| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-20页 |
| ·甲壳动物的渗透压调节 | 第13-15页 |
| ·渗透调节的主要器官和部位 | 第13-14页 |
| ·鳃 | 第13页 |
| ·触角腺和小颚腺 | 第13-14页 |
| ·相关的基因 | 第14-15页 |
| ·ATPase 基因 | 第14页 |
| ·热休克蛋白(HSPs) | 第14页 |
| ·碱性磷酸酶(ALP) | 第14页 |
| ·碳酸酐酶(CA) | 第14-15页 |
| ·LvCHH-ITP 基因 | 第15页 |
| ·14-3-3 基因 | 第15页 |
| ·cDNA 文库 | 第15-17页 |
| ·cDNA 文库简介 | 第15-17页 |
| ·经典cDNA 文库 | 第15-16页 |
| ·经典cDNA 文库构建的基本原理 | 第15-16页 |
| ·经典cDNA 文库构建的流程 | 第16页 |
| ·SMART cDNA 文库 | 第16页 |
| ·SMART cDNA 文库构建的基本原理 | 第16页 |
| ·SMART cDNA 文库构建的流程 | 第16页 |
| ·SMART cDNA 文库的优点 | 第16-17页 |
| ·cDNA 文库的应用 | 第17页 |
| ·基因芯片技术及应用 | 第17-18页 |
| ·基因芯片的原理 | 第17页 |
| ·基因芯片的应用 | 第17-18页 |
| ·定量PCR 技术及应用 | 第18页 |
| ·定量PCR 的原理 | 第18页 |
| ·定量 PCR 的应用 | 第18页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第18-20页 |
| 第二章 三疣梭子蟹鳃cDNA 文库的构建及序列分析 | 第20-38页 |
| ·材料方法 | 第20-24页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·仪器与试剂 | 第20页 |
| ·仪器 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-24页 |
| ·RNA 提取与检测 | 第20-21页 |
| ·cDNA 文库构建 | 第21-24页 |
| ·cDNA 第一链合成 | 第21-22页 |
| ·LD PCR 扩增cDNA | 第22页 |
| ·蛋白酶K 与限制性内切酶SfiⅠ消化 | 第22-23页 |
| ·cDNA 的分级分离 | 第23页 |
| ·将cDNA 克隆到pBluescript II SK (+)载体上 | 第23页 |
| ·重组质粒的转化 | 第23-24页 |
| ·测序 | 第24页 |
| ·数据分析与注释 | 第24页 |
| ·结果与讨论 | 第24-38页 |
| ·EST 的获得 | 第24-25页 |
| ·聚类分析 | 第25-26页 |
| ·功能注释与ESTs 分类 | 第26-29页 |
| ·与盐度调控相关的候选基因 | 第29-38页 |
| ·抗氧化活性 | 第30页 |
| ·转运蛋白 | 第30页 |
| ·胁迫相关蛋白 | 第30页 |
| ·信号转导和蛋白合成 | 第30页 |
| ·新陈代谢和能量代谢 | 第30-38页 |
| 第三章 基因芯片杂交 | 第38-47页 |
| ·材料与方法 | 第38-41页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·仪器与试剂 | 第38页 |
| ·仪器 | 第38页 |
| ·试剂 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-41页 |
| ·cDNA 芯片样品的制备 | 第38-39页 |
| ·PCR 扩增目的片断 | 第39页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第39页 |
| ·PCR 产物的溶解和保存 | 第39页 |
| ·杂交样本的制备 | 第39-40页 |
| ·RNA 的提取 | 第39-40页 |
| ·对样品 RNA 进行荧光标记 | 第40页 |
| ·杂交与清洗 | 第40-41页 |
| ·实验结果 | 第41-47页 |
| ·基因电泳档案 | 第41-43页 |
| ·基因芯片扫描结果 | 第43-44页 |
| ·芯片杂交结果聚类分析 | 第44-45页 |
| ·芯片数据分析结果 | 第45-47页 |
| 第四章 荧光定量 PCR 检测 | 第47-54页 |
| ·材料与方法 | 第47-49页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·仪器与试剂 | 第47页 |
| ·仪器 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-49页 |
| ·模板的准备 | 第47-48页 |
| ·总RNA 的提取 | 第47-48页 |
| ·cDNA 模板的制备 | 第48页 |
| ·定量PCR 反应系统的建立 | 第48-49页 |
| ·内参基因的筛选 | 第48页 |
| ·反应条件的摸索 | 第48页 |
| ·定量PCR 分析 | 第48-49页 |
| ·结果与讨论 | 第49-54页 |
| 第五章 结论与展望 | 第54-56页 |
| ·主要结论 | 第54-55页 |
| ·cDNA 文库的构建 | 第54页 |
| ·序列分析 | 第54页 |
| ·cDNA 芯片制备 | 第54页 |
| ·基因芯片杂交与盐度调控基因的筛选 | 第54-55页 |
| ·荧光定量RT-PCR 验证 | 第55页 |
| ·展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 附录 | 第60-61页 |
| 攻读硕士研究生期间科研成果 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |