| 摘要 | 第1-17页 |
| ABSTRACT | 第17-21页 |
| 符号及缩略语 | 第21-25页 |
| 引言 | 第25-27页 |
| 第一部分 文献综述 | 第27-53页 |
| 第一章 转运免疫球蛋白的免疫球蛋白FC受体 | 第27-37页 |
| 1 免疫球蛋白Fc段受体 | 第27-28页 |
| 2 多体IgA受体(pIgR) | 第28-32页 |
| ·pIgR结构 | 第28-29页 |
| ·pIgR转运 | 第29-30页 |
| ·pIgR与Ig的相互作用 | 第30页 |
| ·pIgR研究进展 | 第30-32页 |
| ·pIgR的表达及其功能 | 第30-31页 |
| ·pIgR研究前景 | 第31-32页 |
| 3 新生儿Fc受体(FcRn) | 第32-37页 |
| ·FcRn的组成与结构 | 第32-33页 |
| ·FcRn结合IgG的pH依赖性 | 第33-34页 |
| ·FcRn的生理学功能 | 第34-35页 |
| ·FcRn参与IgG通过胎盘和卵黄囊的胞转作用(transcytosis) | 第34-35页 |
| ·FcRn通过肠上皮转运母体IgG分子 | 第35页 |
| ·FcRn保护循环中的IgG免受降解 | 第35页 |
| ·FcRn研究进展 | 第35-37页 |
| 第二章 仔猪的免疫特点 | 第37-47页 |
| 1 仔猪的被动免疫 | 第37-39页 |
| ·乳中免疫球生白与被动免疫 | 第37-38页 |
| ·乳中白细胞与被动免疫 | 第38页 |
| ·乳中其它因素对被动免疫的影响 | 第38-39页 |
| 2 仔猪的主动免疫 | 第39-42页 |
| ·血液免疫 | 第39-40页 |
| ·先天免疫 | 第39页 |
| ·仔猪外周血淋巴细胞特点 | 第39-40页 |
| ·断奶应激的影响 | 第40页 |
| ·黏膜免疫 | 第40-42页 |
| ·肠道相关淋巴组织(Gut-associated lymphoid tissue,GALT)的组成 | 第41-42页 |
| ·上皮细胞间淋巴细胞(intraepithelial lymphocyte,IEL) | 第41-42页 |
| ·肠集合淋巴结(Peyer's patches,PP)与M细胞(Membranous epithelial cell) | 第42页 |
| ·肠上皮细胞 | 第42页 |
| ·分泌型IgA(SIgA) | 第42页 |
| ·固有层淋巴细胞(Lamina propria lymphocytes,LPL) | 第42页 |
| ·胃肠道黏膜免疫机制 | 第42页 |
| 3 仔猪肠道的特点及对免疫球蛋白的吸收 | 第42-47页 |
| ·仔猪胃肠道的发育成熟 | 第42-43页 |
| ·新生仔畜小肠的特点 | 第43-44页 |
| ·小肠的结构特点 | 第43页 |
| ·小肠的消化吸收和转运功能 | 第43-44页 |
| ·仔猪小肠对IgG等大分子物质的吸收与转运 | 第44-47页 |
| ·大分子蛋白的吸收和免疫性的传递 | 第44页 |
| ·仔猪小肠吸收蛋白质的机制 | 第44-47页 |
| 第三章 哺乳动物FCRN及其研究前景 | 第47-53页 |
| 1 FcRn在哺乳动物体内的表达 | 第47页 |
| 2 FcRn与母乳IgG的转运 | 第47-49页 |
| 3 FcRn与免疫应答 | 第49-50页 |
| 4 FcRn的研究意义 | 第50-53页 |
| ·FcRn与自身免疫病的治疗 | 第50页 |
| ·FcRn与IgG分子改造 | 第50页 |
| ·以FcRn为载体的新型药物与疫苗的开发 | 第50-51页 |
| ·FcRn与遗传育种 | 第51-53页 |
| 第二部分 试验研究 | 第53-99页 |
| 第四章 FCRN在仔猪体内表达的定性检测 | 第53-63页 |
| 1 材料与方法 | 第54-58页 |
| ·试验时间、地点 | 第54页 |
| ·试验材料 | 第54-56页 |
| ·待检组织样品 | 第54页 |
| ·主要试剂及工具酶 | 第54-55页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备、转化及诱导溶液 | 第54-55页 |
| ·质粒DNA提取溶液 | 第55页 |
| ·其它溶液 | 第55页 |
| ·主要仪器 | 第55-56页 |
| ·方法 | 第56-58页 |
| ·PCR引物的设计及合成 | 第56页 |
| ·仔猪组织总RNA的提取及cDNA合成 | 第56-57页 |
| ·PCR检测与目的DNA片段测序 | 第57页 |
| ·扩增片段的回收、转化和序列鉴定 | 第57页 |
| ·FcRn表达量的相对分析 | 第57-58页 |
| 2 结果 | 第58-60页 |
| ·仔猪体内组织中FcRn的表达 | 第58-59页 |
| ·FcRn在仔猪胃肠道中的表达分布 | 第59页 |
| ·不同日龄仔猪胃肠道中FcRn mRNA转录水平的相对定量与分析 | 第59-60页 |
| 3 讨论 | 第60-63页 |
| 第五章 FCRN MRNA在仔猪胃肠道表达的定量检测及其表达规律 | 第63-77页 |
| 1 材料与方法 | 第64-68页 |
| ·试验材料 | 第64-65页 |
| ·试验动物与样品采集 | 第64页 |
| ·主要试剂及工具酶 | 第64页 |
| ·主要仪器 | 第64-65页 |
| ·方法 | 第65-68页 |
| ·定量PCR引物与探针的设计及合成 | 第65页 |
| ·仔猪胃肠道组织总RNA的提取 | 第65页 |
| ·RT-PCR | 第65-68页 |
| ·逆转录反应 | 第65-66页 |
| ·PCR反应 | 第66-68页 |
| ·相对定量方法 | 第68页 |
| ·数据处理和统计学分析 | 第68页 |
| 2.结果 | 第68-73页 |
| ·RNA纯度测定 | 第68页 |
| ·基因的扩增 | 第68页 |
| ·不同日龄仔猪肝脏和胃肠道组织中FcRn表达量的变化 | 第68-71页 |
| ·肝脏 | 第68-71页 |
| ·胃 | 第71页 |
| ·十二指肠 | 第71页 |
| ·空肠 | 第71页 |
| ·回肠 | 第71页 |
| ·结肠 | 第71页 |
| ·FcRn在仔猪肝脏和胃肠道不同部位的表达水平差异 | 第71-73页 |
| 3 讨论 | 第73-77页 |
| ·关于定量PCR技术 | 第73-74页 |
| ·仔猪胃肠道FcRn表达与其它动物的比较 | 第74-75页 |
| ·关于仔猪肝脏FcRn高表达的探讨 | 第75-77页 |
| 第六章 FCRN在仔猪胃肠道组织表达的定位检测及其变化动态 | 第77-93页 |
| 1 材料与方法 | 第78-81页 |
| ·试验材料 | 第78-79页 |
| ·试验动物与样品采集 | 第78页 |
| ·主要仪器设备 | 第78-79页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第79页 |
| ·Leica冰冻切片包埋剂 | 第79页 |
| ·DAB(3,3—二氨基联苯胺)显色试剂盒 | 第79页 |
| ·ISH杂交液 | 第79页 |
| ·标记有辣根过氧化物酶的抗地高辛抗体(anti-DIG-HRP) | 第79页 |
| ·其它试剂 | 第79页 |
| ·探针的制备 | 第79-80页 |
| ·原位杂交方法的建立 | 第80-81页 |
| ·组织切片厚度的确定 | 第80页 |
| ·固定 | 第80页 |
| ·杂交前处理 | 第80页 |
| ·祛除内源性辣根过氧化物酶(HRP)对杂交信号的影响 | 第80页 |
| ·消化细胞膜蛋白 | 第80页 |
| ·预杂交 | 第80页 |
| ·杂交 | 第80-81页 |
| ·杂交后处理 | 第81页 |
| ·显色 | 第81页 |
| ·复染 | 第81页 |
| ·观察 | 第81页 |
| ·原位杂交结果的观察与分析 | 第81页 |
| ·数据统计 | 第81页 |
| 2 结果与分析 | 第81-83页 |
| ·原位杂交条件的优化 | 第81-82页 |
| ·切片最佳厚度的确定 | 第81-82页 |
| ·内源性辣根过氧化物酶(HRP)的祛除效果 | 第82页 |
| ·原位杂交效果 | 第82页 |
| ·FcRn在仔猪小肠表达的定位检测结果 | 第82-83页 |
| ·FcRn mRNA在仔猪小肠黏膜上皮的表达 | 第82-83页 |
| ·FcRn mRNA在仔猪小肠黏膜固有层的表达 | 第83页 |
| ·FcRn mRNA在仔猪小肠黏膜下层的表达 | 第83页 |
| ·FcRn mRNA在仔猪小肠表达的相对定量 | 第83页 |
| 3 讨论 | 第83-93页 |
| ·原位杂交方法的应用及其在本研究中的意义 | 第83-84页 |
| ·本研究中对原位杂交方法的改进 | 第84页 |
| ·小肠FcRn mRNA原位杂交的定位分析 | 第84-93页 |
| 第七章 仔猪血液IGG水平动态变化及其与FCRN表达的相关性分析 | 第93-99页 |
| 1 材料与方法 | 第93-95页 |
| ·试验动物及分组 | 第93-94页 |
| ·样品采集 | 第94页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第94页 |
| ·FCM用鼠抗猪单克隆抗体 | 第94页 |
| ·IgG RIA试剂盒 | 第94页 |
| ·其它试剂 | 第94页 |
| ·主要仪器设备 | 第94页 |
| ·血清IgG的RIA测定 | 第94-95页 |
| ·数据处理与分析 | 第95页 |
| 2 结果与分析 | 第95-97页 |
| ·仔猪从出生至断奶后血液IgG水平的变化动态 | 第95-97页 |
| ·仔猪血液IgG水平与同时期小肠FcRn表达水平的相关性分析 | 第97页 |
| 3 讨论 | 第97-99页 |
| ·关于仔猪的体液免疫 | 第97-98页 |
| ·FcRn与仔猪免疫的相关性 | 第98-99页 |
| 第三部分 全文结论 | 第99-101页 |
| 第四部分 参考文献 | 第101-119页 |
| 附录:攻读博士学位期间发表的相关科研论文 | 第119-121页 |
