| 摘要 | 第1-16页 |
| ABSTRACT | 第16-22页 |
| 第一篇 文献综述 | 第22-58页 |
| 1 热应激产生机制 | 第22-24页 |
| 2 热应激对奶牛生产性能和生理生化指标的影响 | 第24-33页 |
| ·对生产性能的影响 | 第24-27页 |
| ·采食量 | 第24-25页 |
| ·产奶性能 | 第25页 |
| ·繁殖性能 | 第25-26页 |
| ·疾病发生率 | 第26-27页 |
| ·对生理生化参数的影响 | 第27-33页 |
| ·生理指标 | 第27页 |
| ·酶活力 | 第27-28页 |
| ·血糖 | 第28-29页 |
| ·血液蛋白质及其代谢产物 | 第29页 |
| ·血液无机物 | 第29-30页 |
| ·内分泌机能 | 第30-32页 |
| ·免疫功能 | 第32-33页 |
| 3 娟姗牛和荷斯坦牛的习性 | 第33-37页 |
| ·娟姗牛的主要生产性能 | 第34-35页 |
| ·高乳脂率和乳蛋白率 | 第34页 |
| ·高湿热环境的适应性 | 第34页 |
| ·繁殖效率高 | 第34页 |
| ·饲料利用效率高 | 第34页 |
| ·济效益高 | 第34-35页 |
| ·娟姗牛的杂交利用 | 第35页 |
| ·中国荷斯坦奶牛的主要习性 | 第35-37页 |
| ·泌乳性能 | 第35-36页 |
| ·繁殖性能 | 第36页 |
| ·适应性能 | 第36页 |
| ·杂交效果 | 第36-37页 |
| 4 有关热应激细胞免疫调控及分子机理研究进展 | 第37-46页 |
| ·细胞凋亡的基因调控 | 第37-38页 |
| ·奶牛热休克蛋白的热应激调控机制 | 第38-42页 |
| ·热应激蛋白基本特点 | 第38-39页 |
| ·热休克蛋白的热应激调控机制 | 第39-40页 |
| ·热应激蛋白在奶牛抗热应激中热耐力的特点 | 第40-41页 |
| ·热应激蛋白在热应激中的作用机理 | 第41页 |
| ·奶牛热应激条件下HSP70的检测方法 | 第41-42页 |
| ·Bcl-2/Bax基因与奶牛热应激 | 第42-43页 |
| ·抗热应激奶牛分子遗传标记研究 | 第43-46页 |
| 参考文献(REFERENCES) | 第46-58页 |
| 第二篇 实验研究 | 第58-130页 |
| 实验一 娟荷杂交牛培育及与荷斯坦奶牛性能比较 | 第58-70页 |
| 1 材料和方法 | 第58-59页 |
| ·娟荷杂交牛来源及实验动物 | 第58-59页 |
| ·试验方法 | 第59页 |
| ·体尺体重测定 | 第59页 |
| ·测定生产性能 | 第59页 |
| ·环境温湿度的测定 | 第59页 |
| ·体温、皮温和呼吸率 | 第59页 |
| ·数据分析 | 第59页 |
| 2 结果 | 第59-65页 |
| ·娟荷杂交牛和荷斯坦奶牛的体尺体重 | 第59-60页 |
| ·娟荷杂交牛和荷斯坦奶牛的泌乳性能比较 | 第60-62页 |
| ·娟荷杂交牛和荷斯坦奶牛的泌乳曲线 | 第62页 |
| ·热应激期间牛舍温热环境的变化 | 第62-63页 |
| ·热应激对奶牛直肠温度、皮温和呼吸率的影响 | 第63-64页 |
| ·热应激对娟荷杂交牛和荷斯坦奶牛产奶量的影响 | 第64-65页 |
| 3 讨论 | 第65-67页 |
| ·娟荷杂交牛的耐热性能 | 第65-66页 |
| ·娟荷杂交牛的产奶性能 | 第66-67页 |
| 4 本章小结 | 第67页 |
| 参考文献(REFERENCES) | 第67-70页 |
| 实验二 热应激对奶牛血液流变学与生化指标的影响 | 第70-78页 |
| 1 材料和方法 | 第70-71页 |
| ·试验动物与处理 | 第70页 |
| ·血液样本采集 | 第70-71页 |
| ·测定方法 | 第71页 |
| ·血液流变指标测定 | 第71页 |
| ·血液生化指标测定 | 第71页 |
| ·数据处理 | 第71页 |
| 2 结果 | 第71-73页 |
| ·热应激对不同品种牛血液流变学的影响 | 第71-72页 |
| ·热应激对奶牛血清无机离子浓度的影响 | 第72页 |
| ·热应激对奶牛血清酶活性的影响 | 第72-73页 |
| 3 讨论 | 第73-75页 |
| 4 本章小结 | 第75页 |
| 参考文献(REFERENCES) | 第75-78页 |
| 实验三 热应激对奶牛抗氧化特性的影响 | 第78-88页 |
| 1 材料和方法 | 第79-80页 |
| ·实验动物与处理 | 第79页 |
| ·血清制备 | 第79页 |
| ·测定方法 | 第79页 |
| ·数据处理 | 第79-80页 |
| 2 结果与分析 | 第80-82页 |
| ·血清中的NO浓度变化 | 第80页 |
| ·血清中NOS活力变化 | 第80-81页 |
| ·夏季奶牛血清中的抗氧化指标 | 第81页 |
| ·冬季奶牛血清中的抗氧化指标 | 第81页 |
| ·不同季节下奶牛血清中抗氧化指标的变化 | 第81-82页 |
| 3 讨论 | 第82-85页 |
| ·热应激与一氧化氮代谢的关系 | 第82-83页 |
| ·热应激条件下自由基代谢变化 | 第83-85页 |
| 4 本章小结 | 第85页 |
| 参考文献(REFERENCES) | 第85-88页 |
| 实验四 热应激对奶牛免疫功能的影响 | 第88-98页 |
| 1 材料与方法 | 第88-90页 |
| ·试验动物 | 第88页 |
| ·样本采集 | 第88页 |
| ·主要仪器 | 第88页 |
| ·测定方法 | 第88-89页 |
| ·IgG,IgA和IgM的检测 | 第88-89页 |
| ·淋巴细胞转化指数 | 第89页 |
| ·玫瑰花环试验法检测免疫细胞变化 | 第89页 |
| ·乳中体细胞数 | 第89页 |
| ·数据处理 | 第89-90页 |
| 2 结果 | 第90-92页 |
| ·热应激对奶牛各类免疫球蛋白量的影晌 | 第90页 |
| ·热应激对乳中体细胞数的影响 | 第90-91页 |
| ·热应激对淋巴细胞刺激指数、E-玫瑰花环形成率的影响 | 第91-92页 |
| 3 讨论 | 第92-95页 |
| ·热应激对奶牛淋巴细胞转化率、花环形成率的影响 | 第92-93页 |
| ·热应激对奶牛体细胞数、免疫球蛋白的影响 | 第93-95页 |
| 4 本章小结 | 第95页 |
| 参考文献(REFERENCES) | 第95-98页 |
| 实验五 奶牛HSP基因表达、多态性与耐热性的关系分析 | 第98-120页 |
| 1 材料与方法 | 第99-103页 |
| ·实验动物与测定条件 | 第99页 |
| ·采集血样 | 第99页 |
| ·主要试剂 | 第99-100页 |
| ·生化及耐热性能指标的测定 | 第100页 |
| ·引物设计和PCR扩增 | 第100-101页 |
| ·PCR-SSCP检测 | 第101页 |
| ·测序分析 | 第101页 |
| ·血液淋巴细胞中热应激蛋白HSP70的表达 | 第101-103页 |
| ·淋巴细胞内蛋白质的提取 | 第101-102页 |
| ·样品总蛋白浓度测定及标准曲线制作 | 第102页 |
| ·电泳 | 第102页 |
| ·免疫印迹 | 第102-103页 |
| ·统计分析 | 第103页 |
| 2 结果与分析 | 第103-112页 |
| ·PCR-SSCP分析结果 | 第103-104页 |
| ·序列分析结果 | 第104-105页 |
| ·基因频率、基因型频率和遗传多态性分析 | 第105-106页 |
| ·Hardy-Weinberg平衡的检验 | 第106页 |
| ·HSP基因不同位点多态性与血清生化指标关联分析 | 第106-109页 |
| ·HSPA1A 5’-侧翼区基因多态性研究 | 第109页 |
| ·HSPA1A 5’-侧翼区基因SSCP多态性与耐热性能之间的关系 | 第109-110页 |
| ·不同季节对荷斯坦奶牛血液淋巴细胞热应激蛋白HSP70表达的影响 | 第110-111页 |
| ·热应激对荷斯坦牛和娟荷杂交F_1牛血液淋巴细胞热应激蛋白HSP70表达的影响 | 第111-112页 |
| 3 讨论 | 第112-115页 |
| ·奶牛HSP基因多态性与血清生化指标的相关性分析 | 第112-113页 |
| ·奶牛HSPA1A基因SSCP多态性与耐热性能的相关分析 | 第113-114页 |
| ·热应激蛋白在奶牛处在热应激时的作用 | 第114-115页 |
| 4 本章小结 | 第115-116页 |
| 参考文献(REFERENCES) | 第116-120页 |
| 实验六 热应激奶牛肝脾HSP70的表达特征及细胞凋亡观测 | 第120-130页 |
| 1 材料和方法 | 第120-122页 |
| ·实验动物及热应激条件 | 第120-121页 |
| ·实验仪器 | 第121页 |
| ·试剂 | 第121页 |
| ·组织样本制备 | 第121页 |
| ·细胞凋亡透射电子显微镜观察 | 第121页 |
| ·热应激奶牛肝脏和脾脏组织中HSP70检测 | 第121-122页 |
| ·组织包埋及切片 | 第121-122页 |
| ·染色程序 | 第122页 |
| ·图象分析 | 第122页 |
| ·统计学处理 | 第122页 |
| 2 结果 | 第122-127页 |
| ·不同热应激条件下犊牛脾脏显微组织结构变化 | 第122-125页 |
| ·HSP70免疫组化定位及热应激奶牛组织中HSP70含量变化 | 第125-126页 |
| ·细胞凋亡观察 | 第126-127页 |
| 3 讨论 | 第127-128页 |
| 4 本章小结 | 第128页 |
| 参考文献(REFERENCES) | 第128-130页 |
| 全文结论 | 第130-132页 |
| 全文创新 | 第132-134页 |
| 附录 | 第134-138页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第138-140页 |
| 致谢 | 第140页 |
