缩略语表 | 第1-10页 |
中文摘要 | 第10-15页 |
英文摘要 | 第15-22页 |
前言 | 第22-25页 |
文献回顾: 结缔组织生长因子研究进展 | 第25-42页 |
正文 | 第42-100页 |
1 PVR增生膜中CTGF和TGF-β受体Ⅱ的研究 | 第42-53页 |
·材料和方法: | 第42-47页 |
·主要试剂 | 第42-43页 |
·常用试剂的配制、储存及使用方法 | 第43-44页 |
·主要仪器 | 第44页 |
·标本来源 | 第44页 |
·免疫组织化学方法 | 第44-45页 |
·免疫荧光双标记: | 第45页 |
·原位杂交染色 | 第45-46页 |
·苏木素-伊红染色(HE染色) | 第46-47页 |
·结果判定及统计学分析 | 第47页 |
·结果 | 第47-49页 |
·组织病理学检查 | 第47页 |
·免疫组化 | 第47-48页 |
·原位杂交 | 第48页 |
·免疫荧光双标记 | 第48-49页 |
·讨论 | 第49-53页 |
·PVR增生膜的病理学研究 | 第49-50页 |
·PVR增生膜CTGF的表达 | 第50页 |
·PVR增生膜TGF-βRⅡ的表达 | 第50-51页 |
·PVR增生膜CTGF与TGF-βRⅡ、ECM的相关性 | 第51-53页 |
2 CTGF在培养人RPE细胞及其体外创伤模型中的表达及细胞因子的调控 | 第53-70页 |
·材料和方法: | 第53-62页 |
·主要试剂、缓冲液及仪器设备 | 第53-56页 |
·RPE细胞培养及冻存、复苏 | 第56-57页 |
·RPE细胞的鉴定 | 第57-58页 |
·免疫荧光染色测定RPE细胞CTGF表达 | 第58页 |
·RT-PCR检测CTGFmRNA表达及调控 | 第58-60页 |
·体外RPE细胞创伤模型原位杂交染色 | 第60页 |
·Western blot分析 | 第60-62页 |
·结果 | 第62-66页 |
·培养人原代RPE细胞的生长及鉴定 | 第62页 |
·复苏及传代RPE细胞的生长状态 | 第62-63页 |
·培养人RPE细胞CTGF的表达及细胞因子的调控 | 第63-65页 |
·免疫荧光染色结果 | 第63页 |
·RT-PCR结果 | 第63-64页 |
·Western blot结果 | 第64-65页 |
·体外RPE细胞创伤模型CTGF的表达 | 第65-66页 |
·Western blot结果 | 第65-66页 |
·原位杂交结果 | 第66页 |
·讨论 | 第66-70页 |
·培养人RPE细胞表达CTGF | 第66页 |
·CTGF的表达调控及信号传导机制 | 第66-68页 |
·创伤模型CTGF的表达 | 第68-70页 |
3 CTGF调节RPE细胞移行、粘附、增生和细胞内游离钙离子水平的研究 | 第70-87页 |
·材料和方法 | 第70-75页 |
·主要试剂 | 第70-71页 |
·主要试剂配制 | 第71页 |
·主要仪器和用品 | 第71-72页 |
·方法 | 第72-75页 |
·RPE细胞移行试验 | 第72页 |
·RPE细胞粘附试验 | 第72-73页 |
·四唑盐(MTT)比色试验 | 第73页 |
·流式细胞术(FCM)测定细胞增生周期 | 第73-74页 |
·CTGF对RPE细胞内游离Ca~(2+)水平的调节 | 第74-75页 |
·统计学处理 | 第75页 |
·结果 | 第75-81页 |
·RPE细胞移行 | 第75-77页 |
·CTGF对RPE细胞粘附的影响 | 第77页 |
·CTGF对RPE细胞增生的影响 | 第77-80页 |
·CTGF调节RPE细胞内[Ca~(2+)]i | 第80-81页 |
·讨论 | 第81-87页 |
·CTGF对RPE细胞移行和增生的影响 | 第81-83页 |
·CTGF对RPE细胞粘附的影响 | 第83-84页 |
·细胞内Ca~(2+)概述 | 第84-85页 |
·细胞内Ca~(2+)分析 | 第85页 |
·CTGF与Ca~(2+)信号通路 | 第85-87页 |
4 CTGF调节RPE细胞合成胞外基质 | 第87-100页 |
·材料和方法 | 第87-92页 |
·主要试剂 | 第87-88页 |
·主要仪器 | 第88页 |
·主要溶液配制 | 第88-89页 |
·脂质体-ODN转染细胞: | 第89页 |
·~3H-脯氨酸掺入实验测定RPE细胞合成胶原蛋白 | 第89-90页 |
·RT-PCR分析CTGF调节RPE细胞合成ECM | 第90-92页 |
·结果 | 第92-95页 |
·rhCTGF和8-Br-cAMP对RPE细胞~3H-脯氨酸掺入值的影响 | 第92页 |
·CTGF反义寡核苷酸对TGF-β1诱导的~3H-脯氨酸掺入值的影响 | 第92-93页 |
·RT-PCR分析CTGF调节RPE细胞FN、Ⅲ型胶原及MMP-2、TIMP-2mRNA的表达 | 第93-95页 |
·转染CTGF反义寡核苷酸对TGF-β1调节FN、Ⅲ型胶原mRNA的影响 | 第95页 |
·讨论 | 第95-100页 |
·PVR中ECM的产生和CTGF对RPE细胞合成ECM的调节 | 第95-97页 |
·MMPs和TIMPs的调节及在玻璃体视网膜疾病中的作用 | 第97-100页 |
小结 | 第100-101页 |
附图 | 第101-112页 |
参考文献 | 第112-128页 |
个人简历 | 第128-129页 |
攻读学位期间研究成果 | 第129-130页 |
致谢 | 第130页 |