摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
1 前言 | 第9-19页 |
·课题的提出 | 第9-10页 |
·前人研究工作 | 第10-17页 |
·AsA在植物体内的生理功能 | 第10-11页 |
·AsA在植物体的抗氧化系统中起着重要的作用 | 第10页 |
·AsA在光合作用和光保护中起重要作用 | 第10页 |
·AsA在细胞壁代谢和细胞膨大中的作用 | 第10-11页 |
·AsA对细胞分裂的影响 | 第11页 |
·高等植物中AsA的合成 | 第11-12页 |
·AsA在植物细胞内的代谢 | 第12-14页 |
·植物细胞内AsA的运输 | 第12-13页 |
·AsA在植物体内的氧化还原过程 | 第13-14页 |
·植物体内户AsA的分解 | 第14页 |
·植物AsA氧化代谢关键酶的研究进展 | 第14-16页 |
·APX的研究 | 第14-15页 |
·AAO的研究 | 第15-16页 |
·RNAi研究进展 | 第16-17页 |
·RNAi的发现和命名 | 第16页 |
·RNAi的特征和可能的作用机制 | 第16-17页 |
·RNAi在作物遗传改良上的应用 | 第17页 |
·本研究的目的及内容 | 第17-19页 |
2 材料与方法 | 第19-24页 |
·实验材料 | 第19页 |
·植物材料 | 第19页 |
·细菌材料 | 第19页 |
·部分试剂来源 | 第19页 |
·候选基因片段的克隆和RNAi研究载体的构建 | 第19-21页 |
·番茄的遗传转化 | 第21页 |
·转基因番茄植株的分子检测 | 第21-23页 |
·T_0代转化植株的检测分析 | 第21-23页 |
·番茄转化再生植株的PCR检测 | 第21-22页 |
·T_0代转基因植株的Southern杂交检测 | 第22-23页 |
·T_1代转基因植株的检测分析 | 第23页 |
·转基因番茄植株的生理生化指标检测 | 第23-24页 |
·转基因植株抗坏血酸含量的测定 | 第23页 |
·转基因植株酶活性的测定 | 第23-24页 |
3 结果与分析 | 第24-34页 |
·目的基因的候选 | 第24页 |
·RNAi载体的获得 | 第24-25页 |
·转基因番茄植株的获得 | 第25-26页 |
·转基因番茄植株的分子鉴定 | 第26-29页 |
·转基因番茄植株的PCR分析 | 第26-27页 |
·转基因番茄植株的Southern杂交分析 | 第27-29页 |
·转基因植株后代的遗传分析 | 第29-30页 |
·转基因植株后代的生理分析 | 第30-34页 |
·转基因番茄植株后代酶活性的分析 | 第30-32页 |
·转基因番茄植株后代抗坏血酸含量的分析 | 第32-34页 |
4 讨论 | 第34-38页 |
·同源序列克隆 | 第34页 |
·AsA调控及策略 | 第34-35页 |
·遗传转化上的难题 | 第35-36页 |
·转基因植物遗传现象的初步探讨 | 第36-37页 |
·不足及展望 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-45页 |
附录 | 第45-51页 |
附录一: TriTom 一步法提取植物总RNA方法 | 第45-46页 |
附录二: 反转录程序 | 第46页 |
附录三: 质粒的小量提取方法 | 第46页 |
附录四: 植物DNA的小量法提取程序 | 第46-47页 |
附录五: Southern Blotting程序 | 第47-50页 |
附录六: 质粒图 | 第50-51页 |
致谢 | 第51页 |