摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-23页 |
1 昆虫卵黄蛋白种类 | 第11-15页 |
·Vg 类卵黄蛋白 | 第12-15页 |
·卵黄原蛋白(Vitellogenin, Vg) | 第12-13页 |
·卵黄多肽(yolk polypeptides, YP) | 第13-15页 |
·非 Vg 类卵黄蛋白 | 第15页 |
2 卵黄蛋白的理化性质及结构特点 | 第15-19页 |
·卵黄蛋白的理化性质 | 第15-16页 |
·卵黄蛋白的结构特点 | 第16-19页 |
·聚丝氨酸功能区 | 第16-17页 |
·Vg 前体的裂解位点 | 第17-18页 |
·卵黄蛋白的进化关系 | 第18-19页 |
3 卵黄蛋白基因 | 第19-20页 |
·卵黄蛋白基因的结构 | 第19-20页 |
·卵黄蛋白基因的调控因子 | 第20页 |
4 昆虫的卵黄发生及激素调控 | 第20-22页 |
5 选题依据和意义 | 第22-23页 |
第二部分 试验研究 | 第23-60页 |
第一章 韭菜迟眼蕈蚊卵黄蛋白的理化性质与分离纯化 | 第23-38页 |
1 材料与方法 | 第23-29页 |
·供试昆虫和试验解剖虫态 | 第23-24页 |
·主要化学试剂 | 第24页 |
·主要仪器设备 | 第24页 |
·样品的准备 | 第24-25页 |
·电泳用蛋白样品的收集 | 第24-25页 |
·卵样品的获取 | 第24页 |
·卵巢样品的获取 | 第24-25页 |
·脂肪体样品的收集 | 第25页 |
·血淋巴的收集 | 第25页 |
·纯化用卵黄蛋白样品的获取 | 第25页 |
·卵黄蛋白的鉴定与分子特性 | 第25-28页 |
·native-PAGE 不连续电泳 | 第25-26页 |
·样品 | 第25页 |
·主要储液配方 | 第25-26页 |
·电泳步骤 | 第26页 |
·SDS-PAGE 不连续电泳 | 第26-28页 |
·样品处理 | 第26页 |
·主要储液配方 | 第26-27页 |
·电泳步骤 | 第27-28页 |
·卵黄蛋白的纯化 | 第28-29页 |
·卵黄蛋白浓度的测定 | 第28页 |
·硫酸铵沉淀 | 第28页 |
·Sephacryl S-200 凝胶过滤层析纯化 | 第28-29页 |
·Sephacryl S-200 装柱 | 第28-29页 |
·卵黄蛋白的纯化步骤 | 第29页 |
·DEAE-Sepharose Fast Flow 阴离子交换层析 | 第29页 |
2 结果与分析 | 第29-35页 |
·卵黄蛋白的鉴定及分子特性 | 第29-32页 |
·native-PAGE | 第29-31页 |
·SDS-PAGE 不连续电泳 | 第31-32页 |
·卵黄蛋白的纯化 | 第32-33页 |
·卵黄蛋白的浓度测定 | 第32页 |
·Sephacryl S-200 凝胶过滤层析 | 第32-33页 |
·阴离子交换层析 | 第33-34页 |
·各纯化步骤结果对比 | 第34-35页 |
3 讨论 | 第35-38页 |
第二章 外源激素对韭菜迟眼蕈蚊卵黄蛋白含量的影响 | 第38-50页 |
1 材料与方法 | 第38-43页 |
·供试虫源 | 第38页 |
·试剂 | 第38页 |
·处理方法及样品收集 | 第38-39页 |
·蚊蝇醚处理 | 第38页 |
·早熟素Ⅱ处理 | 第38-39页 |
·植物源蜕皮激素处理 | 第39页 |
·卵黄蛋白抗体的制备 | 第39-40页 |
·卵黄蛋白抗血清的制备 | 第39页 |
·抗血清的采集 | 第39页 |
·效价的测定 | 第39-40页 |
·卵黄蛋白抗体的纯化 | 第40-41页 |
·主要仪器与试剂 | 第40页 |
·DEAE-52 纤维素的处理 | 第40页 |
·IgG 的纯化 | 第40页 |
·IgG 蛋白浓度的测定(Bradford 检测法) | 第40-41页 |
·试剂与仪器 | 第40页 |
·常量法标准曲线制作 | 第40-41页 |
·IgG 蛋白浓度的测定 | 第41页 |
·卵黄蛋白的 ELISA 试验(间接法) | 第41-43页 |
·试剂 | 第41-42页 |
·仪器 | 第42页 |
·操作方法 | 第42-43页 |
2 结果与分析 | 第43-48页 |
·琼脂糖免疫双扩散试验 | 第43页 |
·兔抗血清标准曲线 | 第43-44页 |
·外源激素对卵黄发生的影响 | 第44-48页 |
·蚊蝇醚处理韭菜迟眼蕈蚊组织中卵黄蛋白含量的动态 | 第44-45页 |
·早熟素处理韭菜迟眼蕈蚊组织中卵黄蛋白含量的动态 | 第45-47页 |
·植物源蜕皮激素处理韭菜迟眼蕈蚊组织中卵黄蛋白含量的动态 | 第47-48页 |
3 讨论 | 第48-50页 |
第三章 韭菜迟眼蕈蚊卵黄发生与保幼激素和蜕皮激素的关系 | 第50-60页 |
1 材料与方法 | 第50-52页 |
·韭菜迟眼蕈蚊不同发育时期卵黄蛋白的动态测定 | 第50页 |
·保幼激素和蜕皮激素的测定 | 第50-52页 |
·试剂 | 第50页 |
·仪器 | 第50页 |
·色谱条件 | 第50-51页 |
·保幼激素色谱条件 | 第50-51页 |
·蜕皮激素色谱条件 | 第51页 |
·供试虫源及样品 | 第51页 |
·样品制备 | 第51-52页 |
·测定保幼激素含量的样品制备 | 第51页 |
·测定20-羟基蜕皮酮含量的样品制备 | 第51-52页 |
2 结果与分析 | 第52-59页 |
·韭菜迟眼蕈蚊不同发育时期卵黄蛋白的动态 | 第52-53页 |
·保幼激素滴度的测定 | 第53-56页 |
·标样色谱图 | 第53-54页 |
·样品色谱图 | 第54页 |
·保幼激素测定结果 | 第54-56页 |
·蜕皮激素滴度的测定 | 第56-59页 |
·标样色谱图 | 第56-57页 |
·样品色谱图 | 第57页 |
·蜕皮激素测定结果 | 第57-59页 |
3 讨论 | 第59-60页 |
第三部分 结论 | 第60-61页 |
第四部分 总讨论 | 第61-64页 |
参考文献 | 第64-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第75页 |