中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-12页 |
引言 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-26页 |
1 草莓病毒病研究进展 | 第13-20页 |
·草莓主要病毒的主要特性 | 第13-17页 |
·草莓斑驳病毒 | 第13-14页 |
·草莓镶脉病毒 | 第14-15页 |
·草莓皱缩病毒 | 第15-16页 |
·草莓潜环斑病毒 | 第16页 |
·草莓轻型黄边伴随病毒 | 第16页 |
·草莓轻型黄边病毒 | 第16-17页 |
·草莓病毒检测技术 | 第17-18页 |
·指示植物小叶嫁接法 | 第17-18页 |
·血清学检测 | 第18页 |
·分子生物学检测 | 第18页 |
·草莓病毒病的控制方法 | 第18-19页 |
·培育无病毒苗木 | 第18页 |
·选育抗性草莓品种 | 第18-19页 |
·应用转基因技术获得抗病毒植株 | 第19页 |
·草莓镶脉病毒(SVBV)的基因组结构 | 第19-20页 |
2 草莓叶片再生研究进展 | 第20-22页 |
·草莓基因型 | 第20页 |
·培养基及其附加成分对不定芽再生的影响 | 第20-21页 |
·基本培养基 | 第20-21页 |
·激素 | 第21页 |
·外植体类型 | 第21页 |
·AgNO_3、KNO_3及CH、LH等附加物 | 第21页 |
·外界环境条件 | 第21-22页 |
3 草莓遗传转化研究进展 | 第22-26页 |
·农杆菌介导的草莓遗传转化研究概述 | 第22-24页 |
·草莓遗传转化所涉及的基因 | 第24页 |
·影响转化率的主要因素 | 第24-25页 |
·再生系统 | 第24-25页 |
·农杆菌的侵染 | 第25页 |
·外植体的脱菌培养 | 第25页 |
·转化体的选择培养 | 第25页 |
·草莓遗传转化中存在的问题 | 第25-26页 |
·转化率低 | 第25页 |
·外源基因整合的随机性 | 第25-26页 |
第二章 草莓镶脉病毒(SVBV)CP基因的克隆 | 第26-36页 |
1 感染SVBV草莓植株的获得——SVBV的PCR检测 | 第26-27页 |
·材料 | 第26页 |
·草莓植株总DNA的提取 | 第26页 |
·PCR检测引物的设计与合成 | 第26-27页 |
·PCR扩增 | 第27页 |
·PCR法检测SVBV的灵敏度分析 | 第27页 |
2 SVBVCP基因的克隆 | 第27-31页 |
·E.coli感受态的制备 | 第27-28页 |
·PCR产物的纯化、回收 | 第28页 |
·PCR产物与载体的连接 | 第28-29页 |
·转化大肠杆菌 | 第29页 |
·重组克隆的筛选 | 第29-30页 |
·重组质粒的提取及酶切鉴定 | 第30页 |
·测序 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-33页 |
·PCR法检测的特异性分析 | 第31页 |
·PCR法检测的灵敏度分析 | 第31-32页 |
·重组质粒的提取及酶切鉴定 | 第32页 |
·基因片段序列测定 | 第32-33页 |
4 讨论 | 第33-36页 |
·PCR法应用于SVBV检测 | 第33-34页 |
·SVBVCP基因的分子变异 | 第34页 |
·关于SVBVCP基因的克隆 | 第34-36页 |
第三章 草莓叶片的离体再生 | 第36-43页 |
1 材料和方法 | 第36-37页 |
·材料 | 第36页 |
·方法 | 第36页 |
·实验处理 | 第36-37页 |
·数据调查 | 第37页 |
2 结果与分析 | 第37-40页 |
·叶片接种后的形态变化 | 第37-38页 |
·TDZ对再生不定芽的影响 | 第38-39页 |
·愈伤组织的诱导 | 第38页 |
·不定芽的再生 | 第38-39页 |
·-BA对再生不定芽的影响 | 第39-40页 |
·愈伤组织的诱导 | 第39页 |
·不定芽的再生 | 第39-40页 |
·不同基因型对愈伤组织诱导及芽再生的影响 | 第40页 |
·TDZ和6-BA对愈伤组织诱导及芽再生效果的比较 | 第40页 |
3 讨论 | 第40-43页 |
·基因型对叶片再生不定芽的影响 | 第40页 |
·激素组合对叶片再生的影响 | 第40-41页 |
·叶片直接生根不生芽现象 | 第41页 |
·褐化现象 | 第41-43页 |
第四章 草莓遗传转化体系的建立 | 第43-51页 |
1 材料与方法 | 第43-45页 |
·材料 | 第43页 |
·受体品种 | 第43页 |
·培养基 | 第43页 |
·农杆菌菌株及质粒 | 第43页 |
·方法 | 第43-45页 |
·农杆菌的培养 | 第43页 |
·抗生素敏感性试验 | 第43-44页 |
·农杆菌转化叶盘 | 第44页 |
·影响农杆菌转化效果的因素 | 第44页 |
·GUS瞬间表达检测 | 第44页 |
·转化芽的筛选、增殖及生根 | 第44页 |
·转基因植株的鉴定 | 第44-45页 |
2 结果与分析 | 第45-51页 |
·抗生素敏感性试验 | 第45-46页 |
·不同影晌因子对草莓转化的影响 | 第46-49页 |
·乙酰丁香酮(AS)对草莓转化的影晌 | 第46-47页 |
·预培养时间对转化效率的影响 | 第47-48页 |
·侵染时间对转化效率的影响 | 第48页 |
·共培养时间对草莓转化效率的影响 | 第48-49页 |
·转基因植株的获得 | 第49-50页 |
·Km抗性芽的筛选及转化植株的获得 | 第49页 |
·抗性植株的GUS染色 | 第49页 |
·转化植株的PCR检测 | 第49-50页 |
·讨论 | 第50-51页 |
第五章 结论 | 第51-56页 |
参考文献 | 第56-57页 |
附录 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简介 | 第59页 |