根癌农杆菌介导的菊花遗传转化体系的建立及ipt基因的导入
| 中英文摘要 | 第1-8页 |
| 一． 文献综述 | 第8-18页 |
| 1．1 植物遗传转化研究概况 | 第8-13页 |
| 1．1．1 载体介导转化法 | 第8-11页 |
| 1．1．1．1 根癌农杆菌介导的遗传转化 | 第8-10页 |
| 1．1．1．1．1 Ti质粒的结构及改造 | 第9页 |
| 1．1．1．1．2 T-DNA整合机理 | 第9-10页 |
| 1．1．1．2 发根农杆菌Ri质粒介导的遗传转化 | 第10页 |
| 1．1．1．3 其他载体介导的遗传转化 | 第10-11页 |
| 1．1．2 DNA直接导入法 | 第11-13页 |
| 1．1．2．1 基因枪法 | 第11页 |
| 1．1．2．2 PEG法 | 第11页 |
| 1．1．2．3 脂质体法 | 第11-12页 |
| 1．1．2．4 电激法 | 第12页 |
| 1．1．2．5 超声波法 | 第12页 |
| 1．1．2．6 显微注射法 | 第12页 |
| 1．1．2．7 微束激光穿刺法 | 第12-13页 |
| 1．1．2．8 碳化硅纤维介导法 | 第13页 |
| 1．1．3 种质系统转化法 | 第13页 |
| 1．2 花卉基因工程研究概况 | 第13-15页 |
| 1．2．1 花色基因工程研究概况 | 第14页 |
| 1．2．2 花型基因工程研究概况 | 第14页 |
| 1．2．3 切花保鲜研究概况 | 第14-15页 |
| 1．3 菊花研究概况 | 第15-16页 |
| 1．3．1 菊花组织培养 | 第16页 |
| 1．3．2 遗传转化 | 第16页 |
| 1．4 Ipt基因的作用 | 第16-18页 |
| 二． 引言 | 第18-20页 |
| 三． 材料和方法 | 第20-26页 |
| 3．1 材料 | 第20-21页 |
| 3．1．1 植物材料 | 第20页 |
| 3．1．2 农杆菌菌株及质粒与基因 | 第20页 |
| 3．1．3 试剂及主要仪器设备 | 第20页 |
| 3．1．4 常用溶液 | 第20-21页 |
| 3．1．5 基本培养基 | 第21页 |
| 3．1．5．1 细菌培养基 | 第21页 |
| 3．1．5．2 植物培养基 | 第21页 |
| 3．2 试验方法 | 第21-26页 |
| 3．2．1 培养条件 | 第21-22页 |
| 3．2．2 无菌材料的获得 | 第22页 |
| 3．2．3 再生体系的建立 | 第22页 |
| 3．2．3．1 幼叶再生体现的建立 | 第22页 |
| 3．2．3．2 叶龄对再生的影响 | 第22页 |
| 3．2．3．3 基因型对再生的影响 | 第22页 |
| 3．2．3．4 预培养对再生的影响 | 第22页 |
| 3．2．3．5 茎段再生体系的建立 | 第22页 |
| 3．2．4 转化方法和转化条件的优化 | 第22-24页 |
| 3．2．4．1 选择压及头孢霉素浓度的确定 | 第22-23页 |
| 3．2．4．1．1 选择压的确定 | 第22页 |
| 3．2．4．1．2 头孢霉素对再生的影响 | 第22-23页 |
| 3．2．4．1．3 卡那霉素对生根的影响 | 第23页 |
| 3．2．4．2 农杆菌的培养与活化 | 第23页 |
| 3．2．4．3 转化方法 | 第23页 |
| 3．2．4．4 转化方法的优化 | 第23-24页 |
| 3．2．4．4．1 感染时间对转化的影响 | 第23页 |
| 3．2．4．4．2 共培养对转化的影响 | 第23页 |
| 3．2．4．4．3 延迟筛选对转化的影响 | 第23-24页 |
| 3．2．4．4．4 乙酰丁香酮对转化的影响 | 第24页 |
| 3．2．5 转基因植株的检测方法 | 第24-26页 |
| 3．2．5．1 卡那霉素抗性生根检测 | 第24页 |
| 3．2．5．2 目的基因的PCR检测 | 第24-25页 |
| 3．2．5．2．1 CTBA法提取植物总DNA | 第24页 |
| 3．2．5．2．2 质粒DNA快速抽提法 | 第24-25页 |
| 3．2．5．2．3 PCR检测 | 第25页 |
| 3．2．5．3 园艺形状的分析检测 | 第25-26页 |
| 四． 结果与分析 | 第26-36页 |
| 4．1 再生体系的建立 | 第26-29页 |
| 4．1．1 幼叶再生体系的建立 | 第26-27页 |
| 4．1．2 叶龄对再生的影响 | 第27页 |
| 4．1．3 叶龄对再生的影响 | 第27页 |
| 4．1．4 基因型对再生的影响 | 第27-28页 |
| 4．1．5 茎段再生体系的建立 | 第28-29页 |
| 4．2 转化条件的建立及优化 | 第29-34页 |
| 4．2．1 选择压及抑菌浓度的确定 | 第29-32页 |
| 4．2．1．1 头孢霉素（Cef）对再生的影响 | 第29-30页 |
| 4．2．1．2 卡那霉素对再生的影响 | 第30-31页 |
| 4．2．1．3 卡那霉素对生根的影响 | 第31-32页 |
| 4．2．2 转化方法的优化 | 第32-34页 |
| 4．2．2．1 感染时间对转化的影响 | 第32页 |
| 4．2．2．2 共培养对转化的影响 | 第32-33页 |
| 4．2．2．3 延迟筛选对转化的影响 | 第33-34页 |
| 4．2．2．4 乙酰丁香酮对转化的影响 | 第34页 |
| 4．3 转基因植株的检测方法 | 第34-36页 |
| 4．3．1 卡那霉素抗性生根检测 | 第34-35页 |
| 4．3．2 目的基因的PCR检测 | 第35页 |
| 4．3．3 园艺性状的观察分析 | 第35-36页 |
| 五． 讨论 | 第36-39页 |
| 5．1 菊花基因型对再生能力的影响 | 第36页 |
| 5．2 激素组合在再生中的作用 | 第36-37页 |
| 5．3 抗生素在遗传转化中的作用 | 第37页 |
| 5．4 生根筛选在遗传转化中的作用 | 第37-38页 |
| 5．5 Ipt基因对菊花园艺性状的影响 | 第38-39页 |
| 六． 小结 | 第39-40页 |
| 七． 致谢 | 第40-41页 |
| 八． 参考文献 | 第41-45页 |
| 缩略词表 | 第45页 |
