| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| Ⅰ 文献综述 | 第12-40页 |
| 1 植物基因工程体系的建立 | 第12-22页 |
| 1．1 目的基因的分离 | 第12-15页 |
| 1．2 目的基因的修饰 | 第15-16页 |
| 1．3 植物基因表达载体构建 | 第16-17页 |
| 1．4 植物基因工程研究中常用的工具基因 | 第17-18页 |
| 1．5 常用的水稻遗传转化方法 | 第18-22页 |
| 2 提高外源基因在转基因后代中高效稳定表达的途径 | 第22-28页 |
| 2．1 启动子的选用和改造 | 第22-23页 |
| 2．2 增强翻译效率 | 第23-24页 |
| 2．3 消除位置效应 | 第24-25页 |
| 2．4 构建叶绿体表达载体 | 第25-26页 |
| 2．5 定位信号的应用 | 第26页 |
| 2．6 内含子在增强基因表达方面的应用 | 第26-27页 |
| 2．7 多基因策略 | 第27-28页 |
| 3 植物基因工程在水稻育种中的应用 | 第28-36页 |
| 3．1 抗虫性转基因育种 | 第28-30页 |
| 3．1．1 半夏凝集素基因(PTA)研究进展 | 第29页 |
| 3．1．2 半夏凝集素基因(PTA)的结构 | 第29-30页 |
| 3．1．3 PTA作用机理 | 第30页 |
| 3．2 稻米品质改良 | 第30-34页 |
| 3．2．1 稻米蒸煮食味品质性状的分子标记 QTL定位 | 第31页 |
| 3．2．2 与淀粉合成相关的酶基因的克隆、分子特性及其表达调控的研究 | 第31-34页 |
| 3．3 抗病性转基因育种 | 第34-35页 |
| 3．3．1 抗真菌性病害转基因育种 | 第34-35页 |
| 3．3．2 抗细菌性病害转基因育种 | 第35页 |
| 3．3．3 抗病毒性病害转基因育种 | 第35页 |
| 3．3．4 抗线虫性病害转基因育种 | 第35页 |
| 3．4 抗逆性转基因育种 | 第35-36页 |
| 3．5 抗除草剂转基因育种 | 第36页 |
| 3．6 保健型转基因植物育种 | 第36页 |
| 4 水稻基因工程在应用中面临的问题及对策 | 第36-40页 |
| 4．1 转化效率低 | 第37页 |
| 4．2 转基因沉默 | 第37-38页 |
| 4．3 外源基因的低效表达 | 第38页 |
| 4．4 转基因的安全性 | 第38-40页 |
| 4．4．1 转基因植物的食品安全性 | 第38-39页 |
| 4．4．2 转基因植物的环境安全性 | 第39-40页 |
| Ⅱ 材料与方法 | 第40-52页 |
| 1 实验材料 | 第40页 |
| 1．1 受体材料 | 第40页 |
| 1．2 质粒载体 | 第40页 |
| 1．3 供试菌株 | 第40页 |
| 2 重要仪器设备 | 第40-41页 |
| 3 重要试剂与溶液 | 第41-43页 |
| 3．1 重要试剂 | 第41页 |
| 3．2 重要溶液 | 第41-43页 |
| 3．2．1 植物基因组 DNA提取液 | 第41页 |
| 3．2．2 质粒 DNA提取液 | 第41-42页 |
| 3．2．3 植物总RNA提取液 | 第42页 |
| 3．2．4 PCR扩增反应体系溶液 | 第42页 |
| 3．2．5 Southern blotting杂交试剂和溶液 | 第42页 |
| 3．2．6 电泳中用到的溶液 | 第42-43页 |
| 4 培养基配制 | 第43-44页 |
| 4．1 水稻愈伤组织培养基的配制 | 第43-44页 |
| 4．2 细菌培养基的配制 | 第44页 |
| 5 实验方法 | 第44-52页 |
| 5．1 根癌农杆菌介导的水稻转化 | 第44-45页 |
| 5．2 转化植株的分子鉴定 | 第45-50页 |
| 5．2．1 PCR检测 | 第45页 |
| 5．2．2 Southern blotting分析 | 第45-48页 |
| 5．2．3 RT-PCR分析 | 第48-50页 |
| 5．3 转基因植株 T_1代自交种的潮霉素发芽实验 | 第50页 |
| 5．4 水稻 T_1代成熟种子胚乳中直链淀粉含量的测定 | 第50-52页 |
| Ⅲ 结果与分析 | 第52-57页 |
| 1 转基因植株的获得 | 第52页 |
| 2 转基因植株的分子鉴定 | 第52-55页 |
| 2．1 PCR检测 | 第52-53页 |
| 2．2 Southern blotting分析 | 第53-54页 |
| 2．3 RT-PCR | 第54-55页 |
| 3． 转基因植株 T_1代自交种子的潮霉素抗性实验 | 第55-56页 |
| 4． 水稻 T_1代成熟种子胚乳中直链淀粉含量的测定 | 第56-57页 |
| Ⅳ 讨论 | 第57-62页 |
| 1 根癌农杆菌介导法各参数的优化 | 第57-58页 |
| 1．1 农杆菌的种类、生长状态及浓度 | 第57页 |
| 1．2 农杆菌的浸染 | 第57-58页 |
| 1．3 农杆菌与愈伤组织的共培养 | 第58页 |
| 1．4 脱菌 | 第58页 |
| 2 筛选、分化与生根 | 第58-59页 |
| 3 筛选适合的培养基及外源激素的种类，浓度，配比来提高籼稻胚性愈伤诱导率和分化率 | 第59-60页 |
| 4 外源基因在转基因植株中的表达 | 第60页 |
| 5 外源基因在转基因植株后代中的遗传 | 第60页 |
| 6． 后续研究设想 | 第60-62页 |
| Ⅴ．附图 | 第62-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 硕士期间发表的学术论文 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
