| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-26页 |
| ·鸡传染性支气管炎的研究进展 | 第8-19页 |
| ·鸡传染性支气管炎病毒的检测方法研究进展 | 第19-23页 |
| ·病毒采集和分离 | 第19-20页 |
| ·传染性支气管炎病毒的诊断方法 | 第20-22页 |
| ·分子生物学诊断技术 | 第22-23页 |
| ·鸡传染性支气管炎病毒的分型研究进展 | 第23-26页 |
| 第二章 引言 | 第26-28页 |
| 第三章 材料与方法 | 第28-39页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·毒株、克隆载体和工程菌株用菌种来源 | 第28页 |
| ·仪器 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28-29页 |
| ·所用试剂和溶液的配制 | 第29-30页 |
| ·引物溶解常用溶液的配置 | 第29页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳用溶液的配制 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-38页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化和表达用溶液 | 第30-31页 |
| ·质粒DNA 提取用溶液 | 第31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
| ·2%琼脂糖凝胶电泳 | 第32页 |
| ·从普通琼脂糖凝胶中回收PCR 产物 | 第32页 |
| ·病毒的增殖 | 第32-33页 |
| ·扩增S1 基因序列及S1 基因HVR 1 的序列 | 第33-38页 |
| ·引物的设计合成 | 第33页 |
| ·病毒核酸的提取 | 第33-34页 |
| ·组织核酸的提取 | 第34页 |
| ·反转录 | 第34页 |
| ·PCR 扩增及目的基因的纯化 | 第34-35页 |
| ·PCR 产物的电泳 | 第35页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第35-36页 |
| ·DNA 连接反应 | 第36页 |
| ·重组质粒的转化 | 第36-37页 |
| ·重组质粒的小量制备 | 第37页 |
| ·重组质粒双酶切鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组质粒的PCR 鉴定 | 第38页 |
| ·用HaeIII 酶切S1 基因 | 第38页 |
| ·用XcmI 酶切扩增的S1 基因序列 | 第38页 |
| ·分析处理分析电泳分离的限制性酶切片段长度和HVR 1 序列比对，与标准血清型或变异株比较，确定分离到的IBV 毒株分型 | 第38-39页 |
| 第四章 结果与分析 | 第39-45页 |
| ·S1 基因PCR 扩增的结果 | 第39-40页 |
| ·用 HaeIII 酶切 S1 基因电泳结果 | 第40-42页 |
| ·用 XcmI 酶切 S1 基因序列产物电泳结果 | 第42-43页 |
| ·HVR 1 序列PCR 扩增结果 | 第43-44页 |
| ·HVR 1 序列比对结果分析 | 第44-45页 |
| 第五章 结论与讨论 | 第45-47页 |
| ·重要结论 | 第45页 |
| ·目的基因的选取 | 第45-46页 |
| ·核酸的提取、纯化及抑制物质的去除 | 第46页 |
| ·PCR 反应条件的优化 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |