| 第一章 引言 | 第1-31页 |
| 第一节 WSSV的生物学特征及其分子生物学研究状况 | 第9-14页 |
| 1 白斑综合症病毒的宿主及传播途径 | 第9页 |
| 2 白斑综合症病毒病的病症及病理学 | 第9-10页 |
| 3 WSSV的生物学特征 | 第10页 |
| 4 WSSV的主要结构蛋白 | 第10-11页 |
| 参考文献 | 第11-14页 |
| 第二节 动物病毒受体阻断剂的研究现状 | 第14-29页 |
| 1 病毒-细胞受体相互作用的机制 | 第14-15页 |
| 2 病毒受体和病毒粘附蛋白的本质 | 第15-18页 |
| ·病毒受体的本质 | 第16-17页 |
| ·病毒粘附蛋白 | 第17-18页 |
| 3 主要的病毒受体阻断剂 | 第18-24页 |
| ·多糖及其衍生物对病毒-细胞受体作用的影响 | 第18-22页 |
| ·其他 | 第22-24页 |
| 参考文献 | 第24-29页 |
| WSSV受体阻断的研究现状 | 第29页 |
| WSSV受体阻断可供选择的途径 | 第29-30页 |
| 本论文拟采取的技术路线 | 第30-31页 |
| 第二章 对虾鳃细胞膜蛋白与病毒的特异结合及表面活性剂对结合活性的影响 | 第31-55页 |
| 第一节 病毒及对虾鳃膜蛋白的纯化与标记 | 第31-43页 |
| 1 材料和方法 | 第31-35页 |
| ·人工感染螯虾实验 | 第31-32页 |
| ·病毒纯化 | 第32页 |
| ·Broadford法对病毒蛋白定量 | 第32-33页 |
| ·病毒地高辛标记 | 第33页 |
| ·标记结果的验证 | 第33-34页 |
| ·病毒蛋白的SDS-PAGE多肽分析 | 第34页 |
| ·虾鳃膜蛋白的提取 | 第34-35页 |
| ·虾鳃膜蛋白的蛋白定量及地高辛标记 | 第35页 |
| ·鳃膜蛋白的SDS-PAGE带型分析 | 第35页 |
| 2 结果 | 第35-39页 |
| ·病毒的纯化 | 第35-36页 |
| ·病毒的蛋白定量 | 第36页 |
| ·病毒的标记结果验证 | 第36-37页 |
| ·病毒蛋白的SDS-PAGE多肽分析 | 第37页 |
| ·虾鳃膜蛋白的提取 | 第37-38页 |
| ·虾鳃膜蛋白的蛋白定量 | 第38页 |
| ·鳃膜蛋白的SDS-PAGE带型分析 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 本节使用的试剂与缓冲液配置方法 | 第41-43页 |
| 第二节 96孔板上虾鳃膜蛋白与病毒特异结合的量比关系及表面活性剂对结合活性的影响 | 第43-55页 |
| 1 材料和方法 | 第43-46页 |
| ·虾鳃膜蛋白 | 第43页 |
| ·病毒蛋白 | 第43页 |
| ·96孔板上鳃膜蛋白与地高辛标记的病毒蛋白特异结合的正交实验 | 第43-44页 |
| ·DIG-WSSV和虾膜蛋白结合饱和浓度的测定 | 第44页 |
| ·96孔板上病毒蛋白和地高辛标记的鳃膜蛋白特异结合正交实验 | 第44-45页 |
| ·DIG-虾膜蛋白和WSSV结合饱和浓度的测定 | 第45页 |
| ·冷冻保存的虾膜蛋白和新鲜虾膜蛋白结合活性的比较 | 第45页 |
| ·表面活性剂对结合活性的影响 | 第45-46页 |
| 2 结果 | 第46-51页 |
| ·96孔板上鳃膜蛋白与地高辛标记的WSSV特异结合的正交实验 | 第46-47页 |
| ·地高辛标记的病毒和虾膜蛋白结合饱和量 | 第47-48页 |
| ·96孔板上病毒蛋白和地高辛标记的鳃膜蛋白特异结合的正交实验 | 第48页 |
| ·DIG-虾膜蛋白与WSSV结合饱和量 | 第48-49页 |
| ·冷冻保存的虾膜蛋白和新鲜虾膜蛋白结合活性的比较 | 第49-50页 |
| ·表面活性剂对结合活性的影响 | 第50-51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
| 本文所用的溶液试剂配方 | 第54-55页 |
| 第三章 多糖H等多糖对WSSV的受体阻断研究 | 第55-69页 |
| 第一节 多糖在亚细胞水平上的WSSV受体阻断初步筛选 | 第55-63页 |
| 1 材料和方法 | 第55-57页 |
| ·病毒提纯和蛋白定量及地高辛标记 | 第55页 |
| ·虾鳃膜蛋白的提取和蛋白定量及地高辛标记 | 第55页 |
| ·多糖H对鳃膜蛋白与病毒结合的抑制实验 | 第55-56页 |
| ·多糖P对鳃膜蛋白与病毒结合的竞争抑制实验 | 第56-57页 |
| ·多糖A对鳃膜蛋白与病毒结合的竞争抑制实验 | 第57页 |
| ·硫酸软骨素对鳃膜蛋白与病毒结合的竞争抑制实验 | 第57页 |
| ·硫酸葡聚糖对鳃膜蛋白与病毒结合的竞争抑制实验 | 第57页 |
| 2 结果 | 第57-60页 |
| ·多糖H对鳃膜蛋白与病毒结合的竞争抑制实验: | 第57-58页 |
| ·多糖P、多糖A、硫酸软骨素、硫酸葡聚糖对鳃膜蛋白与病毒结合的竞争抑制实验: | 第58-60页 |
| 3 讨论 | 第60-63页 |
| 第二节 多糖H对健康虾的感染抑制实验 | 第63-67页 |
| 1 材料和方法 | 第63-64页 |
| ·实验用虾及分组 | 第63页 |
| ·毒种的处理 | 第63页 |
| ·实验方法 | 第63页 |
| ·实验的结果检测和评估 | 第63-64页 |
| 2 结果 | 第64-66页 |
| 3 讨论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-69页 |
| 第四章 酵母表达产物对WSSV的受体阻断研究 | 第69-82页 |
| 第一节 表达产物VP281和VP292的检测及结合活性的分析 | 第69-74页 |
| 1 材料和方法 | 第69-71页 |
| ·VP37、VP39菌株的大量发酵及发酵产物的制备 | 第69-70页 |
| ·VP281、VP292酵母表达产物的SDS-PAGE检测 | 第70页 |
| ·表达产物与虾膜蛋白结合活性的分析 | 第70-71页 |
| 2 结果 | 第71-72页 |
| ·VP281、VP292酵母表达产物的SDS-PAGE检测 | 第71页 |
| ·VP281和VP292与鳃膜蛋白结合活性的分析 | 第71-72页 |
| 3 讨论 | 第72-74页 |
| 第二节 VP292、VP281及其层析柱分离纯化组分对WSSV受体阻断研究 | 第74-80页 |
| 1 材料和方法 | 第74-75页 |
| ·病毒的分离纯化及定量 | 第74页 |
| ·鳃膜蛋白的提取及标记 | 第74页 |
| ·VP281的阳离子交换层析法纯化 | 第74页 |
| ·表达产物及纯化组分的Broadford蛋白定量 | 第74页 |
| ·VP281及其层析柱分离纯化后的竞争抑制实验 | 第74-75页 |
| ·VP292酵母表达产物的竞争抑制实验 | 第75页 |
| 2 结果 | 第75-79页 |
| ·VP281的阳离子交换层析纯化SDS-PAGE检测 | 第75-76页 |
| ·表达产物及纯化组分的蛋白定量 | 第76-79页 |
| 3 讨论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-81页 |
| 本节的试剂配方 | 第81-82页 |
| 本研究工作的结论 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
