| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 1 前言 | 第11-19页 |
| ·自然界的生物固氮 | 第11-12页 |
| ·固氮酶活性的测定方法研究 | 第12页 |
| ·固氮基因 | 第12-13页 |
| ·联合固氮研究 | 第13-14页 |
| ·甘蔗内生联合固氮 | 第14-16页 |
| ·甘蔗内生固氮菌种类 | 第14-15页 |
| ·甘蔗内生固氮菌的回接方法研究 | 第15页 |
| ·甘蔗内生固氮作用研究 | 第15-16页 |
| ·甘蔗固氮作用与甘蔗生物能源利用新途径 | 第16页 |
| ·国内外甘蔗固氮研究现状 | 第16-17页 |
| ·本课题立论依据及意义 | 第17-19页 |
| 2 甘蔗内生固氮菌的分离、鉴定 | 第19-34页 |
| ·材料与方法 | 第19-26页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·供试甘蔗品种 | 第19页 |
| ·实验试剂 | 第19页 |
| ·试验所用培养基 | 第19页 |
| ·甘蔗内生固氮菌的分离纯化 | 第19页 |
| ·内生固氮菌的固氮酶活性检测 | 第19页 |
| ·固氮菌生理生化特性测定 | 第19-21页 |
| ·革兰氏染色 | 第20页 |
| ·甲基红试验(MR) | 第20页 |
| ·接触酶试验 | 第20页 |
| ·明胶水解 | 第20页 |
| ·氧化酶 | 第20页 |
| ·脲酶 | 第20-21页 |
| ·硝酸还原酶 | 第21页 |
| ·硫化氢 | 第21页 |
| ·柠檬酸盐利用 | 第21页 |
| ·吲哚试验 | 第21页 |
| ·碳水化合物利用 | 第21页 |
| ·CTAB法提取甘蔗内生联合固氮菌DNA | 第21-22页 |
| ·固氮菌的16S rRNA基因分析 | 第22-23页 |
| ·固氮菌的16S rRNA基因扩增 | 第22-23页 |
| ·固氮菌的16S rRNA基因扩增片段纯化 | 第23页 |
| ·酶切 | 第23页 |
| ·固氮菌的16S rRNA基因测序 | 第23页 |
| ·固氮菌的固氮基因nifH克隆 | 第23-26页 |
| ·固氮菌的固氮基因nifH扩增 | 第23-24页 |
| ·固氮基因目标片段的回收 | 第24页 |
| ·JM109感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
| ·固氮基因目标片段连接质粒 | 第25页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第25-26页 |
| ·测序 | 第26页 |
| ·结果与分析 | 第26-32页 |
| ·甘蔗内生联合固氮菌的分离 | 第26页 |
| ·部分菌株的生理生化特性 | 第26-28页 |
| ·固氮菌的16S rRNA基因扩增 | 第28页 |
| ·酶切 | 第28-29页 |
| ·16S rRNA基因序列分析 | 第29-30页 |
| ·固氮菌的nifH固氮基因克隆与测序分析 | 第30-32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 3 不同氮水平下甘蔗固氮对植物活性物质多糖的影响 | 第34-40页 |
| ·材料与方法 | 第34-37页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·甘蔗品种与菌种 | 第34页 |
| ·仪器与试剂 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-37页 |
| ·标准固氮菌株培养 | 第34页 |
| ·蔗茎处理与回接试验 | 第34页 |
| ·催芽试验 | 第34页 |
| ·长苗试验 | 第34页 |
| ·桶栽试验及采样方法 | 第34-35页 |
| ·甘蔗多糖预备试验 | 第35-36页 |
| ·甘蔗多糖的提取 | 第36页 |
| ·甘蔗多糖的含量测定 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-38页 |
| ·不同处理下甘蔗多糖含量测定 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 4 不同氮水平下不同处理的甘蔗氮代谢 | 第40-47页 |
| ·材料与方法 | 第40-42页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·甘蔗品种与固氮菌菌种 | 第40页 |
| ·仪器与试剂 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-42页 |
| ·固氮酶活性检测 | 第40页 |
| ·叶绿素含量测定 | 第40-41页 |
| ·谷胺酰胺合成酶活性(GS)测定 | 第41页 |
| ·全氮含量测定 | 第41-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-46页 |
| ·不同氮水平下甘蔗各处理的固氮酶活性 | 第42-43页 |
| ·不同氮水平下甘蔗各处理的叶绿素含量 | 第43-44页 |
| ·不同氮水平下甘蔗各处理的谷胺酰胺合成酶(GS)活性 | 第44-45页 |
| ·不同氮水平下甘蔗各处理的全氮含量 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| ·不同氮水平下甘蔗各处理的固氮酶活性 | 第46页 |
| ·不同氮水平下甘蔗各处理的氮代谢差异 | 第46-47页 |
| 5 试验存在的问题与研究后续工作 | 第47-48页 |
| ·试验存在的问题 | 第47页 |
| ·本研究的后续工作 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 读研期间发表的论文 | 第55-56页 |
| 附录A 试验所用培养基 | 第56-58页 |
| 附录B 固氮菌的16S rRNA基因测序结果 | 第58-61页 |
| 附录C 固氮菌的nifH基因测序结果 | 第61页 |