第一部分 前言 | 第1-17页 |
1 猪线粒体解耦联蛋白基因研究进展 | 第10-15页 |
1.1 UCP家族的蛋白质结构和基因结构 | 第10-11页 |
1.2 UCP基因的生物学功能 | 第11-14页 |
1.2.1 介导适应性产热 | 第11-12页 |
1.2.2 调节脂肪酸的氧化分解 | 第12页 |
1.2.3UCP控制ROS的产生 | 第12-13页 |
1.2.4 UCP基因与肥胖 | 第13-14页 |
1.3 UCP基因多态性研究 | 第14-15页 |
1.3.1 UCP1基因多态性研究 | 第14页 |
1.3.2 UCP2基因多态性研究 | 第14页 |
1.3.3 UCP3基因多态性研究 | 第14-15页 |
2 研究目的和意义 | 第15-17页 |
第二部分 技术路线和实验方法优化 | 第17-25页 |
1 目标DNA片段的序列情况介绍 | 第17页 |
2 进行SNP基因分型的限制性内切酶的查找 | 第17-18页 |
3 引物设计方式 | 第18页 |
4 各位点基因型命名 | 第18-19页 |
4.1 23bp处SNP的错配PCR分型 | 第18页 |
4.2 207bp处Taq Ⅰ酶切基因型 | 第18-19页 |
4.3 428bp处Eco88 Ⅰ酶切基因型 | 第19页 |
4.4 430bp处Bsh1236 Ⅰ酶切基因型 | 第19页 |
5 提高错配PCR对SNP基因分型准确性的方法探索 | 第19-23页 |
6 技术路线 | 第23-25页 |
第三部分 材料与方法 | 第25-30页 |
1 材料 | 第25-27页 |
1.1 试验用猪及耳样 | 第25页 |
1.2 主要仪器和设备 | 第25页 |
1.3 主要药品和试剂 | 第25-26页 |
1.4 试剂配制 | 第26页 |
1.5 PCR扩增引物 | 第26-27页 |
2 实验方法 | 第27-30页 |
2.1 猪基因组DNA的提取 | 第27页 |
2.2 基因组DNA的浓度测定和质量检测 | 第27页 |
2.3 错配PCR扩增 | 第27页 |
2.4 引物F_A和R扩增 | 第27-28页 |
2.5 PCR产物检测 | 第28页 |
2.6 扩增产物的酶切 | 第28页 |
2.7 琼脂糖凝胶凝胶电泳 | 第28页 |
2.8 基因型分析 | 第28-29页 |
2.9 统计分析方法 | 第29-30页 |
第四部分 结果与分析 | 第30-44页 |
1 基因多态性及基因型频率与基因频率 | 第30-36页 |
1.1 23bp处SNP基因多态性及基因型频率与基因频率 | 第30-31页 |
1.1.1 错配PCR对23bp处SNP基因型的检测 | 第30-31页 |
1.1.2 各群体基因型分布与基因频率 | 第31页 |
1.2 207bp处Taq Ⅰ酶切多态性及基因型频率与基因频率 | 第31-33页 |
1.2.1 Taq Ⅰ的酶切结果 | 第32页 |
1.2.2 各群体基因型分布与基因频率 | 第32-33页 |
1.3 428bp处Eco88 Ⅰ酶切多态性及基因型频率与基因频率 | 第33-34页 |
1.3.1 Eco88 Ⅰ的酶切结果 | 第33-34页 |
1.3.2 各群体基因型分布与基因频率 | 第34页 |
1.4 430bp处Bsh1236 Ⅰ酶切多态性及基因型频率与基因频率 | 第34-36页 |
1.4.1 Bsh1236 Ⅰ的酶切结果 | 第35页 |
1.4.2 各群体基因型分布与基因频率 | 第35-36页 |
2 各基因型对杜洛克、长白、大白猪生长性状的影响 | 第36-44页 |
2.1 23bp处SNP的各基因型对杜洛克、大白猪生长性状的影响 | 第36-37页 |
2.2 Taq Ⅰ酶切多态性对长白和大白猪生长性状的影响 | 第37-38页 |
2.3 Eco88 Ⅰ酶切多态性对杜洛克、长白、大白猪生长性状的影响 | 第38-40页 |
2.4 Bsh1236 Ⅰ酶切多态性对长白、杜洛克、大白猪生长性状的影响 | 第40-41页 |
2.5 Eco88 Ⅰ和Bsh1236 Ⅰ合并基因型对杜洛克、大白猪生长性状的影响 | 第41-44页 |
第五部分 讨论 | 第44-53页 |
1 关于错配PCR方法的改进及技术路线的优化 | 第44-47页 |
1.1 关于错配PCR方法的改进 | 第44-46页 |
1.2 关于技术路线的优化 | 第46-47页 |
2 关于各变异位点基因型频率与基因频率 | 第47-48页 |
3 关于UCP3基因各变异位点与经济性状的关系 | 第48-51页 |
3.1 23bp处SNP和Taq Ⅰ酶切多态性与经济性状的关系 | 第48-49页 |
3.2 Eco88 Ⅰ和Bsh1236 Ⅰ酶切多态性与经济性状的关系 | 第49-50页 |
3.3 Eco88 Ⅰ和Bsh1236 Ⅰ合并基因型与经济性状的关系 | 第50-51页 |
4 关于UCP3基因用于标记辅助选择的可行性 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简历 | 第59页 |