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CTGF在增生性玻璃体视网膜病变及视网膜色素上皮细胞中的作用

缩略语表第1-10页
中文摘要第10-15页
英文摘要第15-22页
前言第22-25页
文献回顾: 结缔组织生长因子研究进展第25-42页
正文第42-100页
 1 PVR增生膜中CTGF和TGF-β受体Ⅱ的研究第42-53页
   ·材料和方法:第42-47页
     ·主要试剂第42-43页
     ·常用试剂的配制、储存及使用方法第43-44页
     ·主要仪器第44页
     ·标本来源第44页
     ·免疫组织化学方法第44-45页
     ·免疫荧光双标记:第45页
     ·原位杂交染色第45-46页
     ·苏木素-伊红染色(HE染色)第46-47页
     ·结果判定及统计学分析第47页
   ·结果第47-49页
     ·组织病理学检查第47页
     ·免疫组化第47-48页
     ·原位杂交第48页
     ·免疫荧光双标记第48-49页
   ·讨论第49-53页
     ·PVR增生膜的病理学研究第49-50页
     ·PVR增生膜CTGF的表达第50页
     ·PVR增生膜TGF-βRⅡ的表达第50-51页
     ·PVR增生膜CTGF与TGF-βRⅡ、ECM的相关性第51-53页
 2 CTGF在培养人RPE细胞及其体外创伤模型中的表达及细胞因子的调控第53-70页
   ·材料和方法:第53-62页
     ·主要试剂、缓冲液及仪器设备第53-56页
     ·RPE细胞培养及冻存、复苏第56-57页
     ·RPE细胞的鉴定第57-58页
     ·免疫荧光染色测定RPE细胞CTGF表达第58页
     ·RT-PCR检测CTGFmRNA表达及调控第58-60页
     ·体外RPE细胞创伤模型原位杂交染色第60页
     ·Western blot分析第60-62页
   ·结果第62-66页
     ·培养人原代RPE细胞的生长及鉴定第62页
     ·复苏及传代RPE细胞的生长状态第62-63页
     ·培养人RPE细胞CTGF的表达及细胞因子的调控第63-65页
       ·免疫荧光染色结果第63页
       ·RT-PCR结果第63-64页
       ·Western blot结果第64-65页
     ·体外RPE细胞创伤模型CTGF的表达第65-66页
       ·Western blot结果第65-66页
       ·原位杂交结果第66页
   ·讨论第66-70页
     ·培养人RPE细胞表达CTGF第66页
     ·CTGF的表达调控及信号传导机制第66-68页
     ·创伤模型CTGF的表达第68-70页
 3 CTGF调节RPE细胞移行、粘附、增生和细胞内游离钙离子水平的研究第70-87页
   ·材料和方法第70-75页
     ·主要试剂第70-71页
     ·主要试剂配制第71页
     ·主要仪器和用品第71-72页
     ·方法第72-75页
       ·RPE细胞移行试验第72页
       ·RPE细胞粘附试验第72-73页
       ·四唑盐(MTT)比色试验第73页
       ·流式细胞术(FCM)测定细胞增生周期第73-74页
       ·CTGF对RPE细胞内游离Ca~(2+)水平的调节第74-75页
     ·统计学处理第75页
   ·结果第75-81页
     ·RPE细胞移行第75-77页
     ·CTGF对RPE细胞粘附的影响第77页
     ·CTGF对RPE细胞增生的影响第77-80页
     ·CTGF调节RPE细胞内[Ca~(2+)]i第80-81页
   ·讨论第81-87页
     ·CTGF对RPE细胞移行和增生的影响第81-83页
     ·CTGF对RPE细胞粘附的影响第83-84页
     ·细胞内Ca~(2+)概述第84-85页
     ·细胞内Ca~(2+)分析第85页
     ·CTGF与Ca~(2+)信号通路第85-87页
 4 CTGF调节RPE细胞合成胞外基质第87-100页
   ·材料和方法第87-92页
     ·主要试剂第87-88页
     ·主要仪器第88页
     ·主要溶液配制第88-89页
     ·脂质体-ODN转染细胞:第89页
     ·~3H-脯氨酸掺入实验测定RPE细胞合成胶原蛋白第89-90页
     ·RT-PCR分析CTGF调节RPE细胞合成ECM第90-92页
   ·结果第92-95页
     ·rhCTGF和8-Br-cAMP对RPE细胞~3H-脯氨酸掺入值的影响第92页
     ·CTGF反义寡核苷酸对TGF-β1诱导的~3H-脯氨酸掺入值的影响第92-93页
     ·RT-PCR分析CTGF调节RPE细胞FN、Ⅲ型胶原及MMP-2、TIMP-2mRNA的表达第93-95页
     ·转染CTGF反义寡核苷酸对TGF-β1调节FN、Ⅲ型胶原mRNA的影响第95页
   ·讨论第95-100页
     ·PVR中ECM的产生和CTGF对RPE细胞合成ECM的调节第95-97页
     ·MMPs和TIMPs的调节及在玻璃体视网膜疾病中的作用第97-100页
小结第100-101页
附图第101-112页
参考文献第112-128页
个人简历第128-129页
攻读学位期间研究成果第129-130页
致谢第130页

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