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韭菜迟眼蕈蚊卵黄蛋白的生化特性、纯化及卵黄发生的激素调控

摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
第一部分 文献综述第11-23页
 1 昆虫卵黄蛋白种类第11-15页
   ·Vg 类卵黄蛋白第12-15页
     ·卵黄原蛋白(Vitellogenin, Vg)第12-13页
     ·卵黄多肽(yolk polypeptides, YP)第13-15页
   ·非 Vg 类卵黄蛋白第15页
 2 卵黄蛋白的理化性质及结构特点第15-19页
   ·卵黄蛋白的理化性质第15-16页
   ·卵黄蛋白的结构特点第16-19页
     ·聚丝氨酸功能区第16-17页
     ·Vg 前体的裂解位点第17-18页
     ·卵黄蛋白的进化关系第18-19页
 3 卵黄蛋白基因第19-20页
   ·卵黄蛋白基因的结构第19-20页
   ·卵黄蛋白基因的调控因子第20页
 4 昆虫的卵黄发生及激素调控第20-22页
 5 选题依据和意义第22-23页
第二部分 试验研究第23-60页
 第一章 韭菜迟眼蕈蚊卵黄蛋白的理化性质与分离纯化第23-38页
  1 材料与方法第23-29页
   ·供试昆虫和试验解剖虫态第23-24页
   ·主要化学试剂第24页
   ·主要仪器设备第24页
   ·样品的准备第24-25页
     ·电泳用蛋白样品的收集第24-25页
       ·卵样品的获取第24页
       ·卵巢样品的获取第24-25页
       ·脂肪体样品的收集第25页
       ·血淋巴的收集第25页
     ·纯化用卵黄蛋白样品的获取第25页
   ·卵黄蛋白的鉴定与分子特性第25-28页
     ·native-PAGE 不连续电泳第25-26页
       ·样品第25页
       ·主要储液配方第25-26页
       ·电泳步骤第26页
     ·SDS-PAGE 不连续电泳第26-28页
       ·样品处理第26页
       ·主要储液配方第26-27页
       ·电泳步骤第27-28页
   ·卵黄蛋白的纯化第28-29页
     ·卵黄蛋白浓度的测定第28页
     ·硫酸铵沉淀第28页
     ·Sephacryl S-200 凝胶过滤层析纯化第28-29页
       ·Sephacryl S-200 装柱第28-29页
       ·卵黄蛋白的纯化步骤第29页
     ·DEAE-Sepharose Fast Flow 阴离子交换层析第29页
  2 结果与分析第29-35页
   ·卵黄蛋白的鉴定及分子特性第29-32页
     ·native-PAGE第29-31页
     ·SDS-PAGE 不连续电泳第31-32页
   ·卵黄蛋白的纯化第32-33页
     ·卵黄蛋白的浓度测定第32页
     ·Sephacryl S-200 凝胶过滤层析第32-33页
   ·阴离子交换层析第33-34页
   ·各纯化步骤结果对比第34-35页
  3 讨论第35-38页
 第二章 外源激素对韭菜迟眼蕈蚊卵黄蛋白含量的影响第38-50页
  1 材料与方法第38-43页
   ·供试虫源第38页
   ·试剂第38页
   ·处理方法及样品收集第38-39页
     ·蚊蝇醚处理第38页
     ·早熟素Ⅱ处理第38-39页
     ·植物源蜕皮激素处理第39页
   ·卵黄蛋白抗体的制备第39-40页
     ·卵黄蛋白抗血清的制备第39页
     ·抗血清的采集第39页
     ·效价的测定第39-40页
   ·卵黄蛋白抗体的纯化第40-41页
     ·主要仪器与试剂第40页
     ·DEAE-52 纤维素的处理第40页
     ·IgG 的纯化第40页
     ·IgG 蛋白浓度的测定(Bradford 检测法)第40-41页
       ·试剂与仪器第40页
       ·常量法标准曲线制作第40-41页
       ·IgG 蛋白浓度的测定第41页
   ·卵黄蛋白的 ELISA 试验(间接法)第41-43页
     ·试剂第41-42页
     ·仪器第42页
     ·操作方法第42-43页
  2 结果与分析第43-48页
   ·琼脂糖免疫双扩散试验第43页
   ·兔抗血清标准曲线第43-44页
   ·外源激素对卵黄发生的影响第44-48页
     ·蚊蝇醚处理韭菜迟眼蕈蚊组织中卵黄蛋白含量的动态第44-45页
     ·早熟素处理韭菜迟眼蕈蚊组织中卵黄蛋白含量的动态第45-47页
     ·植物源蜕皮激素处理韭菜迟眼蕈蚊组织中卵黄蛋白含量的动态第47-48页
  3 讨论第48-50页
 第三章 韭菜迟眼蕈蚊卵黄发生与保幼激素和蜕皮激素的关系第50-60页
  1 材料与方法第50-52页
   ·韭菜迟眼蕈蚊不同发育时期卵黄蛋白的动态测定第50页
   ·保幼激素和蜕皮激素的测定第50-52页
     ·试剂第50页
     ·仪器第50页
     ·色谱条件第50-51页
       ·保幼激素色谱条件第50-51页
       ·蜕皮激素色谱条件第51页
     ·供试虫源及样品第51页
     ·样品制备第51-52页
       ·测定保幼激素含量的样品制备第51页
       ·测定20-羟基蜕皮酮含量的样品制备第51-52页
  2 结果与分析第52-59页
   ·韭菜迟眼蕈蚊不同发育时期卵黄蛋白的动态第52-53页
   ·保幼激素滴度的测定第53-56页
     ·标样色谱图第53-54页
     ·样品色谱图第54页
     ·保幼激素测定结果第54-56页
   ·蜕皮激素滴度的测定第56-59页
     ·标样色谱图第56-57页
     ·样品色谱图第57页
     ·蜕皮激素测定结果第57-59页
  3 讨论第59-60页
第三部分 结论第60-61页
第四部分 总讨论第61-64页
参考文献第64-74页
致谢第74-75页
攻读学位期间发表论文情况第75页

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