| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 文献综述 | 第13-35页 |
| 第一节 禽呼肠孤病毒研究进展 | 第13-21页 |
| 1、概况 | 第13-14页 |
| 2、ARV的基因组与编码蛋白 | 第14-18页 |
| ·基因组和蛋白 | 第14页 |
| ·S1基因及其编码的蛋白 | 第14-16页 |
| ·S2基因编码的σ2蛋白 | 第16页 |
| ·S3基因编码的σ1蛋白 | 第16-17页 |
| ·S4基因编码的σNS蛋白 | 第17页 |
| ·M3基因编码的μNS蛋白 | 第17-18页 |
| ·M2基因编码的μ2蛋白 | 第18页 |
| ·L3基因编码的λ3蛋白 | 第18页 |
| 3 诊断 | 第18-21页 |
| ·放射性标记的cDNA探针 | 第19页 |
| ·地高辛标记的cDNA探针 | 第19页 |
| ·反转录—聚合酶链反应(RT-PCR) | 第19-20页 |
| ·ARV的鉴别诊断 | 第20-21页 |
| 第二节 大肠杆菌表达外源基因的研究 | 第21-27页 |
| 1 E.coli表达系统的组成 | 第21-23页 |
| ·E.coli表达载体 | 第21-23页 |
| ·宿主菌 | 第23页 |
| ·外源基因 | 第23页 |
| 2.E.coli高效表达天然蛋白策略 | 第23-27页 |
| ·与分子伴侣、折叠酶共表达 | 第23-24页 |
| ·融合表达 | 第24页 |
| ·处理包涵体 | 第24-25页 |
| ·蛋白的纯化 | 第25-26页 |
| ·通过个别氨基酸的替换防止聚集 | 第26页 |
| ·改善发酵条件 | 第26页 |
| ·优化TIR二级结果 | 第26-27页 |
| 第三节 ELISA诊断方法的概述 | 第27-30页 |
| 1、双抗夹心法检测抗原 | 第27-28页 |
| 2 双抗夹心法检测抗体 | 第28页 |
| 3.竞争法检测抗体 | 第28页 |
| 4.竞争法检测抗原 | 第28-29页 |
| 5.捕获包被法测抗体 | 第29页 |
| 6.ABS-ELISA法 | 第29页 |
| 7 PCR-ELISA法 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-35页 |
| 试验研究 | 第35-58页 |
| 之一 禽呼肠孤病毒σ3基因的克隆和表达 | 第35-44页 |
| 1 材料与方法 | 第35-41页 |
| ·材料 | 第35-38页 |
| ·方法 | 第38-41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-43页 |
| ·重组质粒的克隆和鉴定 | 第41页 |
| ·重组菌的诱导表达SDS—PAGE电泳分析 | 第41-42页 |
| ·重组蛋白的特异性鉴定—Wester-blot分析 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43页 |
| 参考文献 | 第43-44页 |
| 之二 禽呼肠孤病毒间接ELISA方法的建立 | 第44-58页 |
| 1 材料与方法 | 第45-50页 |
| ·材料 | 第45-48页 |
| ·间接ELISA方法的建立 | 第48-50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-57页 |
| ·重组蛋白的制备及纯化 | 第50页 |
| ·纯化复性后重组蛋白浓度与纯度的测定 | 第50-51页 |
| ·重组蛋白最适包被浓度与血清稀释的确定 | 第51页 |
| ·阴阳性血清反应时间的确定 | 第51-52页 |
| ·酶标二抗的作用时间 | 第52-53页 |
| ·底物显色时间的确定 | 第53页 |
| ·间接ELISA方法阴阳临界值的确定 | 第53-54页 |
| ·间接ELISA方法的特异性试验 | 第54-55页 |
| ·临床样本的检测 | 第55-57页 |
| 3 讨论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
| 个人简历 | 第60页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第60页 |