| 前言（Introdution） | 第1-13页 |
| 1． 细菌聚羟基脂肪酸酯（PHAs）的简介 | 第10页 |
| 2． PHAs的分类及性质 | 第10-11页 |
| 3． PHAs的研究进展 | 第11页 |
| 4． PHAs合成酶基因的研究方法 | 第11-12页 |
| 5． 本实验的研究意义 | 第12-13页 |
| 一． 材料与方法（Materials and Methods） | 第13-23页 |
| 1． 材料 | 第13-15页 |
| 1．1 菌种与质粒 | 第13-14页 |
| 1．2 主要仪器设备及试剂 | 第14-15页 |
| 2 方法 | 第15-23页 |
| 2．1 构建菌株YS1基因组BAC文库流程图 | 第15-16页 |
| 2．2 菌株YS1总DNA的部分酶切及大片段DNA的脉冲电泳分离 | 第16-17页 |
| 2．2．1 制样 | 第16页 |
| 2．2．2 脉冲电泳 | 第16-17页 |
| 2．2．3 回收菌株YS1部分酶切的DNA片段 | 第17页 |
| 2．3 质粒DNA的提取 | 第17-18页 |
| 2．3．1 提取 | 第17-18页 |
| 2．3．2 酶解、去磷酸化 | 第18页 |
| 2．3．3 回收 | 第18页 |
| 2．4 连接、电转化 | 第18-20页 |
| 2．4．1 连接 | 第19页 |
| 2．4．2 制备E．coli DH10B感受态 | 第19页 |
| 2．4．3 电转化 | 第19-20页 |
| 2．5 验证转化子 | 第20-22页 |
| 2．5．1 凝胶电泳验证外源片段大小 | 第20页 |
| 2．5．2 菌落杂交验证外源的正确 | 第20-22页 |
| 2．6 保藏转化子 | 第22-23页 |
| 二． 结果与分析（Results and Analysis） | 第23-34页 |
| 1． 构建菌株YS1基因组BAC文库 | 第23-31页 |
| 1．1 部分酶切菌株YS1总DNA及分离大片段DNA | 第23-24页 |
| 1．2 菌株YS1的大片段DNA回收 | 第24-25页 |
| 1．3 计算文库的大小 | 第25-26页 |
| 1．4 BAC质粒DNA的提取与回收 | 第26-27页 |
| 1．5 连接、电转化 | 第27-28页 |
| 1．6 抽质粒验证外源片段 | 第28-29页 |
| 1．6．1 抽提转化子DNA电泳检测 | 第28页 |
| 1．6．2 对抽提的转化子进行酶切验证 | 第28-29页 |
| 1．7 菌落杂交 | 第29-30页 |
| 1．8 计算文库的覆盖倍数 | 第30-31页 |
| 2 利用随机引物扩增法寻找合适的筛选探针 | 第31-34页 |
| 2．1 10个产PHAs菌株的菌落特征以及产物PHAs的组成 | 第31-32页 |
| 2．2 RAPD扩增的结果与分析 | 第32-33页 |
| 2．3 分析随机引物的特征 | 第33-34页 |
| 三． 讨论（Discussion） | 第34-40页 |
| 1． 关于PHAs合成酶基因及菌株YS1的特点 | 第34-35页 |
| 2． 关于构建假单胞菌YS1基因组BAC文库 | 第35-37页 |
| 3． 构建BAC文库的关键技术----脉冲电泳 | 第37-38页 |
| 4． RAPD的结果讨论 | 第38-39页 |
| 5． 对菌株YS1基因组文库的展望 | 第39-40页 |
| 四． 结论（Conclusions） | 第40-41页 |
| 文献综述 | 第41-52页 |
| 1． 细菌聚羟基脂肪酸酯（Polyhydroxyalkanoates,PHAs）的研究情况 | 第41-51页 |
| 1．1 引言 | 第41-42页 |
| 1．2 PHAs的性质、用途 | 第42-43页 |
| 1．3 PHA的代谢途径 | 第43-46页 |
| 1．4 PHA合成基因及其研究进展 | 第46-49页 |
| 1．5 对除phaCAB外的PHAs的其他基因的研究 | 第49-51页 |
| 2． 菌种Pseudomonas pseudoalcaligenes YS1的性质以及合成的PHAs的类型 | 第51-52页 |
| 结束语 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-62页 |
| 附录 | 第62-63页 |
