| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-31页 |
| ·固定化微环境的定义 | 第14页 |
| ·固定化微环境的种类 | 第14-17页 |
| ·包埋法固定化微环境 | 第14-15页 |
| ·吸附固定化微环境 | 第15-16页 |
| ·其他固定化微环境 | 第16-17页 |
| ·固定化微环境的理化性质和对细胞的影响机制 | 第17-26页 |
| ·固定化微环境的物理和化学性质 | 第17-18页 |
| ·固定化微环境对细胞的影响机制 | 第18-24页 |
| ·固定化细胞的数学模型 | 第24-26页 |
| ·促进固定化细胞目的产物释放的措施 | 第26-27页 |
| ·培养条件变化 | 第26页 |
| ·运用物理和化学手段增加膜通透性 | 第26-27页 |
| ·两相培养法 | 第27页 |
| ·固定化微环境细胞培养工程策略 | 第27-28页 |
| ·明确某种植物细胞是否需要固定化微环境培养 | 第27页 |
| ·获得外泌型（至少是部分的）高产细胞系 | 第27页 |
| ·选择合适的固定化微环境 | 第27-28页 |
| ·前体饲喂 | 第28页 |
| ·运用多种手段促进细胞目的产物分泌 | 第28页 |
| ·选择合理的生物反应过程和合适的生物反应器 | 第28页 |
| ·本文研究目的及主要内容 | 第28-31页 |
| 第二章 固定化过程中红豆杉细胞壁表面化学成分含量的变化 | 第31-46页 |
| ·引言 | 第31页 |
| ·材料与方法 | 第31-37页 |
| ·试剂 | 第31页 |
| ·细胞株系及培养 | 第31-33页 |
| ·聚氨酯泡沫预处理及固定化微环境培养条件的建立 | 第33-36页 |
| ·细胞生物量的测定 | 第36页 |
| ·固定化细胞的释放 | 第36页 |
| ·细胞的X 光光电子能谱仪（XPS）分析 | 第36-37页 |
| ·环境扫描电子显微镜观察 | 第37页 |
| ·实验设计 | 第37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-45页 |
| ·固定化过程细胞生物量的变化 | 第37-38页 |
| ·细胞壁表面化学成分的 XPS 分析 | 第38-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 第三章 微环境对红豆杉细胞膜 ATPase 活性及脂肪酸组分含量的影响 | 第46-60页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·材料与方法 | 第46-50页 |
| ·试剂 | 第46页 |
| ·细胞株系及培养 | 第46页 |
| ·细胞生物量的测定 | 第46-47页 |
| ·培养液的提取 | 第47页 |
| ·pH 的测定 | 第47页 |
| ·电导率的测定 | 第47页 |
| ·固定化细胞的释放 | 第47页 |
| ·细胞膜的提取 | 第47-48页 |
| ·H~+-ATPase 和Ca~(2+)-ATPase 活性的测定 | 第48页 |
| ·膜脂肪酸提取 | 第48页 |
| ·膜脂肪酸组分测定及不饱和指数（IUFA）的计算 | 第48页 |
| ·可溶性蛋白质含量的测定 | 第48-49页 |
| ·PAL 活性的测定 | 第49页 |
| ·紫杉醇含量的测定 | 第49页 |
| ·实验设计 | 第49-50页 |
| ·结果与讨论 | 第50-59页 |
| ·微环境对细胞生长的影响 | 第50-51页 |
| ·微环境内pH 的变化 | 第51页 |
| ·微环境对电导率的影响 | 第51-52页 |
| ·膜纯度的测定 | 第52页 |
| ·微环境对膜 H~+-ATPase 和 Ca~(2+)-ATPase 活性的影响 | 第52-53页 |
| ·微环境对膜脂肪酸组分的影响 | 第53-56页 |
| ·微环境对可溶性蛋白质含量的影响 | 第56-57页 |
| ·微环境对 PAL 活性的影响 | 第57-58页 |
| ·微环境对紫杉醇合成的影响 | 第58页 |
| ·膜脂肪酸组分含量与紫杉醇合成的动态变化关系 | 第58-59页 |
| ·小结 | 第59-60页 |
| 第四章 微环境对红豆杉细胞活性氧含量和紫杉醇合成的影响 | 第60-71页 |
| ·引言 | 第60页 |
| ·材料与方法 | 第60-63页 |
| ·试剂 | 第60页 |
| ·细胞株系及培养 | 第60页 |
| ·固定化细胞的释放 | 第60-61页 |
| ·丙二醛（MDA）含量的测定 | 第61页 |
| ·细胞膜通透性的测定 | 第61页 |
| ·培养液的提取 | 第61页 |
| ·H_2O_2含量的测定 | 第61-62页 |
| ·O_2~(·-)含量的测定 | 第62页 |
| ·PAL 活性测定 | 第62页 |
| ·紫杉醇含量的测定 | 第62页 |
| ·实验设计 | 第62-63页 |
| ·结果与讨论 | 第63-70页 |
| ·微环境对细胞膜脂过氧化的影响 | 第63-64页 |
| ·微环境对细胞膜通透性的影响 | 第64页 |
| ·微环境对胞内 H_2O_2含量的变化 | 第64-65页 |
| ·微环境对胞外 O_2~(·-)含量的变化 | 第65-66页 |
| ·微环境对胞外 H_2O_2含量的变化 | 第66-67页 |
| ·释放细胞胞内 H202含量的变化 | 第67-68页 |
| ·添加 H_2O_2对细胞膜通透性和细胞生长的影响 | 第68页 |
| ·添加 H_2O_2对细胞膜通透性和次生代谢的影响 | 第68-70页 |
| ·活性氧含量变化与紫杉醇合成的关系 | 第70页 |
| ·小结 | 第70-71页 |
| 第五章 微环境对红豆杉细胞金属离子含量分布和紫杉醇合成的影响 | 第71-81页 |
| ·引言 | 第71页 |
| ·材料与方法 | 第71-73页 |
| ·试剂 | 第71页 |
| ·细胞株系及培养 | 第71-72页 |
| ·固定化载体的分层定义 | 第72页 |
| ·固定化细胞的释放 | 第72页 |
| ·细胞内 K~+、Mg~(2+)和 Ca~(2+)的提取 | 第72页 |
| ·培养液的提取 | 第72页 |
| ·K~+、Mg~(2+)和 Ca~(2+)的测定 | 第72页 |
| ·紫杉醇含量的测定 | 第72页 |
| ·实验设计 | 第72-73页 |
| ·结果与讨论 | 第73-80页 |
| ·胞外和胞内 K~+含量的测定 | 第73-74页 |
| ·胞外和胞内 Mg~(2+)含量的变化 | 第74-75页 |
| ·胞外和胞内 Ca~(2+)含量的测定 | 第75-77页 |
| ·固定化不同层面细胞胞内紫杉醇含量的变化 | 第77-78页 |
| ·固定化不同层面细胞生物量的测定 | 第78页 |
| ·胞内 K~+、Mg~(2+)和Ca~(2+)的含量和紫杉醇含量的变化关系 | 第78-80页 |
| ·小结 | 第80-81页 |
| 第六章 微环境内营养物质消耗和紫杉醇合成的动态关系 | 第81-92页 |
| ·引言 | 第81页 |
| ·材料与方法 | 第81-84页 |
| ·试剂 | 第81页 |
| ·细胞株系及培养 | 第81页 |
| ·细胞生物量的测定 | 第81-82页 |
| ·固定化细胞的释放 | 第82页 |
| ·培养液的提取 | 第82页 |
| ·pH 的测定 | 第82页 |
| ·电导率的测定 | 第82页 |
| ·果糖含量的测定 | 第82页 |
| ·蔗糖含量的测定 | 第82页 |
| ·葡萄糖含量的测定 | 第82页 |
| ·硝态氮含量的测定 | 第82-83页 |
| ·可溶性磷含量的测定 | 第83页 |
| ·紫杉醇的提取和含量测定 | 第83页 |
| ·实验设计 | 第83-84页 |
| ·结果与讨论 | 第84-91页 |
| ·微环境对南方红豆杉细胞生长的影响 | 第84页 |
| ·微环境内pH 的变化 | 第84-85页 |
| ·微环境内电导率的变化 | 第85页 |
| ·微环境对胞外 NO_3~-浓度的影响 | 第85-86页 |
| ·微环境内可溶性磷含量的变化 | 第86-87页 |
| ·微环境对胞外蔗糖含量的影响 | 第87页 |
| ·微环境对胞外果糖含量的影响 | 第87-88页 |
| ·微环境对胞外葡萄糖含量的影响 | 第88-89页 |
| ·微环境对紫杉醇含量的影响 | 第89-90页 |
| ·微环境内营养物质消耗和紫杉醇合成的关系 | 第90-91页 |
| ·小结 | 第91-92页 |
| 第七章 微环境对红豆杉细胞抗氧化酶活性的时空影响 | 第92-102页 |
| ·引言 | 第92页 |
| ·实验与方法 | 第92-95页 |
| ·试剂 | 第92页 |
| ·细胞株系及培养 | 第92-93页 |
| ·固定化载体的分层定义 | 第93页 |
| ·固定化细胞的释放 | 第93页 |
| ·胞内酶的提取 | 第93页 |
| ·超氧化物歧化酶（SOD）活性的测定 | 第93页 |
| ·过氧化氢酶（CAT）活性的测定 | 第93页 |
| ·过氧化物酶（POD）活性的测定 | 第93-94页 |
| ·抗坏血酸-过氧化物酶（APX）活性的测定 | 第94页 |
| ·脂氧合酶（LOX）活性的测定 | 第94页 |
| ·MDA 含量的测定 | 第94页 |
| ·多酚氧化酶（PPO）活性的测定 | 第94页 |
| ·PAL 活性的测定 | 第94页 |
| ·实验设计 | 第94-95页 |
| ·结果与讨论 | 第95-101页 |
| ·微环境对超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响 | 第95页 |
| ·微环境对过氧化氢酶（CAT）活性的效应 | 第95-96页 |
| ·微环境对过氧化物酶（POD）活性的影响 | 第96-97页 |
| ·微环境对抗坏血酸-过氧化物酶（APX）活性的影响 | 第97页 |
| ·微环境对脂氧合酶（LOX）活性的影响 | 第97-98页 |
| ·微环境对细胞MDA 含量的影响 | 第98-99页 |
| ·微环境对多酚氧化酶（PPO）活性的效应 | 第99-100页 |
| ·微环境对细胞PAL活性的效应 | 第100-101页 |
| ·小结 | 第101-102页 |
| 第八章 结论与展望 | 第102-104页 |
| ·结论 | 第102-103页 |
| ·展望 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-115页 |
| 发表论文和参加科研情况 | 第115-116页 |
| 缩写词与符号表 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
