 | 第37页 |
诱导生根及成苗 | 第37-38页 |
·番茄转化植株的 PCR鉴定 | 第38-39页 |
·番茄转基因植株的southern-blot | 第39-40页 |
·番茄植株的western-blot | 第40-41页 |
·阳性转基因番茄植株 F_1代 PCR检测 | 第41页 |
3. 讨论 | 第41-44页 |
·番茄遗传转化体系 | 第41-42页 |
·转基因番茄植株的分子检测 | 第42-44页 |
第二章 果实特异启动子表达载体的构建 | 第44-56页 |
1 材料与方法 | 第44-51页 |
·实验材料 | 第44-47页 |
·菌种 | 第44页 |
·质粒载体 | 第44-45页 |
·目的基因 | 第45-46页 |
·酶及主要试剂 | 第46-47页 |
·实验方法 | 第47-51页 |
·碱法小量提取质粒 DNA | 第47页 |
·目的基因的克隆 | 第47-48页 |
·DNA的酶切 | 第48页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第48-49页 |
·DNA片段回收 | 第49-50页 |
·DNA连接 | 第50页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第50页 |
·热激法转化大肠杆菌 | 第50-51页 |
·连接产物的酶切鉴定 | 第51页 |
·质粒 DNA的 PCR鉴定 | 第51页 |
2. 结果 | 第51-54页 |
·目的基因的PCR扩增 | 第51-52页 |
·目的基因的回收 | 第52-53页 |
·载体的酶切 | 第53页 |
·重组载体 PCR检测 | 第53-54页 |
·重组载体酶切检测 | 第54页 |
3 讨论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-66页 |
附录I 番茄转基因实验中各种培养基及反应试剂的配制方法 | 第66-70页 |
硕士期间发表(已接受)的论文 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |