| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-11页 |
| 1.前言 | 第11-25页 |
| ·苏云金芽胞杆菌概论 | 第11-12页 |
| ·Bt生物活性成分 | 第12-13页 |
| ·Bt CrylAc杀虫晶体蛋白 | 第13-15页 |
| ·外源抗虫基因 | 第15-16页 |
| ·Bt的应用研究 | 第16-18页 |
| ·染色体整合技术的应用研究 | 第18-23页 |
| ·立题依据与意义 | 第23-25页 |
| 2.材料和方法 | 第25-37页 |
| ·菌株和质粒 | 第25页 |
| ·培养基和抗生素 | 第25-26页 |
| ·试剂和引物 | 第26-28页 |
| ·仪器设备 | 第28-29页 |
| ·Bt 4.0718菌株总DNA的提取 | 第29页 |
| ·PCR扩增 | 第29-30页 |
| ·DNA片段连接 | 第30页 |
| ·DH5α感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
| ·连接产物转化DH5α | 第31页 |
| ·阳性转化子的筛选 | 第31页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取方法 | 第31页 |
| ·重组质粒pKCTF12的构建 | 第31-32页 |
| ·质粒pKCTF12电转XBU001 | 第32页 |
| ·工程菌株KCTF12的筛选 | 第32-34页 |
| ·生长曲线的测定 | 第34页 |
| ·重组基因的检测 | 第34页 |
| ·重组菌株KCTF12的形态学观察 | 第34页 |
| ·重组菌株KCTF12的芽胞检测 | 第34页 |
| ·重组菌株KCTF12中CrylAc蛋白的表达 | 第34-35页 |
| ·重组菌株KCTF12的杀虫活力测定 | 第35-37页 |
| 3.结果与分析 | 第37-59页 |
| ·Bt4.0178菌株总DNA的提取 | 第37页 |
| ·trigger factot基因上、下游片段PCR扩增 | 第37-39页 |
| ·整合质粒pKCTF12的构建 | 第39-51页 |
| ·pKCTF12电转化无晶体突变株XBU001 | 第51-52页 |
| ·重组菌株KCTF12 crylAc基因检测 | 第52页 |
| ·生长特性分析 | 第52-54页 |
| ·工程菌株形态学观察 | 第54-55页 |
| ·芽胞形成情况检测 | 第55-56页 |
| ·晶体蛋白的表达 | 第56页 |
| ·生物测定 | 第56-59页 |
| 4.讨论 | 第59-65页 |
| ·外源基因crylAc在重组菌株KCTF12中的表达 | 第59-60页 |
| ·染色体定点整合位点的选择 | 第60-61页 |
| ·染色体定点整合技术特点及其优势 | 第61-62页 |
| ·整合外源基因的选择 | 第62页 |
| ·crylAc基因以及trigger factor基因的克隆策略 | 第62-65页 |
| 结语 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-79页 |
| 附录 | 第79-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
