| 英文缩略表 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-8页 |
| 1． 引言 | 第8-18页 |
| 1．1 MARs序列的分离鉴定 | 第8-9页 |
| 1．2 MARs序列的结构特征 | 第9-11页 |
| 1．3 MARs序列结合蛋白 | 第11页 |
| 1．4 MARs序列的作用机制 | 第11-13页 |
| 1．5 MARs序列功能研究现状 | 第13-15页 |
| 1．6 林木抗病虫基因工程研究进展 | 第15-17页 |
| 1．6．1 抗除草剂基因工程 | 第15页 |
| 1．6．2 抗病基因工程 | 第15-16页 |
| 1．6．3 抗虫基因工程 | 第16-17页 |
| 1．7 本课题选题依据 | 第17-18页 |
| 2． 材料与方法 | 第18-28页 |
| 2．1 试验材料 | 第18页 |
| 2．1．1 植物材料 | 第18页 |
| 2．1．2 菌株与质粒 | 第18页 |
| 2．1．3 酶与生化试剂 | 第18页 |
| 2．1．4 PCR引物 | 第18页 |
| 2．2 试验方法 | 第18-28页 |
| 2．2．1 植物基因组DNA的提取（CTAB法） | 第18-19页 |
| 2．2．2 烟草MARs序列的分离 | 第19-22页 |
| 2．2．2．1 烟草MARs序列的扩增 | 第19-20页 |
| 2．2．2．2 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第20页 |
| 2．2．2．3 连接及转化 | 第20页 |
| 2．2．2．4 碱法小量提取质粒DNA及酶切鉴定 | 第20-21页 |
| 2．2．2．5 序列测定 | 第21-22页 |
| 2．2．3 含有烟草MARs序列植物表达载体的构建 | 第22-23页 |
| 2．2．3．1 碱法大量提取质粒DNA | 第22-23页 |
| 2．2．3．2 载体构建 | 第23页 |
| 2．2．4 根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备及转化 | 第23页 |
| 2．2．4．1 农杆菌感受态细胞的制备 | 第23页 |
| 2．2．4．2 冻融法转化农杆菌 | 第23页 |
| 2．2．5 利用农杆菌介导转化烟草 | 第23-25页 |
| 2．2．5．1 农杆菌培养 | 第23-24页 |
| 2．2．5．2 烟草转化、培养和植株再生 | 第24页 |
| 2．2．5．3 转基因烟草植株的PCR检测 | 第24-25页 |
| 2．2．6 GUS基因在转基因烟草中的瞬时表达与稳定表达 | 第25-27页 |
| 2．2．6．1 组织化学染色法分析GUS基因在转基因烟草中的瞬时表达 | 第25页 |
| 2．2．6．2 荧光分析法定量测定GUS基因在转基因烟草中的稳定表达活性 | 第25-27页 |
| 2．2．7 烟草MARs序列的应用 | 第27-28页 |
| 2．2．7．1 大豆几丁质酶基因的分离 | 第27页 |
| 2．2．7．2 构建植物表达载体并转化农杆菌 | 第27页 |
| 2．2．7．3 利用农杆菌介导转化杨树 | 第27-28页 |
| 3． 结果与分析 | 第28-40页 |
| 3．1 烟草MARs序列的分离及序列特征 | 第28-30页 |
| 3．2 含有烟草MARs序列植物表达载体的构建 | 第30-32页 |
| 3．2．1 载体构建图谱 | 第30-32页 |
| 3．2．2 PCR方法鉴定表达载体中MARs序列的插入方向 | 第32页 |
| 3．3 转基因烟草植株的获得及PCR检测 | 第32-34页 |
| 3．3．1 转基因烟草植株的获得 | 第32-33页 |
| 3．3．2 转基因烟草植株的PCR检测 | 第33-34页 |
| 3．4 烟草MARs序列的功能分析 | 第34-37页 |
| 3．4．1 GUS基因在转基因烟草中的瞬时表达 | 第34页 |
| 3．4．2 GUS基因在转基因烟草中的稳定表达 | 第34-37页 |
| 3．4．2．1 转基因烟草中GUS基因平均表达活性分析 | 第34页 |
| 3．4．2．2 转基因烟草植株之间GUS基因表达活性差异分析 | 第34-37页 |
| 3．5 烟草MARs序列的应用 | 第37-40页 |
| 3．5．1 大豆几丁质酶基因的克隆 | 第37-38页 |
| 3．5．2 植物表达载体的构建 | 第38-39页 |
| 3．5．3 转基因杨树抗性芽的获得 | 第39-40页 |
| 4． 讨论 | 第40-43页 |
| 4．1 MARs序列的分离及序列特征 | 第40页 |
| 4．2 MARs序列作用机制及影响MARs序列功能的几个因素 | 第40-42页 |
| 4．3 杨树遗传转化过程中容易出现的几个问题 | 第42页 |
| 4．4 本课题今后研究工作设想 | 第42-43页 |
| 5． 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-52页 |
| 英文摘要 | 第52-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
