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莱茵衣藻外源基因高效转化系统的建立及金藻转化方法的研究

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-14页
缩写第14-15页
第一章 藻类基因工程研究及展望第15-31页
 1. 藻类基因工程概况第15-17页
 2. 蓝藻基因工程第17-21页
  2.1 质粒及载体系统第18页
  2.2 基因转移系统第18-21页
 3. 真核藻类基因工程第21-29页
  3.1 真核微藻第21-26页
   3.1.1 莱茵衣藻第21-24页
    3.1.1.1 核转化第22-23页
    3.1.1.2 叶绿体转化第23-24页
    3.1.1.3 线粒体转化第24页
   3.1.2 小球藻第24页
   3.1.3 团藻第24-25页
   3.1.4 硅藻第25-26页
   3.1.5 盐藻第26页
  3.2 大型藻类第26-29页
 4. 藻类基因工程的前景与展望第29-31页
第二章 莱茵衣藻转化系统的优化第31-53页
 1. 引言第31-33页
 2. 材料与方法第33-41页
  2.1 实验材料第33-34页
   2.1.1 植物材料第33页
   2.1.2 培养基第33页
   2.1.3 试剂第33-34页
   2.1.4 细菌培养基第34页
   2.1.5 菌种与质粒第34页
   2.1.6 仪器设备第34页
  2.2 方法第34-41页
   2.2.1 选择剂浓度的确定第34-35页
    2.2.1.1 材料的准备第34页
    2.2.1.2 莱茵衣藻在SE培养基中对Zeocin的敏感性第34-35页
     2.2.1.2.1 固体培养基中莱茵衣藻Zeocin的敏感性的测定第34-35页
     2.2.1.2.2 液体培养基中莱茵衣藻对Zeocin敏感性的测定第35页
   2.2.2 电击法转化莱茵衣藻第35-41页
    2.2.2.1 质粒DNA的提取碱法小量提取质粒DNA第35-36页
    2.2.2.2 转化受体获得第36页
    2.2.2.3 电击转化第36-37页
     Ⅰ. 受体材料的准备第36页
     Ⅱ. 电击过程第36-37页
    2.2.2.4 莱茵衣藻总DNA的提取第37-38页
    2.2.2.5 转基因莱茵衣藻的PCR检测第38页
    2.2.2.6 转基因衣藻的Southern杂交分析第38-41页
     2.2.2.6.1 DNA的转膜第38-39页
     2.2.2.6.2 探针标记第39页
     2.2.2.6.3 杂交第39-41页
 3. 结果与分析第41-50页
  3.1 固体培养基中莱茵衣藻对Zeocin敏感性第41页
  3.2 液体培养基中莱茵衣藻对Zeocin敏感性第41-45页
  3.3 电击转化莱茵衣藻最佳条件的确定第45-48页
  3.4 转基因衣藻的PCR检测第48-49页
  3.5 转基因衣藻的Southern杂交分析第49-50页
 4. 结论与讨论第50-53页
  4.1 zeocin的浓度的确定第50-51页
  4.2 莱茵衣藻转化的最佳条件第51-52页
  4.3 外源基因在莱茵衣藻中的稳定性第52-53页
第三章 海洋微藻基因工程选择标记的筛选第53-61页
 1. 引言第53-54页
 2. 材料与方法第54-56页
  2.1 材料第54页
   2.1.1 植物材料第54页
   2.1.2 培养基第54页
   2.1.3 试剂第54页
   2.1.4 仪器设备第54页
  2.2 方法第54-56页
   2.2.1 材料的准备第54页
   2.2.2 微藻对抗生素敏感性的测定第54-56页
 3. 结果与分析第56-58页
  3.1 8种微藻对选择剂的敏感性第56页
  3.2 叉鞭金藻、扁藻对选择剂的敏感性第56-58页
 4. 讨论和结论第58-61页
  4.1 选择剂的作用机理第58-60页
  4.2 结论第60-61页
第四章 叉鞭金藻转化的初探第61-70页
 1. 引言第61页
 2. 材料与方法第61-64页
  2.1 材料第61-62页
   2.1.1 植物材料第61页
   2.1.2 金藻培养基第61-62页
   2.1.3 细菌培养基第62页
   2.1.4 菌种与质粒第62页
   2.1.5 试剂第62页
   2.1.6 仪器设备第62页
  2.2 方法第62-64页
   2.2.1 材料的准备第62页
   2.2.2 金藻对zeocin的敏感性第62-63页
    2.2.2.1 金藻在淡化液体培养基中对zeocin敏感性的测定第62页
    2.2.2.2 Zeocin对金藻的半致死剂量的测定第62-63页
    2.2.2.3 淡化固体培养基中金藻Zeocin的敏感性的测定第63页
   2.2.3 电击法转化金藻第63-64页
    2.2.3.1 质粒DNA的提取第63页
    2.2.3.2 转化受体获得第63-64页
     Ⅰ. 受体材料的准备第63页
     Ⅱ. 电击过程第63-64页
     Ⅲ. 电击后细胞的计数第64页
     Ⅳ. 电击后材料的培养第64页
 3. 结果与分析第64-68页
  3.1 金藻在液体培养基中Zeocin的最适浓度的确定第64-67页
  3.2 金藻在淡化的固体培养基中对zeocin的敏感性第67页
  3.3 电场强度对细胞存活率的影响第67-68页
  3.4 转化细胞在选择压下的生长情况第68页
 4. 讨论和结论第68-70页
  4.1 在淡化培养基中zeocin对金藻的半致死剂量第68-69页
  4.2 金藻转化系统的探索第69-70页
结论第70-71页
参考文献第71-78页

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