摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-23页 |
·油菜抗病基因工程研究进展 | 第9-13页 |
·油菜抗菌核病基因工程研究 | 第9-11页 |
·油菜抗黑胫病基因工程研究 | 第11-12页 |
·油菜抗病毒病基因工程研究 | 第12-13页 |
·抗微生物肽Magainin及其衍生物MSI-99 | 第13-15页 |
·Magainins类抗菌肽及其作用机制 | 第13页 |
·抗菌肽Magainins与其类似物MSI-99 | 第13-15页 |
·植物遗传转化方法 | 第15-22页 |
·农杆菌介导法 | 第15-17页 |
·基因枪法 | 第17-18页 |
·农杆菌介导法与基因枪轰击法结合 | 第18-19页 |
·化学药剂诱导转化 | 第19页 |
·花粉管通道法 | 第19-20页 |
·脂质体转化法 | 第20页 |
·电击法 | 第20-21页 |
·激光微束法 | 第21页 |
·显微注射法 | 第21-22页 |
·研究目的与意义 | 第22-23页 |
第二章 材料与方法 | 第23-37页 |
·材料 | 第23-24页 |
·植物材料 | 第23页 |
·菌种与质粒 | 第23-24页 |
·培养基 | 第24页 |
·主要生化试剂 | 第24页 |
·试验方法 | 第24-37页 |
·质粒pBIN一MSI99的转化、扩增提取与酶切检测. | 第24-26页 |
·油菜再生体系的筛选 | 第26-28页 |
·Kan(卡那霉素)对芽再生的选择压力的确定 | 第28-29页 |
·Carb(羧苄青霉素)对芽再生的影响 | 第29-30页 |
·农杆菌介导油菜的转化及转化体的筛选 | 第30-32页 |
·转MSI-99基因油菜的分子生物学鉴定 | 第32-37页 |
第三章 结果与分析 | 第37-49页 |
·油菜再生体系的筛选 | 第37-39页 |
·种子萌发培养基及无菌苗培养条件 | 第37页 |
·不同生长调节剂对子叶柄芽分化的影响 | 第37-38页 |
·不同生长调节剂对下胚轴芽分化的影响 | 第38-39页 |
·油菜转化体系中抗生素浓度的优化试验 | 第39-42页 |
·子叶柄外植体芽再生过程中Kan浓度确定 | 第39-40页 |
·下胚轴外植体芽再生过程中Kan浓度确定 | 第40-41页 |
·Carb对子叶柄外植体芽再生的影响 | 第41页 |
·Carb对下胚轴外植体芽再生的影响 | 第41-42页 |
·外植体的转化与植株再生 | 第42-47页 |
·细菌转化与质粒检测 | 第42页 |
·菌液浓度与浸染时间 | 第42-43页 |
·预培养及共培养条件 | 第43页 |
·Kan抗性植株的获得 | 第43-47页 |
·再生植株MSI-99基因的PCR检测 | 第47页 |
·PCR阳性植株的Southern blot分析 | 第47-48页 |
·转基因植株的移栽 | 第48-49页 |
第四章 讨论 | 第49-55页 |
·AgNO_3对芽分化的影响 | 第49页 |
·激素组合对芽再生影响 | 第49-50页 |
·受体类型对芽再生影响 | 第50-51页 |
·子叶柄外植体 | 第50-51页 |
·下胚轴外植体 | 第51页 |
·外植体生理状态对芽再生的影响 | 第51-52页 |
·苗龄 | 第51页 |
·外植体预培养 | 第51-52页 |
·农杆菌与外植体的共培养 | 第52页 |
·褐化和玻璃苗现象 | 第52-53页 |
·筛选标记对芽再生的影响 | 第53-54页 |
·转基因植株与转化率 | 第54-55页 |
全文结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
附录Ⅰ:培养基基本成分 | 第61-63页 |
附录Ⅱ:试剂 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |