中文摘要 | 第1-12页 |
英文摘要 | 第12-14页 |
缩写 | 第14-15页 |
第一章 藻类基因工程研究及展望 | 第15-31页 |
1. 藻类基因工程概况 | 第15-17页 |
2. 蓝藻基因工程 | 第17-21页 |
2.1 质粒及载体系统 | 第18页 |
2.2 基因转移系统 | 第18-21页 |
3. 真核藻类基因工程 | 第21-29页 |
3.1 真核微藻 | 第21-26页 |
3.1.1 莱茵衣藻 | 第21-24页 |
3.1.1.1 核转化 | 第22-23页 |
3.1.1.2 叶绿体转化 | 第23-24页 |
3.1.1.3 线粒体转化 | 第24页 |
3.1.2 小球藻 | 第24页 |
3.1.3 团藻 | 第24-25页 |
3.1.4 硅藻 | 第25-26页 |
3.1.5 盐藻 | 第26页 |
3.2 大型藻类 | 第26-29页 |
4. 藻类基因工程的前景与展望 | 第29-31页 |
第二章 莱茵衣藻转化系统的优化 | 第31-53页 |
1. 引言 | 第31-33页 |
2. 材料与方法 | 第33-41页 |
2.1 实验材料 | 第33-34页 |
2.1.1 植物材料 | 第33页 |
2.1.2 培养基 | 第33页 |
2.1.3 试剂 | 第33-34页 |
2.1.4 细菌培养基 | 第34页 |
2.1.5 菌种与质粒 | 第34页 |
2.1.6 仪器设备 | 第34页 |
2.2 方法 | 第34-41页 |
2.2.1 选择剂浓度的确定 | 第34-35页 |
2.2.1.1 材料的准备 | 第34页 |
2.2.1.2 莱茵衣藻在SE培养基中对Zeocin的敏感性 | 第34-35页 |
2.2.1.2.1 固体培养基中莱茵衣藻Zeocin的敏感性的测定 | 第34-35页 |
2.2.1.2.2 液体培养基中莱茵衣藻对Zeocin敏感性的测定 | 第35页 |
2.2.2 电击法转化莱茵衣藻 | 第35-41页 |
2.2.2.1 质粒DNA的提取碱法小量提取质粒DNA | 第35-36页 |
2.2.2.2 转化受体获得 | 第36页 |
2.2.2.3 电击转化 | 第36-37页 |
Ⅰ. 受体材料的准备 | 第36页 |
Ⅱ. 电击过程 | 第36-37页 |
2.2.2.4 莱茵衣藻总DNA的提取 | 第37-38页 |
2.2.2.5 转基因莱茵衣藻的PCR检测 | 第38页 |
2.2.2.6 转基因衣藻的Southern杂交分析 | 第38-41页 |
2.2.2.6.1 DNA的转膜 | 第38-39页 |
2.2.2.6.2 探针标记 | 第39页 |
2.2.2.6.3 杂交 | 第39-41页 |
3. 结果与分析 | 第41-50页 |
3.1 固体培养基中莱茵衣藻对Zeocin敏感性 | 第41页 |
3.2 液体培养基中莱茵衣藻对Zeocin敏感性 | 第41-45页 |
3.3 电击转化莱茵衣藻最佳条件的确定 | 第45-48页 |
3.4 转基因衣藻的PCR检测 | 第48-49页 |
3.5 转基因衣藻的Southern杂交分析 | 第49-50页 |
4. 结论与讨论 | 第50-53页 |
4.1 zeocin的浓度的确定 | 第50-51页 |
4.2 莱茵衣藻转化的最佳条件 | 第51-52页 |
4.3 外源基因在莱茵衣藻中的稳定性 | 第52-53页 |
第三章 海洋微藻基因工程选择标记的筛选 | 第53-61页 |
1. 引言 | 第53-54页 |
2. 材料与方法 | 第54-56页 |
2.1 材料 | 第54页 |
2.1.1 植物材料 | 第54页 |
2.1.2 培养基 | 第54页 |
2.1.3 试剂 | 第54页 |
2.1.4 仪器设备 | 第54页 |
2.2 方法 | 第54-56页 |
2.2.1 材料的准备 | 第54页 |
2.2.2 微藻对抗生素敏感性的测定 | 第54-56页 |
3. 结果与分析 | 第56-58页 |
3.1 8种微藻对选择剂的敏感性 | 第56页 |
3.2 叉鞭金藻、扁藻对选择剂的敏感性 | 第56-58页 |
4. 讨论和结论 | 第58-61页 |
4.1 选择剂的作用机理 | 第58-60页 |
4.2 结论 | 第60-61页 |
第四章 叉鞭金藻转化的初探 | 第61-70页 |
1. 引言 | 第61页 |
2. 材料与方法 | 第61-64页 |
2.1 材料 | 第61-62页 |
2.1.1 植物材料 | 第61页 |
2.1.2 金藻培养基 | 第61-62页 |
2.1.3 细菌培养基 | 第62页 |
2.1.4 菌种与质粒 | 第62页 |
2.1.5 试剂 | 第62页 |
2.1.6 仪器设备 | 第62页 |
2.2 方法 | 第62-64页 |
2.2.1 材料的准备 | 第62页 |
2.2.2 金藻对zeocin的敏感性 | 第62-63页 |
2.2.2.1 金藻在淡化液体培养基中对zeocin敏感性的测定 | 第62页 |
2.2.2.2 Zeocin对金藻的半致死剂量的测定 | 第62-63页 |
2.2.2.3 淡化固体培养基中金藻Zeocin的敏感性的测定 | 第63页 |
2.2.3 电击法转化金藻 | 第63-64页 |
2.2.3.1 质粒DNA的提取 | 第63页 |
2.2.3.2 转化受体获得 | 第63-64页 |
Ⅰ. 受体材料的准备 | 第63页 |
Ⅱ. 电击过程 | 第63-64页 |
Ⅲ. 电击后细胞的计数 | 第64页 |
Ⅳ. 电击后材料的培养 | 第64页 |
3. 结果与分析 | 第64-68页 |
3.1 金藻在液体培养基中Zeocin的最适浓度的确定 | 第64-67页 |
3.2 金藻在淡化的固体培养基中对zeocin的敏感性 | 第67页 |
3.3 电场强度对细胞存活率的影响 | 第67-68页 |
3.4 转化细胞在选择压下的生长情况 | 第68页 |
4. 讨论和结论 | 第68-70页 |
4.1 在淡化培养基中zeocin对金藻的半致死剂量 | 第68-69页 |
4.2 金藻转化系统的探索 | 第69-70页 |
结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-78页 |