| 内容提要 | 第1-10页 |
| 前言 | 第10-21页 |
| 1 蛋白质磷酸化作用概述 | 第10-11页 |
| ·细胞信号转导概述 | 第10页 |
| ·蛋白质激酶与蛋白质磷酸酶概述 | 第10-11页 |
| 2 蛋白质酪氨酸磷酸酶简介 | 第11-13页 |
| 3 PTP-MEG2 研究现状 | 第13-19页 |
| ·PTP-MEG2 概述 | 第13-14页 |
| ·PTP-MEG2 与生物活性多肽的分泌作用 | 第14-16页 |
| ·PTP-MEG2 与机体的免疫反应 | 第16-17页 |
| ·PTP-MEG2 与疾病的关系 | 第17-19页 |
| ·PTP-MEG2 与真性红细胞增多症 | 第17-18页 |
| ·PTP-MEG2 与II 型糖尿病 | 第18-19页 |
| 4 骨质疏松症简介 | 第19-20页 |
| 5 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 实验方案 | 第21-22页 |
| 第一部分：△PTP-MEG2 的克隆与表达 | 第22-29页 |
| 1 实验材料 | 第22-24页 |
| 2 实验方法 | 第24-26页 |
| ·△PTP-MEG2 表达载体的构建 | 第24-26页 |
| ·△PTP -MEG2 的表达 | 第26页 |
| 3 结果与讨论 | 第26-28页 |
| ·目的片段的扩增 | 第26-27页 |
| ·重组质粒pT7-△PTP -MEG2 的酶切验证 | 第27-28页 |
| ·△PT P-MEG2 的表达 | 第28页 |
| 4 本章小结 | 第28-29页 |
| 第二部分：△PTP-MEG2 的分离纯化与酶学表征 | 第29-39页 |
| 1 实验材料 | 第29-30页 |
| 2 实验方法 | 第30-33页 |
| ·△PTP -MEG2 的分离纯化与活力测定 | 第30-31页 |
| ·△PTP-MEG2 最适反应温度的测定 | 第31页 |
| ·△PTP-MEG2 最适反应pH 的测定 | 第31-32页 |
| ·△PTP-MEG2 最适离子强度的测定 | 第32页 |
| ·△PTP-MEG2 在酶反应体系中稳定性的测定 | 第32页 |
| ·△PTP-MEG2 米氏常数Km 的测定 | 第32-33页 |
| ·维甲酸对△PTP-MEG2 抑制效果的测定 | 第33页 |
| 3 结果与讨论 | 第33-38页 |
| ·△PTP -MEG2 的分离纯化与活力测定 | 第33-35页 |
| ·△PTP-MEG2 最适反应条件的确定 | 第35-37页 |
| ·△PTP-MEG2 米氏常数Km 的测定 | 第37-38页 |
| ·维甲酸对△PTP-MEG2 抑制效果的测定 | 第38页 |
| 4 本章小结 | 第38-39页 |
| 第三部分：△PTP-MEG2 多克隆抗体的制备 | 第39-44页 |
| 1 实验材料 | 第39页 |
| 2 实验方法 | 第39-41页 |
| ·△PTP-MEG2 免疫家兔 | 第39-40页 |
| ·“PVDF 固定抗原的亲和层析柱”纯化多克隆抗体 | 第40页 |
| ·ECL 法检测抗体纯化前后的滴度 | 第40-41页 |
| ·ECL 法检测抗体纯化前后的灵敏度 | 第41页 |
| ·在正常大鼠组织中检测△PTP-MEG2 多克隆抗体的特异性 | 第41页 |
| 3 结果与讨论 | 第41-43页 |
| ·ECL 法检测纯化前血清滴度及灵敏度 | 第41-42页 |
| ·ECL 法检测纯化后抗体滴度及灵敏度 | 第42-43页 |
| ·在正常大鼠组织中检测△PTP-MEG2 多克隆抗体的特异性 | 第43页 |
| 4 本章小结 | 第43-44页 |
| 第四部分：PTP-MEG2 在骨质疏松大鼠组织中的表达水平检测 | 第44-54页 |
| 1 实验材料 | 第44页 |
| 2 实验方法 | 第44-47页 |
| ·大鼠骨质疏松模型的建立 | 第44-45页 |
| ·碱性磷酸酶和酸性磷酸酶指标的测定 | 第45页 |
| ·大鼠组织的提取与分离 | 第45-46页 |
| ·大鼠骨髓基质细胞的提取与培养 | 第46页 |
| ·大鼠组织中PTP-MEG2 的表达水平检测 | 第46-47页 |
| ·大鼠骨髓细胞及骨髓基质细胞中PTP-MEG2 的表达水平检测 | 第47页 |
| 3 结果与讨论 | 第47-52页 |
| ·大鼠骨质疏松模型建立过程中各项指标的检测 | 第47-50页 |
| ·大鼠骨髓基质细胞的提取与培养 | 第50页 |
| ·大鼠组织中PTP-MEG2 表达水平的检测 | 第50-51页 |
| ·大鼠骨髓细胞和BMSCs 中PTP-MEG2 表达水平的检测 | 第51-52页 |
| 4 本章小结 | 第52-54页 |
| 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 中文摘要 | 第62-64页 |
| Abstract | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
