| Ⅰ 小麦-叶锈菌互作过程中激发子的分离纯化 | 第1-25页 |
| 1 引言 | 第10-12页 |
| 2 材料与方法 | 第12-16页 |
| ·材料 | 第12页 |
| ·植物材料 | 第12页 |
| ·小麦叶锈菌菌株 | 第12页 |
| ·仪器及试剂 | 第12页 |
| ·仪器 | 第12页 |
| ·试剂 | 第12页 |
| ·实验方法 | 第12-16页 |
| ·供试小麦的培育 | 第12页 |
| ·小麦叶锈菌99-5-49-4菌株的繁殖与保存 | 第12-13页 |
| ·小麦细胞间隙液(IWF)的提取 | 第13页 |
| ·IWF的分级沉淀 | 第13页 |
| ·凝胶过滤柱层析 | 第13页 |
| ·叶片注射 | 第13-14页 |
| ·苯丙氨酸解氨酶(PAL，EC.4.3.1.5)活性测定 | 第14页 |
| ·过氧化物酶(PO，EC.1.11.1.7)活性测定 | 第14页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第14页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第14-16页 |
| 3 结果与分析 | 第16-22页 |
| ·IWF的一般性质分析 | 第16页 |
| ·IWF的SDS-PAGE凝胶电泳图谱 | 第16-17页 |
| ·硫酸铵分级沉淀后IWF的活性分布 | 第17页 |
| ·IWF经凝胶过滤柱层析后活性成分的分离 | 第17-22页 |
| ·IWF_(Tha)的凝胶过滤柱层析分离图谱及其活性分析 | 第17-19页 |
| ·IWF_(19)的凝胶过滤柱层析分离图谱及其活性分析 | 第19-20页 |
| ·两种不同亲和性来源的IWF经凝胶过滤后各部分对PAL、PO诱导的差异比较 | 第20-22页 |
| 4 讨论 | 第22-24页 |
| ·IWF提取方法的可行性 | 第22-23页 |
| ·不同亲和性来源的IWF经凝胶过滤后诱导活性的分布 | 第23页 |
| ·SDS-PAGE电泳分析 | 第23页 |
| ·下一步工作计划 | 第23-24页 |
| 5 结论 | 第24-25页 |
| Ⅱ 接种叶锈菌小麦叶片CDNA-AFLP分析 | 第25-47页 |
| 1 引言 | 第25-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-36页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·植物材料及菌株 | 第27页 |
| ·试剂 | 第27页 |
| ·引物和接头序列 | 第27-28页 |
| ·所需主要仪器 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-36页 |
| ·小麦材料和菌种繁育及接菌 | 第28-29页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·RNA提取及检测 | 第29-30页 |
| ·RNA纯化 | 第30页 |
| ·逆转录 | 第30-31页 |
| ·合成双链cDNA | 第31-32页 |
| ·双链cDNA的纯化 | 第32页 |
| ·cDNA的酶切、连接反应 | 第32-33页 |
| ·酶切、连接产物的预扩增 | 第33页 |
| ·预扩增产物的选择性扩增 | 第33-34页 |
| ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染 | 第34-35页 |
| ·差异条带回收及再扩增 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-42页 |
| ·试验所用小麦材料的抗叶锈性鉴定 | 第36页 |
| ·2种不同RNA提取试剂盒提取RNA结果的比较 | 第36-37页 |
| ·小麦叶片总RNA的2种反转录体系的比较 | 第37页 |
| ·小麦叶片双链cDNA的合成 | 第37-38页 |
| ·小麦叶片cDNA的酶切、连接、预扩增 | 第38页 |
| ·小麦叶片cDNA的选择性扩增 | 第38-40页 |
| ·cDNA差异条带分析 | 第40-41页 |
| ·差异条带回收及扩增 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-46页 |
| ·关于小麦叶片RNA的提取 | 第42页 |
| ·cDNA-AFLP分析小麦-叶锈菌互作体系的基因表达变化 | 第42-43页 |
| ·cDNA-AFLP试验体系中应注意的问题 | 第43-44页 |
| ·关于cDNA-AFLP方法在分离抗病基因中的应用前景 | 第44-45页 |
| ·下一步工作 | 第45-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 附录A | 第52-53页 |
| 附录B | 第53-57页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第57-65页 |
| 作者简历 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
